吉彤珍，劉 晶

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院 檢驗(yàn)科,北京100026)

孕婦B群無乳鏈球菌篩查及藥敏對(duì)比分析

吉彤珍，劉 晶*

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院 檢驗(yàn)科,北京100026)

B群無乳鏈球菌(GBS)是孕婦圍產(chǎn)期和新生兒感染的重要病原菌。該菌可寄居于婦女陰道和直腸，可引起婦女生殖道感染，尤其婦女在圍產(chǎn)期感染可導(dǎo)致胎膜早破、早產(chǎn)、流產(chǎn)及宮內(nèi)感染等一系列妊娠并發(fā)癥；在分娩時(shí)新生兒經(jīng)過產(chǎn)道可引起肺炎、腦膜炎、敗血癥等感染，嚴(yán)重者可造成新生兒死亡。因此如何合理選用抗生素治療顯得尤為重要。為此我們對(duì)來我院做妊娠檢查的婦女在35-37周時(shí)進(jìn)行B群無乳鏈球菌篩查，并將藥敏結(jié)果做了對(duì)比性分析，希望能對(duì)臨床用藥起到很好的指導(dǎo)作用。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 2014年3月-2015年4月來我院就診孕婦，孕期在35-37周，標(biāo)本為陰道直腸聯(lián)合取分泌物。

1.2 儀器與試劑 采用法國(guó)梅里埃公司VITEK2compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀器及配套鑒定卡。5%哥倫比亞羊血瓊脂平板、MH血平板均使用Oxoid公司產(chǎn)品。B-群鏈球菌顯色平板使用安圖生物工程股份有限公司產(chǎn)品。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 將臨床送檢標(biāo)本按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》規(guī)定的方法進(jìn)行分離培養(yǎng)[1]，選取可疑菌落做初步鑒定(在血平板上的革蘭氏陽性球菌，β溶血，觸酶陰性，CAMP試驗(yàn)陽性菌落)。CAMP試驗(yàn)用金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.4 細(xì)菌鑒定 取初步鑒定的菌落在VITEK2compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定藥敏儀器上做鑒定，試驗(yàn)過程嚴(yán)格按操作說明進(jìn)行。質(zhì)控菌株為ATCC700327鉛黃腸球菌，購(gòu)于衛(wèi)生部臨檢中心。

1.5 藥敏試驗(yàn) 用紙片擴(kuò)散法(Kirby-Bauer,KB法)，挑取37°C培養(yǎng)18-24 h生長(zhǎng)良好菌落配成濃度0.5麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙?，接種于MH血平板，將藥敏紙片貼于平皿上，37°培養(yǎng)18-24 h后測(cè)量抑菌環(huán)直徑，結(jié)果按2010年美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)藥物敏感性判定標(biāo)準(zhǔn)判定藥敏結(jié)果。對(duì)紅霉素耐藥、克林霉素敏感或中介株做D試驗(yàn)，按上述方法進(jìn)行細(xì)菌接種，將紅霉素、克林霉素貼在間隔12 mm相鄰位置，培養(yǎng)18-24 h。紅霉素耐藥，紅霉素相鄰側(cè)的克林霉素抑菌環(huán)出現(xiàn)”截平”現(xiàn)象，報(bào)告D試驗(yàn)陽性，提示克林霉素存在誘導(dǎo)型耐藥。質(zhì)控菌株為ATCC25923。

2 結(jié)果

2.1 在2014年3月-2015年4月間我院做GBS篩查標(biāo)本共3095份，分離出B群無乳鏈球菌119株，分離率3.8%。藥敏結(jié)果顯示119株無乳鏈球菌對(duì)青霉素、氨芐西林、萬古霉素、利奈唑胺敏感性均為100%，對(duì)紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星耐藥率分別為77.3%、61.3%、44.5%。藥敏結(jié)果見表1。

2.2 D試驗(yàn)結(jié)果 119株無乳鏈球菌中對(duì)紅霉素耐藥、克林霉素敏感或中介共24株，D試驗(yàn)陽性9株,陽性率47.4%。結(jié)果見表2。

表1 119株無乳鏈球菌對(duì)7種抗菌藥物敏感性結(jié)果

表2 D試驗(yàn)結(jié)果

S：敏感、I：中介、R：耐藥

3 討論

無乳鏈球菌常寄居于女性生殖道，幾乎是圍產(chǎn)期感染的首要致病菌[2]。本次分析中無乳鏈球菌的分離率為3.8%，低于我院以往感染率[3]。原因可能為針對(duì)人群不同，培養(yǎng)方法差異且GBS為間歇性帶菌造成。GBS可通過產(chǎn)道上行引起宮內(nèi)感染，也可通過垂直傳播引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等嚴(yán)重感染。因此實(shí)驗(yàn)室及時(shí)報(bào)告無乳鏈球菌的檢出及藥敏結(jié)果可為臨床提供產(chǎn)時(shí)治療和用藥依據(jù)。通過對(duì)119株無乳鏈球菌的藥敏分析，GBS對(duì)青霉素、氨芐西林敏感率為100%，對(duì)比我院劉晶2013年的報(bào)道[4]青霉素、氨芐西林均未出現(xiàn)耐藥株。根據(jù)CLSI指南無乳鏈球菌對(duì)青霉素、氨芐西林敏感可判定對(duì)頭孢唑啉，頭孢曲松，頭孢噻肟，頭孢吡肟，阿莫西林/克拉維酸，亞胺培南及美洛培南敏感。青霉素由于副作用小，依然是孕婦及新生兒治療無乳鏈球菌感染的首選藥物。對(duì)青霉素輕度過敏患者建議使用第一、第二代頭孢菌素。第三、四代頭孢菌素長(zhǎng)期使用容易引起菌群失調(diào)，造成細(xì)菌耐藥性增加，同時(shí)增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，建議慎重選用。對(duì)青霉素嚴(yán)重過敏患者建議使用紅霉素或克林霉素。本次藥敏結(jié)果GBS對(duì)紅霉素耐藥率已高達(dá)77.3%，對(duì)克林霉素耐藥為61.3%，均高于我院以往的報(bào)道[4]。可能與長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)用藥有關(guān)。GBS有兩種耐藥機(jī)制，一種是erm基因編碼的靶位修飾引起的大環(huán)內(nèi)酯類，林可霉素類，鏈陽霉素B耐藥(MLS型耐藥)，另一種是mefA基因編碼外排蛋白使細(xì)菌僅對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類耐藥(MS型耐藥)[5]。MLS型耐藥分為誘導(dǎo)型耐藥(iMLS)和組合型(cMLS)。iMLS型耐藥表型對(duì)紅霉素耐藥對(duì)克林霉素敏感，cMLS型耐藥表型對(duì)紅霉素、克林霉素均耐藥。本實(shí)驗(yàn)測(cè)得紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥占47.4%，提示臨床醫(yī)生當(dāng)孕婦有GBS感染且對(duì)青霉素嚴(yán)重過敏時(shí)，應(yīng)先對(duì)紅霉素和克林霉素進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏結(jié)果選用抗菌藥物。切實(shí)達(dá)到及時(shí)、有效的治療結(jié)果。無乳鏈球菌對(duì)萬古霉素、利奈唑胺敏感率也為100%，但是萬古霉素有腎毒性，還可以導(dǎo)致耳聾，新生兒要慎用。左氧氟沙星耐藥率為44.5%與以往的45.3%的耐藥率相近。由于左氧氟沙星對(duì)孕婦及新生兒都有較大的副作用，因此治療GBS時(shí)不宜選用。

綜上所述，加強(qiáng)孕婦GBS的篩查工作，及時(shí)準(zhǔn)確的報(bào)告藥敏結(jié)果有助于GBS的早發(fā)現(xiàn)、早治療，從而減少新生兒GBS感染，提高新生兒的出生質(zhì)量。

[1]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程．第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006:737-753.

[2]Baker CJ,Byington CL,polin RA.Policy statement - Recommendations for the prevention of perinatal group B streptococcal (GBS) disease[J].Pediatrics,2011,128(3):611.

[3]馬延敏，吳連方，黃醒華，等．孕婦B組溶血性鏈球菌帶菌與母嬰預(yù)后的探討[J].北京醫(yī)學(xué)，2005,27(9)：516.

[4]劉 晶，吉彤珍，趙 娟．孕婦感染B群無乳鏈球菌的耐藥性分析[J]．中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2013,23(16)：3298.

[5]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing (S).Sixteenth informational supplement M100-S16.Wayne,Pennsylivania,2006,26(3).

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院中青年學(xué)科骨干培養(yǎng)專項(xiàng)(課題編號(hào)fcyy201505)

1007-4287(2016)12-2072-02

2015-10-11)

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