張 輝,郭 瑛

(1.北京優(yōu)聯(lián)耳鼻喉醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京100122；2.北京市朝陽(yáng)區(qū)三環(huán)腫瘤醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京100122)

自制腫瘤標(biāo)志物室內(nèi)質(zhì)控血清的應(yīng)用評(píng)價(jià)

張 輝1,郭 瑛2

(1.北京優(yōu)聯(lián)耳鼻喉醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京100122；2.北京市朝陽(yáng)區(qū)三環(huán)腫瘤醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京100122)

目的 探討患者血清作為化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物室內(nèi)質(zhì)控品的可行性。方法 收集日常工作中無(wú)傳染性的剩余血清，自制甲胎蛋白等8個(gè)腫瘤標(biāo)志物項(xiàng)目的高值、低值室內(nèi)質(zhì)控品，每日隨日常標(biāo)本一同在Cobas8000分析儀上進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)其精密度及穩(wěn)定性等參數(shù)進(jìn)行分析。并用伯樂公司(BIO-RAD)質(zhì)控品進(jìn)行跟蹤比較。結(jié)果 在Cobas8000分析儀上，實(shí)驗(yàn)室自制質(zhì)控品各項(xiàng)指標(biāo)與BIO-RAD質(zhì)控品無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P>0.05)。結(jié)論 自制質(zhì)控品具有制備過(guò)程簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性好、成本低等優(yōu)點(diǎn)，可以滿足室內(nèi)質(zhì)量控制的要求。

自制質(zhì)控血清；腫瘤標(biāo)志物；室內(nèi)質(zhì)量控制

(ChinJLabDiagn,2016,20:2027)

血清腫瘤標(biāo)志物(TM)的檢測(cè)在腫瘤輔助診斷、療效觀察及評(píng)估預(yù)后中都具有重要的臨床意義。要獲得可靠的檢測(cè)結(jié)果，必須建立一個(gè)全面的質(zhì)量控制體系，做好實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制是其中一個(gè)重要環(huán)節(jié)[1]。目前國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室使用的質(zhì)控品多是國(guó)外生產(chǎn)的凍干品，訂貨周期長(zhǎng)且成本較高。近年來(lái)已有國(guó)內(nèi)外學(xué)者開始進(jìn)行自制質(zhì)控品的應(yīng)用及穩(wěn)定性研究[2-4]。本實(shí)驗(yàn)利用日常檢測(cè)剩余血清，自制腫瘤標(biāo)志物室內(nèi)質(zhì)控品，并對(duì)其精密度及穩(wěn)定性等參數(shù)進(jìn)行分析，評(píng)估其臨床應(yīng)用的可行性。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 Cobas8000全自動(dòng)羅氏電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)，校準(zhǔn)品、試劑及耗材均為原裝配套產(chǎn)品。Thermo 905零下80℃超低溫冰箱。BIO-RAD Tumor Marker Plus Control質(zhì)控物，批號(hào)分別為54561、54562。

1.2 質(zhì)控血清制備 包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原CA199、CA153、CA125、CA724、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA211)共8個(gè)項(xiàng)目。收集日常檢測(cè)中感染組合(乙肝五項(xiàng)、丙肝、艾滋、梅毒)均呈陰性，無(wú)溶血、乳糜、黃疸的剩余血清，用已知的高濃度病人血清調(diào)整TM濃度。使各項(xiàng)標(biāo)志物的濃度至兩個(gè)水平：一水平接近相應(yīng)TM的參考范圍上限，作為低值質(zhì)控物；另一水平和BIO-RAD Level2濃度相近，作為高值質(zhì)控物，-80℃冷凍保存。兩周后，置于4℃冰箱緩慢解凍，混勻，過(guò)濾去除血清中膠凍狀的聚集物，再行感染組合檢測(cè)后，每支0.5 ml密閉分裝，-80℃冰箱保存待用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理。多組間比較用F檢驗(yàn)，兩組間比較用T檢驗(yàn)。P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.2 與BIO-RAD定值質(zhì)控品比較 自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品120天累積實(shí)測(cè)值對(duì)比見表2、表3。對(duì)高、低濃度水平120天各項(xiàng)TM檢測(cè)的累積變異系數(shù)與BIO-RAD質(zhì)控品的累積變異系數(shù)進(jìn)行T檢驗(yàn)，P值分別為0.153及0.325，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2.3 自制質(zhì)控品穩(wěn)定性觀察 自制質(zhì)控品120天內(nèi)各月測(cè)定值見表4、表5，對(duì)各月均值進(jìn)行多組間F檢驗(yàn)，P值均>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明在實(shí)驗(yàn)期內(nèi)自制質(zhì)控品穩(wěn)定性良好。

表1 同日20份自制質(zhì)控品檢測(cè)各項(xiàng)TM的均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)

表2 自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品各項(xiàng)TM 120天累積實(shí)測(cè)值低值的對(duì)比

表3 自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品各項(xiàng)TM 120天累積實(shí)測(cè)值高值的對(duì)比

表4 自制低值質(zhì)控品各月TM測(cè)定值±SD)比較

表5 自制高值質(zhì)控品各月TM測(cè)定值±SD)比較

3 討論

在全面質(zhì)量管理體系中，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制是一個(gè)重要環(huán)節(jié)，而質(zhì)控品是保證質(zhì)控工作的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。根據(jù)衛(wèi)生部《臨床實(shí)驗(yàn)室定量測(cè)定室內(nèi)質(zhì)量控制指南》[1]，質(zhì)控品物理性狀可有凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品和混合血清等；質(zhì)控血清應(yīng)盡可能與人血清樣本一致，減少基質(zhì)效應(yīng)，反應(yīng)速率盡量與人血清一致，并考慮合理的成本。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)對(duì)自制質(zhì)控品日內(nèi)、日間各項(xiàng)指標(biāo)的分析，自制質(zhì)控血清瓶間變異小，觀察期內(nèi)質(zhì)控品均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)均保持了良好的穩(wěn)定性，與BIO-RAD質(zhì)控品的各項(xiàng)指標(biāo)比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，各項(xiàng)目變異系數(shù)均在不精密度要求[5]范圍內(nèi)。各項(xiàng)TM檢測(cè)的每月均值、累積均值各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，無(wú)明顯漂移及趨勢(shì)變化，觀察期內(nèi)未發(fā)生由質(zhì)控品原因引起的失控。在自制質(zhì)控品做質(zhì)控物期間，8個(gè)TM項(xiàng)目共出現(xiàn)2次由于試劑原因引起的室內(nèi)質(zhì)控失控，自制質(zhì)控品與BIO-RAD質(zhì)控品同時(shí)出現(xiàn)報(bào)警。自制質(zhì)控品除具有無(wú)基質(zhì)效應(yīng)、制備過(guò)程簡(jiǎn)單、成本低廉外，實(shí)驗(yàn)室還可以根據(jù)實(shí)際需要，配制自己所需濃度區(qū)間的TM質(zhì)控品，本實(shí)驗(yàn)配制了8個(gè)TM參考區(qū)間上限和病理值兩個(gè)濃度水平。由于本院腫瘤病人較多，配制相應(yīng)TM濃度水平質(zhì)控物方便。對(duì)于高值血清不易獲得的實(shí)驗(yàn)室，可利用冷凍液體血清在緩慢解凍后，物質(zhì)濃度會(huì)產(chǎn)生梯度變化的原理制備高、低各水平的質(zhì)控物[6]。還有學(xué)者使用單份病人血清分裝制備，避免了各個(gè)抗原抗體之間的相互交叉和干擾[7]。在自制質(zhì)控品的制備過(guò)程中，必須嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)對(duì)血清進(jìn)行篩選，以保證自制質(zhì)控品性狀滿足指南中對(duì)液性質(zhì)控物的基本要求。

由于本實(shí)驗(yàn)觀察期較短，對(duì)于自制質(zhì)控品更長(zhǎng)的穩(wěn)定期，還需繼續(xù)觀察。對(duì)于使用自制質(zhì)控品的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)當(dāng)根據(jù)具體條件，制定適合自己實(shí)驗(yàn)室的自制質(zhì)控品制備方法、使用規(guī)程、靶值設(shè)定及相應(yīng)質(zhì)控規(guī)則選擇的標(biāo)準(zhǔn)化文件。確保實(shí)驗(yàn)室管理者在合理考慮成本的同時(shí)，保證檢驗(yàn)質(zhì)量，促進(jìn)質(zhì)量持續(xù)改進(jìn)。

[1]GB/T 20468-2006,中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部《臨床實(shí)驗(yàn)室定量測(cè)定室內(nèi)質(zhì)量控制指南》[S].

[2]Goi G,Besozzi M,Bairati C ,et al.Preparation of a Stable Liquid Material for Calibration and Quality Control for Lysosomal Enzymes in Plasma [J].Eur J Clin Chem Clin Biochem,1992,30(10):595.

[3]張麗萍，劉元明，張金紅,等.自制他克莫司室內(nèi)質(zhì)控品的制備及臨床應(yīng)用研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013(11):1021.

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[5]王治國(guó).臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2004:42-54.

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The preparation and clinical application research of home-made quality control material

ZHANGHui,GUOYing.

(DepartmentofClinicalLaboratoryofUnicareENTHospital,Beijing100122,China)

Objective To explore feasibility of home-made quality control material.Methods home-made quality control material was prepare by using routine residual serum and was run on Cobas8000 with daily serum samples and RIO-RAD control.Results home-made quality control material show good stability and have no significant difference with RIO-RAD control(P>0.05).Conclusion home-made quality control serum have advantages of low cost,good stability,and can meet the requirements of internal quality control.

Home-made quality control;Tumor marker;Internal quality control

1007-4287(2016)12-2027-03

R73-3

A

2016-01-20)