洪振賢，林淑瑜，陳志民，王佳坤，甘惠貞

枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液的配伍穩(wěn)定性考察

洪振賢，林淑瑜，陳志民，王佳坤，甘惠貞*

目的 考察枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中的穩(wěn)定性。方法 采用高效液相色譜法測(cè)定枸櫞酸芬太尼注射液、咪達(dá)唑侖注射液與0.9%氯化鈉注射液配伍后的含量變化，同時(shí)觀察配伍溶液的外觀、pH值變化。結(jié)果 枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液配伍溶液在室溫條件下24 h內(nèi)外觀、pH值未見(jiàn)明顯變化，芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖含量均>98%。結(jié)論 枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中配伍后于室溫放置24 h內(nèi)性質(zhì)基本穩(wěn)定。

枸櫞酸芬太尼；咪達(dá)唑侖；配伍穩(wěn)定性；HPLC

0 引言

1 儀器和試藥

Ultimate3000高效液相色譜儀(戴安中國(guó)有限公司)；JA2003電子分析天平(上海方瑞儀器有限公司)；PHS-3C型實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)(上海誠(chéng)寧環(huán)保科技有限公司)；注射器；移液槍?zhuān)昏蹤此岱姨針?biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：171268-201001，HPLC純度≥98%)；咪達(dá)唑侖標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：171270-201402，HPLC純度≥98%)；枸櫞酸芬太尼注射液(湖北宜昌人福藥業(yè)有限公司，規(guī)格：10 mL∶0.5 mg，批號(hào)分別為1141006、2130109、1140704)；咪達(dá)唑侖注射液(江蘇恩華藥業(yè)有限公司，規(guī)格：2 mL∶10 mg，批號(hào)分別為20150112、20150401、20150719)；0.9%氯化鈉注射液(四川太平洋藥業(yè)有限公司，規(guī)格：100 mL，批號(hào)：B1511024 2)；乙腈(美國(guó)進(jìn)口Fisher，色譜醇)、磷酸二氫鉀(美國(guó)進(jìn)口MREDA，色譜醇)、磷酸(美國(guó)進(jìn)口MREDA，色譜醇)、三乙胺(美國(guó)進(jìn)口MREDA，色譜醇)；水為超純化水(本院消毒供應(yīng)室提供)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的配制 ①對(duì)照品溶液的制備：取4 mg枸櫞酸芬太尼標(biāo)準(zhǔn)品，60 mg咪達(dá)唑侖標(biāo)準(zhǔn)品，分別置于10 mL容量瓶，加流動(dòng)相稀釋至刻度，避光、室溫下保存。②配伍溶液的制備：模擬臨床ICU機(jī)械通氣患者鎮(zhèn)靜給藥方案，取1支枸櫞酸芬太尼注射液，5支咪達(dá)唑侖注射液，共同置于50 mL容量瓶，加0.9%氯化鈉注射液稀釋至刻度，避光、室溫下保存。③稀釋溶液的制備：取10 mL配伍溶液，置于50 mL容量瓶，加流動(dòng)相稀釋至刻度，避光、室溫下保存。

2.2 色譜條件和系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 色譜柱：Acclaim C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動(dòng)相：0.033 mol/L磷酸二氫鉀溶液(三乙胺調(diào)pH值至3.50)-乙腈(60∶40)；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：205 nm；進(jìn)樣量：10 μL。在此色譜條件下，芬太尼與咪達(dá)唑侖完全分離，色譜峰峰形良好，保留時(shí)間分別約為5.780、6.910 min，陰性對(duì)照品溶液對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，見(jiàn)圖1。

圖1 芬太尼與咪達(dá)唑侖的高效液相色譜圖

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取上述枸櫞酸芬太尼對(duì)照品溶液1 mL，置10 mL容量瓶，加流動(dòng)相稀釋至刻度。再分別精密吸取一定量，稀釋制成濃度分別為40、30、20、10、5、2.5 μg/mL的溶液。在“2.2”項(xiàng)色譜條件下，分別進(jìn)樣10 μL。以濃度(C)為橫坐標(biāo)、峰面積(A)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程A=0.665 6 C-0.219 2，r=0.999 9。結(jié)果表明，芬太尼在2.5～40 μg/mL濃度范圍內(nèi)與其峰面積有良好的線性關(guān)系；精密量取咪達(dá)唑侖對(duì)照品溶液1 mL，置10 mL容量瓶，加流動(dòng)相稀釋至刻度。再分別精密吸取一定量，稀釋制成濃度分別為600、400、200、100、50、20、10 μg/mL的溶液。在“2.2”項(xiàng)色譜條件下，分別進(jìn)樣10 μL。以濃度(C)為橫坐標(biāo)、峰面積(A)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程A= 0.839 3 C-6.394 6，r=0.999 6。結(jié)果表明，咪達(dá)唑侖在10～600 μg/mL濃度范圍內(nèi)與其峰面積有良好的線性關(guān)系。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品，按“2.1”項(xiàng)配伍溶液配制方法平行制備6份，分別稀釋成高、中、低3種不同濃度，進(jìn)樣，計(jì)算峰面積，得芬太尼的重復(fù)性RSD分別為0.30%、0.15%、0.34%；咪達(dá)唑侖的重復(fù)性RSD分別為0.20%、0.15%、0.26%，結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.5 精密度試驗(yàn) 分別制備高、中、低3種不同濃度的枸櫞酸芬太尼對(duì)照品溶液(30、20、5 μg/mL)和咪達(dá)唑侖對(duì)照品溶液(300、200、20 μg/mL)各6份，同日測(cè)定并連續(xù)測(cè)定6 d，計(jì)算峰面積，得芬太尼的日內(nèi)精密度RSD分別為0.05%、0.05%、0.15%，日間精密度RSD分別為0.16%、0.12%、0.16%；咪達(dá)唑侖的日內(nèi)精密度RSD分別為0.09%、0.15%、0.28%，日間精密度RSD分別為0.19%、0.20%、0.45%。結(jié)果表明精密度良好。

2.6 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量的配伍溶液9份各1 mL，置于5 mL的容量瓶中，分別加入已知濃度的枸櫞酸芬太尼對(duì)照品溶液和咪達(dá)唑侖對(duì)照品溶液0.8、1、1.2 mL，每個(gè)濃度平行3份，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，取10 μL進(jìn)樣，計(jì)算回收率和RSD，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

注：F.芬太尼;M.咪達(dá)唑侖

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量取一定量的高、中、低3種不同濃度的枸櫞酸芬太尼對(duì)照品溶液(30、20、5 μg/mL)和咪達(dá)唑侖對(duì)照品溶液(300、200、20 μg/mL)，分別在0、4、8、12、16、24 h進(jìn)樣分析，以0 h的含量為100.00%，換算百分含量，得枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液的百分含量均在99.82%～100.18%范圍內(nèi)。結(jié)果表明，對(duì)照品溶液室溫條件下放置24 h穩(wěn)定性良好。

2.8 配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)

2.8.1 外觀與pH值變化 精密量取一定量的“2.1”項(xiàng)配伍溶液，分別在0、4、8、12、16、24 h采用0.9%氯化鈉注射液作對(duì)照，觀察是否有顏色變化、氣體、沉淀、渾濁產(chǎn)生，并采用pH計(jì)測(cè)定配伍溶液pH值變化，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液配伍液穩(wěn)定性結(jié)果(n=6)

注：“—”表示無(wú)色澄清、無(wú)氣體沉淀產(chǎn)生、無(wú)明顯變化

2.8.2 相對(duì)百分含量變化 精密量取一定量的“2.1”項(xiàng)配伍溶液，分別在0、4、8、12、16、24 h進(jìn)樣分析，以0 h的含量為100.00%，換算百分含量，得各個(gè)時(shí)間點(diǎn)相對(duì)百分含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

3 討論

3.1 咪達(dá)唑侖與芬太尼同時(shí)測(cè)定的方法學(xué)探索

3.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 參考有關(guān)文獻(xiàn)[8-9]，分別選擇195、200、205、210、220 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，對(duì)芬太尼和咪達(dá)唑侖進(jìn)行HPLC圖譜的直觀比較。結(jié)果表明，195、210 nm檢測(cè)波長(zhǎng)下，所得圖譜特征峰分離度差，含量低，磷酸鹽緩沖溶液在210 nm附近也有較強(qiáng)吸收，形成一定的干擾峰，使得本底值提高，靈敏度降低，影響測(cè)定；芬太尼的最大吸收波長(zhǎng)為200、205 nm，咪達(dá)唑侖的最大吸收波長(zhǎng)為220 nm，由于臨床配伍用藥中芬太尼的用量(10 μg/mL)明顯低于咪達(dá)唑侖的用量(1 mg/mL)，同時(shí)在200、205 nm檢測(cè)波長(zhǎng)下，咪達(dá)唑侖也可獲得較大吸收，但在200 nm檢測(cè)波長(zhǎng)下基線不易平穩(wěn)，故選擇205 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，能兼顧兩種物質(zhì)的檢測(cè)靈敏度，達(dá)到良好分離檢測(cè)的目的。

3.1.2 流動(dòng)相的選擇 2015年版《中國(guó)藥典》(二部)枸櫞酸芬太尼注射液的含量測(cè)定采用高效液相色譜法[10]，該法所選用的流動(dòng)相為含0.1%無(wú)水硫酸鈉與0.2%醋酸銨的溶液-甲醇-乙腈(4∶3∶1)(用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至6.3±0.1)；咪達(dá)唑侖注射液的含量測(cè)定項(xiàng)下流動(dòng)相為磷酸鹽緩沖溶液(取同體積0.1 mol/L磷酸溶液與0.03 mol/L三乙胺溶液混合，用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)混合液的pH值至3.5)-甲醇(35∶65)，配制均較為復(fù)雜。結(jié)合參考有關(guān)文獻(xiàn)[10-13]，本實(shí)驗(yàn)采用0.033 mol/L磷酸二氫鉀溶液-乙腈為流動(dòng)相，通過(guò)調(diào)整比例為(60∶40)，得到分離度良好、出峰時(shí)間適宜的色譜圖。

3.2 配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果分析 參考臨床ICU機(jī)械通氣患者鎮(zhèn)靜給藥方案[16-17]，“2.1”項(xiàng)配伍溶液體積為50 mL；兩藥品說(shuō)明書(shū)標(biāo)注的通用溶媒為0.9%氯化鈉注射液。2015年版《中國(guó)藥典》(二部)附錄規(guī)定[10]，對(duì)標(biāo)示裝量100 mL或100 mL以上的靜脈用注射液進(jìn)行微粒控制，而對(duì)標(biāo)示裝量100 mL以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無(wú)菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無(wú)菌原料藥未做要求。結(jié)合參考文獻(xiàn)[18]，本實(shí)驗(yàn)不探討不溶性微粒變化。

配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果顯示，枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中配伍后，于室溫放置24 h內(nèi)，配伍溶液外觀澄清，溶液顏色無(wú)明顯變化，無(wú)氣體、沉淀、渾濁產(chǎn)生，pH值無(wú)明顯變化，說(shuō)明兩藥配伍后，未發(fā)生明顯物理化學(xué)變化。同時(shí)經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定，色譜圖未見(jiàn)其他吸收峰，最大吸收峰位均未移動(dòng)，枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液的含量均>98%，均符合2015年版《中國(guó)藥典》(二部)相關(guān)規(guī)定。

綜上所述，枸櫞酸芬太尼注射液和咪達(dá)唑侖注射液在0.9%氯化鈉注射液中配伍后于室溫放置24 h內(nèi)性質(zhì)基本穩(wěn)定，表明臨床上可將兩藥配伍使用。

[1] 李九菊.芬太尼與氟比洛芬酯自控鎮(zhèn)痛聯(lián)合心理干預(yù)用于老年晚期癌痛32例[J].中國(guó)藥業(yè),2015,24(9):105-106.

[2] 楊吉安,夏中元,周顯琎,等.地佐辛與芬太尼用于術(shù)后靜脈自控鎮(zhèn)痛臨床效果及安全性Meta分析[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2014,33(7):899-905.

[3] 秦明欽,陳蒙華,何亞軍.芬太尼或瑞芬太尼與咪達(dá)唑侖復(fù)合鎮(zhèn)靜在ICU機(jī)械通氣患者中的鎮(zhèn)靜效果觀察[J].海南醫(yī)學(xué),2013,24(3):363-365.

[4] 墨景芳.咪達(dá)唑侖聯(lián)合芬太尼用于機(jī)械通氣患者鎮(zhèn)靜46例效果觀察[J].中國(guó)藥業(yè),2014,23(3):84-85.

[5] 梁旭東.探討丙泊酚、芬太尼、咪達(dá)唑侖復(fù)合麻醉在門(mén)診婦產(chǎn)科手術(shù)的應(yīng)用價(jià)值[J].醫(yī)學(xué)信息,2013,26(21):543.

[6] 曹英浩,池萍,張本厚,等.氟比洛芬或芬太尼復(fù)合咪達(dá)唑侖配伍丙泊酚用于無(wú)痛人工流產(chǎn)的觀察[J].中國(guó)醫(yī)刊,2015,50(6):50-53.

[7] Ambesh SP,Singh N,GuPta D,et al.A huffing manoeuvre,immediately before induction of anaesthesia,Prevents fentanyl-induced coughing:a prospective,randomized,and controlled study[J].Brit J Anaesth,2010,104(1):40-43.

[8] 陳富超,張?zhí)?李鵬,等.注射用氯諾昔康與芬太尼注射液配伍的穩(wěn)定性[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2011,30(9):1233-1234.

[9] 余學(xué)軍,陳琴華,李鵬,等.高效液相色譜法測(cè)定人血漿中地西泮和咪達(dá)唑侖含量[J].中國(guó)藥業(yè),2011,20(13):11-12.

[10]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[M]北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:723-724.

[11]施菁,上官盈盈,陳小林,等.RP-HPLC測(cè)定緩釋膜劑中芬太尼的含量[J].華西藥學(xué)雜志,2005,20(2):153-156.

[12]方寶霞,陳富超,李春雷,等.鹽酸曲馬多與枸櫞酸芬太尼在氯化鈉注射液中的穩(wěn)定性研究[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志,2014,32(5):348-351.

[13]劉宏達(dá),張志清,任靜華,等.高效液相色譜法測(cè)定大鼠血漿中咪達(dá)唑侖含量[J].中國(guó)藥業(yè),2013,22(24):26-27.

[14]安登魁.藥物分析[M]濟(jì)南:濟(jì)南出版社,1992:1046-1061.

[15]Phsicians′ Desk Reference[M]55 edition.Montvale:Medical hconomics company,2001:2794-2804.

[16]崔巍,謝正燕,呂勝,等.咪達(dá)唑侖與芬太尼聯(lián)用對(duì)ICU機(jī)械通氣患者的臨床鎮(zhèn)靜作用分析[J].麻醉與鎮(zhèn)痛,2011,18(21):104-105.

[17]張立春,史大治.咪達(dá)唑侖聯(lián)合芬太尼在ICU機(jī)械通氣患者中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2015,10(35):146-147.

[18]黃佳,白彩珍,山廣志,等.中國(guó)藥典對(duì)注射劑中不溶性微粒的監(jiān)控變革及防控微粒污染的措施[J].藥品評(píng)價(jià),2010,7(16):18-21.

Compatible stability of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection

HONG Zhen-xian,LIN Shu-yu,CHEN Zhi-min,WANG Jia-kun,GAN Hui-zhen*

(Department of Pharmacy,180th Hospital of PLA,Quanzhou 362000,China)

Objective To study the compatible stability of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection.Methods The changes in the contents of fentanyl citrate injection and midazolam injection were determined simultaneously by HPLC,and the changes in appearance and pH value were observed at the same time.Results No significant difference was found in terms of the appearance and pH value of the mixture solution within 24 h,the content of fentanyl and midazolam were both more than 98%.Conclusion The mixture of fentanyl citrate injection with midazolam injection in 0.9% sodium chloride injection is stable within 24 h after mixing.

Fentanyl citrate;Midazolam;Compatible stability;HPLC

2016-05-31

解放軍第180醫(yī)院藥學(xué)科，福建 泉州 362000

解放軍第180醫(yī)院科研項(xiàng)目(2014D3011)

10.14053/j.cnki.ppcr.201612022

*通信作者