金淑芳，胡勇，孫各琴，王夏虹，黃玉敏，程鎮(zhèn)烽，趙平,潘育方

(1.廣東藥科大學(xué) 醫(yī)藥化工學(xué)院，廣東 中山 528458; 2.廣東省化妝品工程技術(shù)研究中心，廣東 中山 528458; 3.廣東藥科大學(xué) 食品科學(xué)學(xué)院，廣東 中山 528458; 4.中山大學(xué)中山附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)中心，廣東 中山 528400)

?

3種直接性染發(fā)劑染料的生物安全性研究

金淑芳1,2，胡勇3，孫各琴4，王夏虹1，黃玉敏1，程鎮(zhèn)烽1，趙平1,2,潘育方1,2

(1.廣東藥科大學(xué) 醫(yī)藥化工學(xué)院，廣東 中山 528458; 2.廣東省化妝品工程技術(shù)研究中心，廣東 中山 528458; 3.廣東藥科大學(xué) 食品科學(xué)學(xué)院，廣東 中山 528458; 4.中山大學(xué)中山附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)中心，廣東 中山 528400)

目的 探討藏紅T、堿性品紅和堿性藍(lán)26這3種直接性染發(fā)劑染料對人體健康和人類居住環(huán)境是否存在潛在毒性。方法 采用透皮吸收、紅細(xì)胞溶血、大腸埃希菌毒性測試、NIH/3T3細(xì)胞抑制率研究毒性情況，光譜學(xué)方法配合分子模擬方法研究其與生物大分子牛血清白蛋白的相互作用情況。 結(jié)果 在我國2015年《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》允許的濃度下，藏紅T與堿性品紅在48 h后的透皮吸收分別達(dá)到0.023 mmol/L和0.010 mmol/L。3種染發(fā)劑將導(dǎo)致紅細(xì)胞溶血(LD50達(dá)到0.16～0.23 mmol/L)、抑制大腸埃希菌(LD50達(dá)到0.64～3.77 μmol/L)和NIH/3T3細(xì)胞的存活率(LD50達(dá)到2.32～22.77 μmol/L)，并與牛血清白蛋白細(xì)胞內(nèi)生物大分子有較強(qiáng)的相互作用。 結(jié)論 這3種直接性染發(fā)劑對人類的健康和居住環(huán)境有潛在性威脅。

直接性染發(fā)劑； 溶血效應(yīng)； 毒性效應(yīng)； 牛血清白蛋白

(1.SchoolofChemistryandChemicalEngineering,GuangdongPharmaceuticalUniversity,Zhongshan528458,China；2.GuangdongCosmeticsEngineering&TechnologyResearchCenter,Zhongshan528458,China； 3.SchoolofFoodandScience,GuangdongPharmaceuticalUniversity,Zhongshan528458,China； 4.DepartmentofExaminationMedicalCenter,ZhongshanAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity,Zhongshan528400,China)

直接性染發(fā)劑是可以直接使用、劑型使用范圍廣并適合家庭使用的一類染發(fā)劑。一直以來，直接性染發(fā)劑與癌癥是否存在密切的聯(lián)系一直備受爭議[1-5]。流行病學(xué)認(rèn)為，由于許多直接性染料裂分后可能形成毒性芳香族化合物，使用直接性染發(fā)劑可能會引起癌癥或者不良反應(yīng)[6-7]，但目前這方面的理論研究還很不充分[8]。與此同時，歐盟第七次化妝品規(guī)程修訂案也頒發(fā)了禁止動物體內(nèi)的遺傳毒性測試[9]，尋找針對化妝品原料的新的體外毒性安全性測試方法也成為亟待解決的問題。

堿性品紅(FB)、堿性藍(lán)26(VBB)和藏紅T(BR2)是在直接性染發(fā)劑中廣泛使用的3種染料(結(jié)構(gòu)見圖1)[10-11]。本文在2015年《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》允許使用的劑量下，分別對這3種染料進(jìn)行了透皮吸收、溶血效應(yīng)、大腸埃希菌(E.coli)和小鼠纖維母細(xì)胞(NIH/3T3)的毒性效應(yīng)的研究。其中，NIH/3T3細(xì)胞屬于小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系，已被運(yùn)用于藥物對人類皮膚的毒性研究[12-13]，盡管如此，但尚無分子水平上的相關(guān)研究報(bào)道。為了更好地研究這些染料的細(xì)胞毒性，本文在分子水平上對這些染料與生物大分子牛血清白蛋白(BSA)進(jìn)行了光譜試驗(yàn)和理論模擬研究。

圖1 3種染料染發(fā)顏色及分子結(jié)構(gòu)式

Figure 1 The hair colors and molecular structures of three direct hair dyes

1 材料與方法

1.1 材料

牛血清白蛋白(BSA)購于上海生物工程有限公司；所有的染料購買于北京耦合科技有限公司；大腸埃希菌菌株E.coli( MTCC 1678)用作野生菌株；新鮮人體血液樣品由中山市人民醫(yī)院提供；PBS(pH 7.4)緩沖液是由10 mmol/L K2HPO4/KH2PO4,40 mmol/L KCl,100 mmol/L NaCl組成；豬的透皮吸收通過體外擴(kuò)散池進(jìn)行測試，豬腹部皮毛用電剪刀輕輕刮去以免造成損傷；紫外光譜通過日立U-3900H紫外分光光度計(jì)測試；熒光光譜在室溫下通過PerkinElmer L55熒光分光光度計(jì)測試；細(xì)胞活力通過酶標(biāo)儀(model 680,Bio-Rad,USA)測試。

1.2 方法

1.2.1 透皮吸收試驗(yàn) 采用離體的豬腹部皮膚，通過自行設(shè)計(jì)的流通池(圖2)對透皮吸收情況進(jìn)行實(shí)時性檢測，透皮面積為0.64 cm2。在2015年版《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中染發(fā)劑染料堿性品紅的最大使用濃度為0.3%，與氧化物共同使用時最大允許使用量為0.15%；堿性藍(lán)26的最大允許使用量為5%，與氧化物共同使用時最大允許使用量為0.25%；藏紅T是最近幾年新出現(xiàn)的一種新型染發(fā)染料，依據(jù)以上2種染料考慮，考察的最大允許使用濃度為0.4%，與氧化物共同使用時最大允許使用量為0.2%。所有測試每8 h取樣1次。紫外分光光度計(jì)測試吸收的染料吸光度。

1.2.2 染發(fā)劑染料的溶血效應(yīng) 健康成人血樣由病理中心收集在抗凝血管中，5 000 r/min離心5 min，移除血清和血漿，然后在37 ℃下將不同濃度的染料與人類紅細(xì)胞(RBC)樣品(用PBS制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%)混合培養(yǎng)30 min。0.1%Triton X-100作為陽性對照。培養(yǎng)一段時間后，紅細(xì)胞樣品在5 000 r/min下離心10 min，取上層清液在540 nm進(jìn)行紫外測試。溶血率按“溶血率= [At-Ac/A100%-Ac]×100%)”計(jì)算，式中：At是紅細(xì)胞與染料相互作用后的上層清液吸光度；Ac是PBS上層清液的吸光度；A100%是0.1%Triton X-100與紅細(xì)胞相互作用后引起紅細(xì)胞全部破裂的上層清液吸光度。

Origin 8.0軟件處理不同染料濃度下的溶血率數(shù)據(jù)得到染料的LD50值。

1.2.3 染料在大腸埃希菌上的毒性效應(yīng) 用接種環(huán)將儲存在瓊脂糖培養(yǎng)基上的大腸埃希菌菌種(儲存溫度為4 ℃)接種在新鮮的液體培養(yǎng)基上，37 ℃過夜培養(yǎng)進(jìn)行菌株活化，過夜增長的菌株在37 ℃新鮮的培養(yǎng)基上再次進(jìn)行培養(yǎng)。將相同的大腸埃希菌濃度(1×105個)在不同的試管里培養(yǎng)并讓其增長2 h直到進(jìn)入對數(shù)期生長?，F(xiàn)配的不同濃度染料溶液分別加入到處于對數(shù)期的大腸埃希菌中，并在相同的條件下進(jìn)一步培養(yǎng)30 min。然后按不同的濃度倒平板，在37 ℃下培養(yǎng)24 h。完成培養(yǎng)后，計(jì)算菌落數(shù)。染料抑制率通過沒有加入染料的大腸埃希菌進(jìn)行估算。

1.2.4 細(xì)胞活力的測試 采用噻唑藍(lán)(MTT)法測試細(xì)胞活力。將NIH/3T3細(xì)胞依每孔6×103個細(xì)胞接種于96孔板。過夜培養(yǎng)移除培養(yǎng)液，將包含不同濃度(6～100 μmol/L)的染料和培養(yǎng)基的混合液共200 μL添加入96孔板培養(yǎng)48 h。在培養(yǎng)到44 h時，將96孔板里每一個孔用PBS溶液(pH 7.4)沖洗3遍，并加入質(zhì)量濃度為0.5 g/L的MTT溶液100 μL進(jìn)行培養(yǎng)。4 h后移除，加入二甲基亞砜(DMSO)150 μL溶解活細(xì)胞里的甲瓚結(jié)晶。搖床溶解10 min后，在酶標(biāo)儀490 nm處測試吸收。引起50%細(xì)胞死亡的對應(yīng)的濃度為半數(shù)抑制濃度(LD50)。所有的試驗(yàn)平行做3次。

1.2.5 光譜試驗(yàn) 紫外吸收光譜和熒光光譜的滴定都是采取逐步滴加的方式。每一次在測試前整個反應(yīng)系統(tǒng)在室溫下放置5 min，以便于充分反應(yīng)。

1.2.6 分子模擬 分子模擬的對接模式在AutoDock(在http://autodock.scripps.edu/下載的)上進(jìn)行。BSA(BSA的ID: 3V03)的三維結(jié)構(gòu)在http://www.rcsb.org/pdb/下載。染料三維結(jié)構(gòu)在Discovery Studio 4.5 Client軟件上完成。BSA在中心盒子上的x-,y-,z-的設(shè)置分別為12.6、12.6、12.6 nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 透皮吸收試驗(yàn)

皮膚是消費(fèi)者和美發(fā)從業(yè)人員第一層也是最重要的保護(hù)層。皮膚對大多數(shù)染發(fā)劑都有潛在的吸收[14]。從3種染料的透皮吸收試驗(yàn)結(jié)果(見圖2)可見，48 h后，藏紅T的透皮濃度達(dá)到0.023 mmol/L，并且隨著作用時間延長，透皮吸收濃度逐漸升高。另外，相比之下，藏紅T比堿性品紅和堿性藍(lán)26具有更高的透皮吸收濃度，更易透過皮膚，說明藏紅T不是理想的染發(fā)劑染料。而在同等的條件下，堿性藍(lán)26的經(jīng)皮吸收率均比藏紅T和堿性品紅低。

這3種染料的不同的經(jīng)皮吸收效率可以通過它們的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行解釋。眾所周知，皮膚膜是非極性的，但是它的液體間隙是極性的，因此染料的不同結(jié)構(gòu)在經(jīng)皮吸收的過程中起了重要的作用[15]。堿性藍(lán)26比藏紅T和堿性品紅有更多的苯環(huán)結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)剛性更強(qiáng)，可能導(dǎo)致堿性藍(lán)26更多地積累在皮膚表層而非穿過皮膚。而藏紅T擁有對稱結(jié)構(gòu)使它可能擁有更均衡的油水分配系數(shù)，因此穿過皮膚可能就更加容易。

圖2 3種染料的經(jīng)皮吸收試驗(yàn)結(jié)果

Figure 2 Results of the percutaneous absorption of three hair dyes

2.2 染料的溶血毒性和細(xì)菌毒性效應(yīng)

染料的經(jīng)皮吸收有可能會導(dǎo)致紅細(xì)胞破裂和細(xì)胞質(zhì)溶出[12]。因此，本文進(jìn)一步測試藏紅T、堿性品紅和堿性藍(lán)26對人體紅細(xì)胞的溶血情況，結(jié)果見表1?？梢?，堿性藍(lán)26比堿性品紅和藏紅T具有更高的溶血率。從染料劑量-溶血率關(guān)系(圖3)可見，紅細(xì)胞溶血率與染料的濃度呈劑量依賴性。

染料在染發(fā)過程中只有很少量進(jìn)入了發(fā)干，大部分是以各種方式排放在環(huán)境中，因此可能會導(dǎo)致水資源、土壤肥力、水生生物等污染，這將最終以食物鏈的方式影響到人類的健康。為了評估這些染料對環(huán)境的損傷程度，本文用E.coli細(xì)菌對染料進(jìn)行毒性評估研究，結(jié)果見表1和圖3?？梢姡?種不同的染料都在相對較低濃度時對E.coli的活力造成較大的影響，并且隨著染料濃度增高，E.coli活力降低越明顯，堿性品紅和堿性藍(lán)26比藏紅T有更低的LD50，表示它們對環(huán)境的危害比藏紅T更強(qiáng)[8]。

2.3 染料的細(xì)胞毒性

上述試驗(yàn)證實(shí)，藏紅T、堿性藍(lán)26和堿性品紅這3種直接性染料能夠透皮吸收，且對紅細(xì)胞具有不同程度的溶血率，對人體造成損害。為進(jìn)一步研究它們對人體的損傷機(jī)制，本文選用公認(rèn)對人體安全無害的姜黃素(CMM)染料作為陽性對照，研究3種染料對胚胎成纖維細(xì)胞NIH/3T3系統(tǒng)的毒性效應(yīng)，結(jié)果見圖4?？梢姡尤氩丶tT、堿性藍(lán)26和堿性品紅后，NIH/3T3的細(xì)胞形態(tài)均有明顯的改變，大部分黏附細(xì)胞隨著染料作用時間的延長，開始趨于變圓變亮并且開始漂浮于細(xì)胞培養(yǎng)液，隨著培養(yǎng)時間的延長，這種現(xiàn)象更加明顯，表明細(xì)胞已經(jīng)逐漸死亡；而加入姜黃素后，NIH/3T3的細(xì)胞形態(tài)幾乎沒有變化，說明3種直接性染料導(dǎo)致了細(xì)胞的死亡。

同時，研究發(fā)現(xiàn)，隨著藏紅T、堿性藍(lán)26和堿性品紅3種直接性染料與NIH/3T3細(xì)胞系統(tǒng)作用的濃度增加，細(xì)胞活力呈遞減狀態(tài)，劑量與活力的關(guān)系見圖5，細(xì)胞毒性效應(yīng)的半數(shù)致死量(LD50)見表1?？梢姡@3種直接性染料對于NIH/3T3細(xì)胞系統(tǒng)具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，與皮膚直接接觸可能會對皮膚產(chǎn)生損傷。同時，堿性品紅表現(xiàn)出比藏紅T和堿性藍(lán)26更高的細(xì)胞毒性效應(yīng)，表明含有堿性品紅的染發(fā)劑可能具有比另外2種染發(fā)劑更大的健康威脅。

圖3 不同濃度染料的紅細(xì)胞溶血(A)和大腸埃希菌活力(B)測定結(jié)果

Figure 3 The hemolytic rate of human RBC (A) and cell viability ofE.Coli(B) under different concentrations of hair dyes

表1 3種染料的紅細(xì)胞溶血、大腸埃希菌、NIH/3T3試驗(yàn)的LD50值和BSA結(jié)合參數(shù)

注：姜黃素(CMM)作為陰性對照。

圖4 3種染料(濃度為5 μmol/L)在不同時間段對NIH/3T3細(xì)胞形態(tài)的影響

Figure 4 NIH/3T3 cell morphology after incubated with dyes for different time(5 μmol/L)

圖5 不同濃度染料作用下NIH/3T3細(xì)胞活力的改變

Figure 5 NIH/3T3 cell viability under different concentrations of dyes

2.4 染料與BSA的相互作用

“2.1”項(xiàng)透皮試驗(yàn)結(jié)果表明，3種直接性染發(fā)劑染料可以不同程度的透過皮膚，進(jìn)入血液。在血液血清中含有大量的血清白蛋白，而血清白蛋白又是身體里很多內(nèi)源性和外源性化合物的運(yùn)輸者。因此，本文嘗試在分子水平上對染料與血清白蛋白作用機(jī)制進(jìn)行研究。

2.4.1 BSA與染料作用的電子吸收光譜變化 蛋白質(zhì)與小分子物質(zhì)發(fā)生相互作用形成一個新的復(fù)合物會造成蛋白質(zhì)紫外光譜吸收的增加或者減少。從BSA隨著堿性品紅濃度變化的紫外光譜吸收情況(圖6)來看，BSA在280 nm處有吸收峰，這是苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)和色氨酸(Trp)3種氨基酸的特征吸收峰，滴加染料后BSA的吸收峰發(fā)生了明顯的變化[16]。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是染料與BSA結(jié)合后，芳香氨基酸的微環(huán)境發(fā)生了變化，疏水性增加導(dǎo)致BSA構(gòu)象變得疏松和伸展，引起280 nm處特征峰的變化[17]。堿性藍(lán)26和藏紅T也發(fā)生了類似的現(xiàn)象，說明這些染料與蛋白質(zhì)之間產(chǎn)生了相互作用。

0.80.60.40.20.0吸光度270280290300310λ/nm

注：c(BSA)=10 μmol/L；堿性品紅(FB)的濃度從上至下依次為0、3.2×10-4、6.4×10-4、9.6×10-4、1.28×10-3、1.6×10-3、1.92×10-3、2.24×10-3、2.56×10-3、2.88×10-3、3.2×10-3mol/L；箭頭的指向是堿性品紅滴加入BSA后光譜發(fā)生變化的方向。

圖6 不同濃度堿性品紅作用下BSA的紫外吸收光譜

Figure 6 The absorption spectra of BSA under different concen-trations of fuchsin basic

2.4.2 BSA與染料作用的熒光光譜變化 堿性品紅逐步滴加在BSA溶液后，染料與蛋白質(zhì)結(jié)合的熒光變化情況見圖7。可見，BSA的熒光發(fā)射光譜隨著滴加堿性品紅的濃度增大發(fā)生明顯的淬滅，堿性藍(lán)26和藏紅T也發(fā)生相似的情況，說明小分子與蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)合會引起熒光的淬滅[18]。由于熒光淬滅可能發(fā)生動態(tài)淬滅和靜態(tài)淬滅，常用Stern-Volmer方程(式1)來分析淬滅的機(jī)制。

(1)

式中：F和F0分別代表存在和缺乏小分子時的熒光強(qiáng)度，Ksv、Kq、ζ0和[Q]分別表示Stern-Volmer常數(shù)、淬滅速率常數(shù)、蛋白質(zhì)壽命常數(shù)和淬滅劑的濃度。

從表1可以看出，3種染料的Kq遠(yuǎn)大于生物大分子最大的動態(tài)淬滅常數(shù)2.0×1010[19]，說明它們與BSA發(fā)生的是靜態(tài)淬滅而非動態(tài)淬滅。

式(1)常表示成式(2)來計(jì)算染料與BSA的結(jié)合常數(shù)Kb和獨(dú)立結(jié)合位點(diǎn)n。

(2)

從3種染料與BSA的結(jié)合參數(shù)(表 1)可見，它們與BSA的結(jié)合位點(diǎn)都大約為1，說明只有1個結(jié)合位點(diǎn)。同時，堿性品紅的結(jié)合常數(shù)要比堿性藍(lán)26和藏紅T高。

300350400450λ/nm熒光強(qiáng)度

注：c(BSA)=10 μmol/L；堿性品紅(FB)的濃度從上至下依次為0、2×10-5、4×10-5、6×10-5、8×10-5、1×10-4、1.2×10-4、1.4×10-4、1.6×10-4、1.8×10-4、2×10-4mol/L；激發(fā)波長為280 nm，發(fā)射波長為340 nm；箭頭的指向是堿性品紅滴加入BSA后光譜發(fā)生變化的方向。

圖7 BSA的熒光發(fā)射光譜隨著堿性品紅濃度增大發(fā)生的變化

Figure 7 The emission spectra of BSA under different concen-trations of fuchsin basic

2.4.3 BSA與染料作用的分子模擬 將以上熒光光譜和紫外光譜試驗(yàn)的結(jié)果用分子模擬計(jì)算進(jìn)一步驗(yàn)證，BSA與3種染料結(jié)合的模擬計(jì)算結(jié)果見圖8。

a.堿性品紅； b.藏紅T； c.堿性藍(lán)26。

圖8 3種染料與BSA結(jié)合最穩(wěn)固的構(gòu)象圖

Figure 8 The most stable conformations of BSA binding with three dyes

可見，這些染料均進(jìn)入了BSA結(jié)構(gòu)內(nèi)部(口袋區(qū)域)，與BSA緊密結(jié)合，形成了復(fù)合物。這是因?yàn)樵贐SA中，存在著多種疏水和親水性氨基酸，它們可以通過氫鍵與染料緊密結(jié)合，如堿性品紅的N1與BSA里His 145的NE2形成一個距離0.288 nm的氫鍵；堿性藍(lán)26的N2、N3和N4與BSA里L(fēng)ys499的NZ、Glu125的OE2、Leu115的O形成氫鍵。另外，BSA又與這些染料之間存在疏水鍵。堿性品紅被Arg144、Tyr 137等氨基酸殘基包圍，最低結(jié)合能為-32.06 kJ/mol。堿性藍(lán)26被Val481、Leu346、Trp213等氨基酸殘基包圍，最低結(jié)合能為-41.44 kJ/mol。藏紅T被Pro415、Tyr496、Lys533等氨基酸殘基包圍，最低結(jié)合能為-32.86 kJ/mol。根據(jù)以上數(shù)據(jù)可以得出：3種染料與BSA都具有較穩(wěn)定的結(jié)合構(gòu)象和較低的結(jié)合能，表明BSA與這些染料發(fā)生了強(qiáng)烈的相互作用，這與上面光譜試驗(yàn)的結(jié)果一致。

3 結(jié)論

直接性染發(fā)劑是否對人類存在危害一直是備受爭議的問題。本文采用透皮吸收、紅細(xì)胞溶血、大腸埃希菌、NIH/3T3細(xì)胞活力試驗(yàn)替代動物試驗(yàn)，對3種直接性染料藏紅T、堿性藍(lán)26和堿性品紅進(jìn)行了生物安全性評估。結(jié)果表明，堿性品紅與藏紅T對皮膚有潛在的透皮吸收，這3種染料在2015年版《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》允許的濃度下對紅細(xì)胞溶血、大腸埃希菌和NIH/3T3細(xì)胞都表現(xiàn)出了較強(qiáng)的毒性效應(yīng)。光譜試驗(yàn)與理論模擬計(jì)算結(jié)果均表明，這3種染料在進(jìn)入體內(nèi)后，與血清蛋白有較強(qiáng)的相互作用。據(jù)此認(rèn)為，這3種直接性染料可能會對人體和環(huán)境健康都有潛在的危險(xiǎn)，使用時應(yīng)對其安全性予以重視。

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(責(zé)任編輯：陳翔)

The bio-safety concerns and evaluation of three direct hair dyes

JIN Shufang1,2,HU Yong3,SUN Geqin4,WANG Xiahong1,HUANG Yumin1,CHENG Zhenfeng1,

ZHAO Ping1,2,PAN Yufang1,2

Objective To investigate the potential toxicity of three permitted temporary hair dyes,fuchsin basic,basic red 2 and victoria blue B to both the human health and the environment. Methods Skin percutaneous absorption,hemolytic on human red blood cells,cytotoxic effects to NIH/3T3 andE.Colicell lines were detected to evaluate the cytotoxicity. Meanwhile,the interactions of these dyes with albumin from bovine serum were investigated through spectral methods and molecular docking studies. Results Even under permitted concentrations in current Hygienic Standard for Cosmetics,basic red 2 and fuchsin basic had the potential absorption through the skin,with a penetration efficiency to 0.023 mmol/L and 0.010 mmol/L,respectively. Meanwhile,these temporary hair dyes had severe cytotoxicity on human red blood (with LD50from 0.16 mmol/L to 0.23 mmol/L),NIH/3T3 (with LD50from 0.64 μmol/L to 3.77 μmol/L) andE.Colicell lines (with LD50from 2.32 μmol/L to 22.77 μmol/L). Meanwhile,these dyes showed intense interactions with albumin from bovine serum molecules. Conclusion It is suggested that temporary hair dyes could pose risk to both the human health and the environment.

direct hair dyes; hemolytic effect; cytotoxic effects; Albumin from bovine serum

2016-09-07

廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2016A03031380);廣東省高等學(xué)校優(yōu)秀青年教師培養(yǎng)項(xiàng)目

金淑芳(1990—),女，2014級碩士研究生；通信作者:趙平(1982— ),女,博士,副教授,從事化妝品安全性評價研究,Email:zhaoping666@163.com。

時間：2016-11-28 15:35

http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1413.R.20161128.1535.002.html

TQ658.34

A

1006-8783(2016)06-0717-07

10.16809/j.cnki.1006-8783.2016090701