摘要：目的 分析新生兒血培養(yǎng)陽性分離菌與超敏C反應(yīng)蛋白測定值的相關(guān)性，為臨床鑒別病原菌和污染菌提供依據(jù)。方法 采用BACTEC9120血培養(yǎng)儀進行血培養(yǎng)，細菌鑒定使用ATB細菌鑒定儀。血清超敏C反應(yīng)蛋白（Hs-CRP）采用免疫散射比濁法，對所有分離菌進行實驗室評估和臨床回訪確定污染菌，病原菌的確定以臨床診斷為最終標準。結(jié)果 267株新生兒血培養(yǎng)陽性結(jié)果中，以凝固酶陰性葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為主。經(jīng)證實，致病菌有163株，104株為污染菌，污染菌中以凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀桿菌屬、芽孢桿菌屬、微球菌屬為主。污染菌組超敏C反應(yīng)蛋白陽性結(jié)果顯著低于感染組（P<0.01）。結(jié)論 血清超敏C反應(yīng)蛋白水平檢測有助于鑒別血培養(yǎng)陽性的分離菌是致病菌還是污染菌，為臨床使用抗菌藥物提供可靠依據(jù)。

關(guān)鍵詞：超敏C反應(yīng)蛋白；血培養(yǎng)；新生兒敗血癥；致病菌

Abstract：Objective To analyze the correlation between the positive bacteria isolation of neonatal blood culture and the hypersensitive c-reactive protein（Hs-CRP） determination value and provide the basis for clinical identification of pathogenic bacteria and contaminated bacteria. Methods Using BACTEC9120 blood culture instrument for blood culture， bacteria identification using ATB bacteria identification instrument. The level of serum Hs-CRP is determined by immune scattering turbidimetry. For all the positive isolations， contaminated bacteria are identified by comprehensive laboratory evaluation and clinical return visit. The diagnosis of pathogenic bacteria is determined by the clinical diagnosis finally. Results Among the 267 neonatal blood culture positive strains， coagulant negative staphylococcus aureus， E.coli and klebsiella pneummoniae occupy a dominant position. It has been proved that 163 strains are pathogenic bacteria and 104 strains are contaminated bacteria. Most of the contaminated bacteria are coagulant negative staphylococcus bacteria， coryne bacterium genus bacillus genus and micrococcus. The value of Hs-CRP in contaminated bacteria group below the infection group significantly（P<0.01）. Conclusion Serum Hs-CRP level detection is helpful in identifying pathogenic bacteria and providing reliable guidance for the clinical use of antimicrobial drugs.

Key words：Hypersensitive c-reactive protein（Hs-CRP）； Blood culture； Neonatal sepsis

新生兒敗血癥指新生兒患者細菌侵入血液循環(huán)，并在其中繁殖和產(chǎn)生毒素所造成的全身性感染，是新生兒常見的嚴重疾患，導致新生兒死亡的重要原因。由于新生兒尤其是早產(chǎn)兒常常不會像年長兒那樣出現(xiàn)發(fā)熱、白細胞升高等支持感染的指標，且新生兒易哭鬧等原因而致采血困難，采血時標本污染率較高，臨床上對其血培養(yǎng)結(jié)果陽性者如何區(qū)分致病菌和污染菌至關(guān)重要。本文收集我院2011年1月～2013年6月新生兒267份血培養(yǎng)陽性標本，通過總結(jié)和分析血培養(yǎng)陽性標本分離菌種類及其與Hs-CRP測定值的相關(guān)性，探討Hs-CRP測定值在鑒別新生兒血培養(yǎng)陽性分離菌是致病菌還是污染菌的價值。

1資料與方法

1.1一般資料 2011年1月～2013年6月我院住院新生兒血培養(yǎng)標本陽性267例，每個新生兒患者常規(guī)檢測Hs-CRP，其中男性145例，女性122例；年齡1～30 d，足月兒155例，早產(chǎn)兒98例，過期兒14例。

1.2檢測方法 血清Hs-CRP采用免疫散射比濁法（日立7180生化分析儀），血培養(yǎng)采用美國BD公司生產(chǎn)的BACTEC9120血培養(yǎng)儀培養(yǎng)，細菌鑒定使用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的ATB細菌鑒定儀鑒定。所有檢測嚴格按說明書進行，同時做好質(zhì)控。

1.3敗血癥、血標本污染判斷標準 敗血癥診斷標準符合新生兒敗血癥的診斷標準[1]。血培養(yǎng)污染判斷標準應(yīng)符合以下至少1項條件[2，3]：①患兒無明顯發(fā)熱及危險因素（如免疫功能低下或侵襲性操作）；②雖有上述危險因素但隨后多次血培養(yǎng)證明為其他病原菌；③使用敏感抗生素治療無效；④發(fā)熱可由其他部位感染解釋，且無明顯的全身感染癥狀；⑤結(jié)合實驗室的標準，如長時間培養(yǎng)后陽性、連續(xù)多次多日培養(yǎng)僅1次為細菌、1次血培養(yǎng)分離出2種以上的皮膚菌群。

2結(jié)果

2.1從267例陽性血培養(yǎng)瓶中分離出細菌267株，其中革蘭氏陽性菌（G+菌）183株，占72.3%，革蘭氏陰性菌（G-菌）104株，占39.0%。葡萄球菌屬中凝固酶陽性葡萄球菌即金黃色葡萄球菌只有3株，占1.1%，凝固酶陰性葡萄球菌中表皮葡萄球菌有82株，占30.7%居首位，而革蘭氏陰性桿菌檢出相對較少，以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為主，分別為32株占12.0%，20株占7.5%。按測定值高低將Hs-CRP分為三組，高值組Hs-CRP>20 mg/L，中值組8 mg/L

2.2對所有分離菌進行實驗室評估和臨床回訪，結(jié)果證實163株為致病菌，104株為污染菌，總評污染率為39.0%。將分離菌中革蘭氏陽性菌（G+菌）和革蘭氏陰性菌（G-菌）分為致病菌組和污染菌組，兩組分離菌與Hs-CRP結(jié)果比較，經(jīng)統(tǒng)計學處理，污染組Hs-CRP陽性結(jié)果顯著低于感染組（χ2=34.85，P<0.01），見表2。

3討論

快速早期診斷新生兒敗血癥是進行合理抗菌治療的基礎(chǔ)，血培養(yǎng)直接采集患者的血液進行體外培養(yǎng)，是目前診斷敗血癥的\"金標準\"。但培養(yǎng)方法也存在標本易污染、陽性率低、檢測周期長等缺點，對于新生兒敗血癥患者，易延誤病情。且各醫(yī)院血培養(yǎng)方法缺乏一個統(tǒng)一的標準，存在假陰性和假陽性的問題[4]，給臨床帶來診治菌血癥、敗血癥的誤區(qū)。所以要探索能在早期較快得到檢查結(jié)果且敏感性及特異性較高的實驗室手段。C反應(yīng)蛋白（CRP）在肝臟內(nèi)產(chǎn)生，是一種免疫球蛋白，在新生兒血液中含量很少，這與其不能通過胎盤有關(guān)。本文采用的超敏技術(shù)檢測Hs-CRP，能準確檢測低濃度CRP，從而提高了試驗的靈敏度和準確度，在臨床實驗室可廣泛使用。細菌感染血流后，CRP會迅速升高，并且感染越重，CRP升高的越多，因此可作為感染與否及感染程度的判定標準之一[5-7]。

本文資料顯示，自血液分離的不同細菌的患者其Hs-CRP的檢出陽性率不同，193株革蘭氏陽性菌中Hs-CRP陽性97例，陽性率50.3%，74株革蘭氏陰性菌中Hs-CRP陽性65例，陽性率90.5%。革蘭陰性菌中Hs-CRP的陽性率高于革蘭陽性菌（P<0.01），提示檢出革蘭陰性菌時的污染率低于革蘭陽性菌。據(jù)報道血培養(yǎng)中假菌血癥的發(fā)生率可高達50%[8]，說明血液培養(yǎng)污染十分嚴重。污染菌主要為皮膚常見定值菌如血漿凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀桿菌屬、陽性芽孢桿菌等。本文資料顯示臨床醫(yī)生在診斷新生兒敗血癥時可結(jié)合患兒的臨床癥狀、血培養(yǎng)分離菌種類及Hs-CRP檢出結(jié)果等因素綜合分析，確定真正的致病細菌，排除污染的檢出菌。同時根據(jù)衛(wèi)生行業(yè)血培養(yǎng)標準，應(yīng)在患者不同部位采集雙份血標本做培養(yǎng)檢查，以提高血培養(yǎng)陽性率與陽性結(jié)果解釋的合理性，

在本研究結(jié)果中顯示，感染組HS-CRP陽性率高達91.4%，而污染組Hs-CRP的陽性率只有14.4%，兩組有統(tǒng)計意義（P<0.01）。進一步的分析發(fā)現(xiàn)，革蘭氏陽性菌中，96株為污染菌，占分離菌總數(shù)的36.0%（96/267），而革蘭氏陰性菌中，8株為污染菌，占分離菌總數(shù)的3.0%（8/267）。上述分析表明當血培養(yǎng)分離出皮膚的正常菌群時，應(yīng)懷疑是血培養(yǎng)污染菌；而Hs-CRP定量結(jié)果，可作為臨床診斷新生兒敗血癥以及區(qū)分致病菌和污染菌的重要參考指標。

綜上所述，血清Hs-CRP水平可作為新生兒血培養(yǎng)陽性標本是否為致病菌的一個重要的客觀指標。血清Hs-CRP水平正常、血培養(yǎng)陽性提示臨床，可能為污染菌。血清Hs-CRP水平升高、血培養(yǎng)陽性，如果分離菌為革蘭氏陰性桿菌，高度提示為感染菌；如果分離菌為革蘭氏陽性菌需結(jié)合臨床指征綜合判斷是否為感染菌。因此，血培養(yǎng)結(jié)合Hs-CRP水平檢測，有助于新生兒菌血癥/敗血癥的正確診斷，避免不必要的使用抗菌藥物。

參考文獻：

[1]余加林，吳仕孝.新生兒敗血癥診療方案[J].中華兒科雜志，2003，41（12）：897-899.

[2]Lee C C， Lin W J， Shih H I， et al. Clinical significance of potential contaminants in blood cultures among patients in a medical center[J]. Journal of microbiology， immunology， and infection Wei mian yu gan ran za zhi，2007，40（5）：438.

[3]Kristof K， Kocsis E，Nagy K.Clinical microbiology of early-onset and late-onset neonatal sepsis， particularly among preterm babies[J].Acta microbiologica et immunologica Hungarica，2009，56（1）：21-51.

[4]王升，張紅升.VersaTREK 全自動血培養(yǎng)儀的臨床應(yīng)用及評價[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2007，4（9）：806-809.

[5]王功僚，宋立宇，黃云峰，等.76例新生兒敗血癥病原菌及藥敏結(jié)果分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2009，19（6）：699-701.

[6]范穎，余加林.可預(yù)測早發(fā)型新生兒敗血癥的臍血標志物[J].兒科藥學雜志，2012，18（011）：49-54.

[7]劉維勤，肖甜甜，余加林.C反應(yīng)蛋白診斷新生兒敗血癥準確性的Meta分析[J].中國循證兒科雜志，2011，6（6）：412-419.

[8]吳偉元，陳民鈞，王輝.陰溝腸桿菌去阻遏持續(xù)高產(chǎn)AmpC酶和超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的檢測[J].中國臨床藥理學雜志，2001，17（2）：104.

編輯/孫杰