高 歌 張會云 尤春玲 王 晨 蘇 娜

1. 天津藥物研究院藥業(yè)有限責任公司，天津 300301 2. 天津紅日藥業(yè)股份有限公司，天津 300700

制藥企業(yè)共線生產(chǎn)產(chǎn)品清潔驗證

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1. 天津藥物研究院藥業(yè)有限責任公司，天津 300301 2. 天津紅日藥業(yè)股份有限公司，天津 300700

在制藥工業(yè)中，清潔是避免污染和交叉污染的重要措施，如何驗證是否做到了有效清潔，是一項非常重要的工作。清潔驗證就是通過科學的方法，在生產(chǎn)設備有代表性的部位取樣進行相關檢測，將檢測結(jié)果與預先設定的標準進行比較，按已制定并經(jīng)批準的清潔標準操作規(guī)程清潔后，設備能始終如一地達到預定的清潔效果，從而證明已制定的清潔標準操作規(guī)程的科學性、有效性。

清潔驗證目標物選擇取樣部位選擇殘留限度標準；HPLC法；TOC法

1 概述

在藥品生產(chǎn)的過程中，每道生產(chǎn)工序完成以后，對所使用的設備進行清潔是防止污染和交叉污染的重要手段。在制藥工業(yè)中，清潔是指對使用后的設備進行清洗，設備中各種殘留物（包括微生物及其代謝產(chǎn)物）的總量降低到不會影響下批產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性的狀態(tài)。清潔驗證就是通過科學的方法，在生產(chǎn)設備有代表性的部位取樣進行相關檢測，將檢測結(jié)果與預先設定的標準進行比較，按已制定并經(jīng)批準的清潔標準操作規(guī)程清潔后，設備能始終如一地達到預定的清潔效果。

2 清潔驗證流程

進行清潔驗證，首先要明確目標物，即選擇哪個產(chǎn)品進行清潔驗證；目標物選定后，要進行殘留限度的計算、選擇取樣部位、樣品檢測，將檢測結(jié)果與殘留限度標準進行對比分析，得出驗證結(jié)論。

2.1 目標物選擇

以片劑產(chǎn)品為例，通常情況下，同一生產(chǎn)線，很多產(chǎn)品會共用全部或部分設備，那么是不是需要每個產(chǎn)品都要做一次清潔驗證呢？答案是否定的。通常情況下，只需挑選出共線產(chǎn)品中，最難清潔的產(chǎn)品作為目標物即可。那么這個“最難清潔的目標物”該如何選擇呢？通常情況下可由以下這幾個指標來評價：溶解性、毒性（LD50），清潔難易程度、批投料量。將生產(chǎn)線涉及的所有產(chǎn)品按照上述這幾個指標進行綜合評分，分數(shù)最高的即為目標物。

2.2 取樣部位選擇

清潔驗證時，該如何選擇取樣部位，才能使所取的樣品具有代表性或挑戰(zhàn)性呢？通常，最難清潔的部位選擇可以參照以下這幾個條件：死角、清潔劑清潔不到的部位、壓力小、流速低的部位、管徑變化處、容易吸附殘留物的部位。

2.3 殘留限度標準

確定殘留限度在清潔驗證中是非常關鍵的，同時也是個非常復雜的問題，但如果不確定殘留限度標準，就無法進行清潔驗證。FDA的清潔驗證指南中提到，其不會為清潔驗證設定一個通用方法或限度標準，因為不同的產(chǎn)品，不同的設備，必定會有不同的殘留限度要求。企業(yè)應當根據(jù)其生產(chǎn)設備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學合理的，能實現(xiàn)并能通過適當?shù)姆椒z驗的限度標準。 通常制定限度標準基于以下原則：

1） 百萬分之一（10×10-6）濃度限度——即10ppm；

2） 最低日治療劑量的1/1000；

3） 目視檢查，是限度標準的補充；

2.3.1 殘留物限度濃度10ppm

假設下批擬生產(chǎn)產(chǎn)品的批量為M（kg），上批產(chǎn)品的殘留物濃度最高為10ppm，即10mg/kg，則殘留物總量最大為M×10×10-6=10M（mg）；共用設備的總表面積和為Atotal（cm2），則殘留于總表面的限度L為10M/Atotal（mg/cm2），從安全角度出發(fā)，再除以安全系數(shù)F，即得L=10M/（Atotal×F）（mg/cm2），假設F=10，則L= M/Atotal（mg/cm2）=103M/Atotal(μg/cm2)。通常情況下，設備的內(nèi)表面積是定值，當批量值取最小值時，即可獲取表面殘留物限度。

2.3.2 生物活性的限度——最低日治療劑量（MTDD）的1/1000

依據(jù)藥物的生物學活性數(shù)據(jù)——最低日治療劑量確定殘留限度是制藥企業(yè)普遍采用的方法。根據(jù)臨床觀察統(tǒng)計，個體差異達到1/1000基本是不存在的，這就符合了GMP足夠安全的理念，因此這種方法非常適合確定高生物的殘留物限度。

清潔的目的是保證A產(chǎn)品的生理作用不會出現(xiàn)在B產(chǎn)品中。根據(jù)MTDD計算單位面積殘留物限度的過程如下：（1）將涉及的產(chǎn)品、設備列表，表中包含以下幾項：最低日治療劑量MTDD（mg），每個產(chǎn)品單個最小制劑量Uw（g）和說明書中每天允許使用的最大制劑數(shù)Dd，最小生產(chǎn)批量M（kg）；（2）設備鏈內(nèi)表面積Atotal（cm2）；（3）取最小批量M（kg）；（4）?。?）中對應產(chǎn)品的單個制劑質(zhì)量Uw和每天允許使用的最大制劑數(shù)Dd；計算公式如下：

可根據(jù)具體情況決定安全系數(shù)的值。

2.3.3 肉眼觀察限度——不得有可見的殘留物

根據(jù)一些國外研究資料顯示，目檢能發(fā)現(xiàn)低至1μg/cm2的殘留物，是最簡單、直觀、定性的評估清潔的程度。但2010版GMP附錄2《確認與驗證》第八章第三十九條規(guī)定，目視檢查是一個很重要的標準，但通常不能作為單一可接受標準使用。

2.4 檢測方法

清潔驗證樣品，目前采用的比較普遍的檢驗方法是HPLC法，在樣品檢驗前，一般要進行方法學的確認，主要確認內(nèi)容有：檢測限、定量限、線性/范圍、擦拭回收率，還應有溶液穩(wěn)定性和棉簽回收率（確定取樣棉簽不干擾樣品檢測）考察。

TOC（總有機碳）法是目前清潔驗證中采用的比較新穎的檢測方法，靈敏度可達億分之一。與HPLC法相比較，TOC法是一種非專屬性檢驗方法，具有不需摸索活性成分和考慮樣品的因素，較為省時等優(yōu)點。在樣品檢測前要進行包括檢測限、定量限、線性/范圍、準確度、精確度以及擦拭回收率的考察。

TOC法殘留限度標準可通過HPLC法活性殘留限度計算，計算公式如下：

TOCLimit =HPLC法目標物活性殘留限度(ppm ) ×目標物中碳元素所占目標物分子量的百分比

3 討論

1. 清潔驗證重點關注共線生產(chǎn)的產(chǎn)品，某些高致敏性藥品（如青霉素/頭孢）和高活性的藥物（類固醇/細胞毒素），即使用最好的清潔方法也不能被檢出，因此其生產(chǎn)必須是專用設備。

2. HPLC法具有專屬性，可對殘留物進行明確檢測；TOC法為非專屬性，不能確定檢測殘留物是哪個成分，但其具有靈敏度高，檢測速度快的優(yōu)點，適合在線監(jiān)測和日常清潔的監(jiān)測。

[1]鄒大光,袁曦.一種清潔驗證新方法—TOC法[J]. 中國藥事. 2002,16(1).

[2] 藥品生產(chǎn)驗證指南[S].2003.