高 歌 張會(huì)云 尤春玲 王 晨 蘇 娜

1. 天津藥物研究院藥業(yè)有限責(zé)任公司，天津 300301 2. 天津紅日藥業(yè)股份有限公司，天津 300700

制藥企業(yè)共線生產(chǎn)產(chǎn)品清潔驗(yàn)證

高 歌1張會(huì)云2尤春玲1王 晨1蘇 娜1

1. 天津藥物研究院藥業(yè)有限責(zé)任公司，天津 300301 2. 天津紅日藥業(yè)股份有限公司，天津 300700

在制藥工業(yè)中，清潔是避免污染和交叉污染的重要措施，如何驗(yàn)證是否做到了有效清潔，是一項(xiàng)非常重要的工作。清潔驗(yàn)證就是通過(guò)科學(xué)的方法，在生產(chǎn)設(shè)備有代表性的部位取樣進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果與預(yù)先設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，按已制定并經(jīng)批準(zhǔn)的清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程清潔后，設(shè)備能始終如一地達(dá)到預(yù)定的清潔效果，從而證明已制定的清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的科學(xué)性、有效性。

清潔驗(yàn)證目標(biāo)物選擇取樣部位選擇殘留限度標(biāo)準(zhǔn)；HPLC法；TOC法

1 概述

在藥品生產(chǎn)的過(guò)程中，每道生產(chǎn)工序完成以后，對(duì)所使用的設(shè)備進(jìn)行清潔是防止污染和交叉污染的重要手段。在制藥工業(yè)中，清潔是指對(duì)使用后的設(shè)備進(jìn)行清洗，設(shè)備中各種殘留物（包括微生物及其代謝產(chǎn)物）的總量降低到不會(huì)影響下批產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性的狀態(tài)。清潔驗(yàn)證就是通過(guò)科學(xué)的方法，在生產(chǎn)設(shè)備有代表性的部位取樣進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果與預(yù)先設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，按已制定并經(jīng)批準(zhǔn)的清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程清潔后，設(shè)備能始終如一地達(dá)到預(yù)定的清潔效果。

2 清潔驗(yàn)證流程

進(jìn)行清潔驗(yàn)證，首先要明確目標(biāo)物，即選擇哪個(gè)產(chǎn)品進(jìn)行清潔驗(yàn)證；目標(biāo)物選定后，要進(jìn)行殘留限度的計(jì)算、選擇取樣部位、樣品檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果與殘留限度標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比分析，得出驗(yàn)證結(jié)論。

2.1 目標(biāo)物選擇

以片劑產(chǎn)品為例，通常情況下，同一生產(chǎn)線，很多產(chǎn)品會(huì)共用全部或部分設(shè)備，那么是不是需要每個(gè)產(chǎn)品都要做一次清潔驗(yàn)證呢？答案是否定的。通常情況下，只需挑選出共線產(chǎn)品中，最難清潔的產(chǎn)品作為目標(biāo)物即可。那么這個(gè)“最難清潔的目標(biāo)物”該如何選擇呢？通常情況下可由以下這幾個(gè)指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)：溶解性、毒性（LD50），清潔難易程度、批投料量。將生產(chǎn)線涉及的所有產(chǎn)品按照上述這幾個(gè)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分，分?jǐn)?shù)最高的即為目標(biāo)物。

2.2 取樣部位選擇

清潔驗(yàn)證時(shí)，該如何選擇取樣部位，才能使所取的樣品具有代表性或挑戰(zhàn)性呢？通常，最難清潔的部位選擇可以參照以下這幾個(gè)條件：死角、清潔劑清潔不到的部位、壓力小、流速低的部位、管徑變化處、容易吸附殘留物的部位。

2.3 殘留限度標(biāo)準(zhǔn)

確定殘留限度在清潔驗(yàn)證中是非常關(guān)鍵的，同時(shí)也是個(gè)非常復(fù)雜的問(wèn)題，但如果不確定殘留限度標(biāo)準(zhǔn)，就無(wú)法進(jìn)行清潔驗(yàn)證。FDA的清潔驗(yàn)證指南中提到，其不會(huì)為清潔驗(yàn)證設(shè)定一個(gè)通用方法或限度標(biāo)準(zhǔn)，因?yàn)椴煌漠a(chǎn)品，不同的設(shè)備，必定會(huì)有不同的殘留限度要求。企業(yè)應(yīng)當(dāng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實(shí)際情況，制定科學(xué)合理的，能實(shí)現(xiàn)并能通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒z驗(yàn)的限度標(biāo)準(zhǔn)。 通常制定限度標(biāo)準(zhǔn)基于以下原則：

1） 百萬(wàn)分之一（10×10-6）濃度限度——即10ppm；

2） 最低日治療劑量的1/1000；

3） 目視檢查，是限度標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充；

2.3.1 殘留物限度濃度10ppm

假設(shè)下批擬生產(chǎn)產(chǎn)品的批量為M（kg），上批產(chǎn)品的殘留物濃度最高為10ppm，即10mg/kg，則殘留物總量最大為M×10×10-6=10M（mg）；共用設(shè)備的總表面積和為Atotal（cm2），則殘留于總表面的限度L為10M/Atotal（mg/cm2），從安全角度出發(fā)，再除以安全系數(shù)F，即得L=10M/（Atotal×F）（mg/cm2），假設(shè)F=10，則L= M/Atotal（mg/cm2）=103M/Atotal(μg/cm2)。通常情況下，設(shè)備的內(nèi)表面積是定值，當(dāng)批量值取最小值時(shí)，即可獲取表面殘留物限度。

2.3.2 生物活性的限度——最低日治療劑量（MTDD）的1/1000

依據(jù)藥物的生物學(xué)活性數(shù)據(jù)——最低日治療劑量確定殘留限度是制藥企業(yè)普遍采用的方法。根據(jù)臨床觀察統(tǒng)計(jì)，個(gè)體差異達(dá)到1/1000基本是不存在的，這就符合了GMP足夠安全的理念，因此這種方法非常適合確定高生物的殘留物限度。

清潔的目的是保證A產(chǎn)品的生理作用不會(huì)出現(xiàn)在B產(chǎn)品中。根據(jù)MTDD計(jì)算單位面積殘留物限度的過(guò)程如下：（1）將涉及的產(chǎn)品、設(shè)備列表，表中包含以下幾項(xiàng)：最低日治療劑量MTDD（mg），每個(gè)產(chǎn)品單個(gè)最小制劑量Uw（g）和說(shuō)明書(shū)中每天允許使用的最大制劑數(shù)Dd，最小生產(chǎn)批量M（kg）；（2）設(shè)備鏈內(nèi)表面積Atotal（cm2）；（3）取最小批量M（kg）；（4）?。?）中對(duì)應(yīng)產(chǎn)品的單個(gè)制劑質(zhì)量Uw和每天允許使用的最大制劑數(shù)Dd；計(jì)算公式如下：

可根據(jù)具體情況決定安全系數(shù)的值。

2.3.3 肉眼觀察限度——不得有可見(jiàn)的殘留物

根據(jù)一些國(guó)外研究資料顯示，目檢能發(fā)現(xiàn)低至1μg/cm2的殘留物，是最簡(jiǎn)單、直觀、定性的評(píng)估清潔的程度。但2010版GMP附錄2《確認(rèn)與驗(yàn)證》第八章第三十九條規(guī)定，目視檢查是一個(gè)很重要的標(biāo)準(zhǔn)，但通常不能作為單一可接受標(biāo)準(zhǔn)使用。

2.4 檢測(cè)方法

清潔驗(yàn)證樣品，目前采用的比較普遍的檢驗(yàn)方法是HPLC法，在樣品檢驗(yàn)前，一般要進(jìn)行方法學(xué)的確認(rèn)，主要確認(rèn)內(nèi)容有：檢測(cè)限、定量限、線性/范圍、擦拭回收率，還應(yīng)有溶液穩(wěn)定性和棉簽回收率（確定取樣棉簽不干擾樣品檢測(cè)）考察。

TOC（總有機(jī)碳）法是目前清潔驗(yàn)證中采用的比較新穎的檢測(cè)方法，靈敏度可達(dá)億分之一。與HPLC法相比較，TOC法是一種非專屬性檢驗(yàn)方法，具有不需摸索活性成分和考慮樣品的因素，較為省時(shí)等優(yōu)點(diǎn)。在樣品檢測(cè)前要進(jìn)行包括檢測(cè)限、定量限、線性/范圍、準(zhǔn)確度、精確度以及擦拭回收率的考察。

TOC法殘留限度標(biāo)準(zhǔn)可通過(guò)HPLC法活性殘留限度計(jì)算，計(jì)算公式如下：

TOCLimit =HPLC法目標(biāo)物活性殘留限度(ppm ) ×目標(biāo)物中碳元素所占目標(biāo)物分子量的百分比

3 討論

1. 清潔驗(yàn)證重點(diǎn)關(guān)注共線生產(chǎn)的產(chǎn)品，某些高致敏性藥品（如青霉素/頭孢）和高活性的藥物（類固醇/細(xì)胞毒素），即使用最好的清潔方法也不能被檢出，因此其生產(chǎn)必須是專用設(shè)備。

2. HPLC法具有專屬性，可對(duì)殘留物進(jìn)行明確檢測(cè)；TOC法為非專屬性，不能確定檢測(cè)殘留物是哪個(gè)成分，但其具有靈敏度高，檢測(cè)速度快的優(yōu)點(diǎn)，適合在線監(jiān)測(cè)和日常清潔的監(jiān)測(cè)。

[1]鄒大光,袁曦.一種清潔驗(yàn)證新方法—TOC法[J]. 中國(guó)藥事. 2002,16(1).

[2] 藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南[S].2003.