吳 群

（1．重慶市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，重慶 401121； 2．重慶市藥物過(guò)程與質(zhì)量控制工程技術(shù)研究中心，重慶 401121）

吲哚美辛腸溶片近紅外快速定量方法的建立

吳 群1，2

（1．重慶市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，重慶 401121； 2．重慶市藥物過(guò)程與質(zhì)量控制工程技術(shù)研究中心，重慶 401121）

目的 采用近紅外漫反射光譜（NIR）分析技術(shù)和化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對(duì)吲哚美辛腸溶片進(jìn)行快速定量分析。方法 選擇8個(gè)廠家生產(chǎn)的156批吲哚美辛腸溶片，采集樣品的 NIR，并以法定方法測(cè)定其含量，采用偏最小二乘法建立定量模型。結(jié)果 樣品濃度范圍為24．61% ～32．96%，用78個(gè)樣品進(jìn)行外部驗(yàn)證，外部驗(yàn)證均方差（RMSEP）為0．508%，平均相對(duì)偏差為0．45%。結(jié)論 該方法快速、簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，適于藥品的現(xiàn)場(chǎng)快檢。

吲哚美辛；近紅外漫反射光譜；定量模型

吲哚美辛腸溶片屬非甾體抗炎藥物，通過(guò)抑制體內(nèi)前列腺素的生物合成而產(chǎn)生抗炎、解熱及鎮(zhèn)痛等作用[1]，臨床應(yīng)用廣泛。現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為2010年版《中國(guó)藥典（二部）》[2]，含量測(cè)定采用高效液相色譜（HPLC）法。近紅外光是波長(zhǎng)介于可見光區(qū)與中紅外光區(qū)的電磁波，其波數(shù)范圍約為12 500～4 000／cm[3]，近紅外漫反射光譜（NIR）分析技術(shù)是集光譜分析技術(shù)、現(xiàn)代電子技術(shù)和化學(xué)計(jì)量學(xué)技術(shù)為一體的現(xiàn)代光譜技術(shù)，主要用于供試品的快速、無(wú)損分析。該方法有操作簡(jiǎn)便、分析速度快、非破壞性、無(wú)污染、實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)分析的優(yōu)點(diǎn)，故在藥物分析、在線檢測(cè)及質(zhì)量控制等方面有巨大優(yōu)勢(shì)[4－7]。2010年版《中國(guó)藥典（二部）》收載了近紅外光譜法[2]。本研究中采用吲哚美辛片近紅外光譜數(shù)據(jù)，以HPLC法測(cè)定含量為參考值，結(jié)合偏最小二乘法建立吲哚美辛腸溶片的近紅外定量模型，實(shí)現(xiàn)對(duì)吲哚美辛腸溶片的快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確測(cè)定[8]?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

Matrix－F近紅外光譜儀，OPUS 5．0分析軟件，均由德國(guó)Bruker公司生產(chǎn)；Agilent 1260型高效液相色譜儀；MSU225S－000－DA型電子天平(十萬(wàn)分之一，Sartorius公司)。

1．2 試藥

本研究中收集了全國(guó)在產(chǎn)的8個(gè)廠家156批樣本，分別來(lái)自全國(guó)生產(chǎn)、流通、銷售、使用領(lǐng)域，均為2015年國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)樣品；吲哚美辛對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)為0258－9602）。

2 方法與結(jié)果

2．1 方法

2．1．1 吲哚美辛含量測(cè)定

按照2010年版《中國(guó)藥典（二部）》，采用HPLC法測(cè)定的含量作為理論含量，156批樣品的濃度范圍為24．61% ～32．96%。

2．1．2 光譜采集

采用Matrix－F隨機(jī)配帶的光纖探頭，光譜掃描范圍為12 000～4 000／cm，分辨率為8 cm，掃描次數(shù)為32次，每批樣品測(cè)定6片，計(jì)算平均光譜，建模。

2．2 結(jié)果

2．2．1 建模參數(shù)選擇

各廠家樣品及吲哚美辛對(duì)照品平均光譜見圖1，可見，各廠家NIR光譜圖基本一致，吲哚美辛對(duì)照品NIR光譜圖在 5 500～6 200／cm和4 100～4 800／cm譜段有很明顯的特征吸收峰，且各廠家在相應(yīng)譜段也有很強(qiáng)的吸收峰。選取特定譜段、適當(dāng)?shù)念A(yù)處理方法、合理的化學(xué)計(jì)量學(xué)方法以突出活性成分的信息，是建立吲哚美辛腸溶片定量模型的關(guān)鍵。

2．2．2 內(nèi)部交叉驗(yàn)證

156批樣品全部作為校正集，利用 OPUS軟件Quant－2中所有預(yù)處理方法和自動(dòng)優(yōu)化功能（NIR方式）對(duì)校正集樣品進(jìn)行內(nèi)部交叉驗(yàn)證，確定建模參數(shù)：預(yù)處理方法為一階導(dǎo)數(shù)和矢量歸一化，最佳光譜范圍6 202．3～5 596．7／cm，5 403．8～4 998．8／cm，4 802．1～4 196．6／cm，處理后的NIR圖見圖2。

2．2．3 外部交叉驗(yàn)證建模

利用OPUS軟件Quant－2中一一間隔自動(dòng)選取校正和驗(yàn)證集，采用2．2．2項(xiàng)中的建模參數(shù)，采用外部交叉驗(yàn)證，決定系數(shù)（R2）為 97．95%，外部驗(yàn)證均方差（RMSEP）為0．508%，維數(shù)（Rank）為7，最大相對(duì)偏差為1．57%，平均相對(duì)偏差為0．45%，預(yù)測(cè)值與真實(shí)值的線性關(guān)系見圖3。

圖1 各廠家樣品及吲哚美辛對(duì)照品NIR圖

圖2 處理后的NIR圖

圖3 預(yù)測(cè)值與真實(shí)值的線性關(guān)系示意圖

2．3 模型驗(yàn)證

2．3．1 專屬性考察

模型正確判定待測(cè)物是否為模型預(yù)測(cè)品種的能力稱為專屬性[9]。樣品的馬氏距離與限定值進(jìn)行比較檢驗(yàn)異常樣品：限定值＝Factor×Rank／M，Rank為階數(shù)即主成分維數(shù)；M為建模樣品數(shù)；Factor為因子，因子范圍為2～10，本試驗(yàn)因子選2。利用建立的定量分析模型對(duì)常見的阿司匹林、雙氯芬酸鈉、對(duì)乙酰氨基酚、布洛芬4類解熱鎮(zhèn)痛樣品進(jìn)行測(cè)定，其馬氏距離均大于限定值（0．10），被認(rèn)定是異常樣品。說(shuō)明所建立的吲哚美辛腸溶片定量模型具有較好的專屬性。

2．3．2 線性關(guān)系考察

近紅外的線性與傳統(tǒng)分析方法的線性不同，由于近紅外方法的建立一般采用多元回歸，為二級(jí)分析方法，故其線性主要用待分析物的預(yù)測(cè)結(jié)果與真實(shí)值之間的關(guān)系來(lái)評(píng)價(jià)[10]。在 24．61% ～32．96%的濃度范圍內(nèi)，以NIR預(yù)測(cè)值（Y）對(duì)HPLC測(cè)定值（X）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y＝0．975 4 X＋0．829 9（R2＝0．980 1），表明建立的近紅外定量預(yù)測(cè)值與真實(shí)值之間具有良好的相關(guān)性。

2．3．3 準(zhǔn)確性考察

驗(yàn)證集的NIR預(yù)測(cè)結(jié)果與法定方法測(cè)量結(jié)果比較，偏差（mg／mg，%）在0．1%以下的有10批，0．1%～0．2%有 16批，0．2%～0．3%有 10批，0．3～0．4%有12批，0．4% ～0．5%有 9批，0．5% ～1．0%有 16批，1．0%以上有 5批。最大偏差為 1．57%，平均偏差為0．40%。小于近紅外快速檢測(cè)對(duì)于偏差的限度要求為5%。

2．3．4 重復(fù)性考察

取樣品1份，在同1天內(nèi)、由同一操作者在同樣的環(huán)境中按前述方法掃描NIR光譜，測(cè)定6次，分別求其平均光譜并利用所建模型預(yù)測(cè)其主成分的含量。測(cè)定的RSD為0．37%，表明該方法重復(fù)性良好。

3 討論

近年來(lái)，近紅外光譜法在各種質(zhì)量控制中的應(yīng)用逐漸增多[11－14]。本研究中建立的吲哚美辛腸溶片近紅外定量分析模型在日常應(yīng)用時(shí)，僅需掃描未知樣品光譜后，計(jì)算出平均光譜代入模型，便可得出其含量，較傳統(tǒng)檢測(cè)方法具有快速、簡(jiǎn)便、不消耗試劑的優(yōu)點(diǎn)，且本研究中樣品幾乎涵蓋了全國(guó)所有生產(chǎn)企業(yè)，故樣品數(shù)量多、代表性強(qiáng)，故可用于全國(guó)各企業(yè)的快速定量分析。同時(shí)，本方法不局限于實(shí)驗(yàn)室，也可用于市場(chǎng)、偏遠(yuǎn)地區(qū)的藥品打假、質(zhì)量控制，不局限于藥品終端檢測(cè)，為實(shí)現(xiàn)在線監(jiān)控吲哚美辛腸溶片的質(zhì)量提供了依據(jù)。

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Construction of a Quantitative M odel for Determination of Indometacin Enteric－Coated Tablets

Wu Qun1，2
（1．Chongqing Institute for Food and Drug Control，Chongqing，China 401121； 2．Chongqing Research Center for Drug Process and Quality Control Engineering，Chongqing，China 401121）

Objective To quantitatively analyze the Indometacin Enteric－coated Tablets by near infrared diffuse reflection spectroscopy technology and chemometrics．M ethods 156 batches of Indometacin Enteric－coated Tablets from 8 different manufacturers were chosen for analyzing．The near infrared diffuse reflection spectrum of the samples was collected；the active pharmaceutical ingredient（API）contents were determined by the conventional method；the model with the partial least square（PLS）algorithm available in the quant was developed．Results The model was based on cross validation with API from 24．61% to 32．96%．78 batches were used as validation set，the RMSEP was 0．508%，and the average relative deviation for the validation set was 0．45%．Conclusion The method is accurate，quick and convenient，which can be used for quick analysis in drug control．

indometacin；near infrared spectroscopy；quantitative model

R927．11；R971＋．1

A

1006－4931(2016)10－0066－03

吳群（1979－），女，大學(xué)本科，主管藥師，研究方向?yàn)樗幬锓治?，（電話?23－86072731（電子信箱）920817428＠qq．com。

2016－01－10；

2016－02－07)