李智珍

(宜春市婦幼保健院，江西宜春336000)

人乳頭瘤病毒檢測(cè)在宮頸CIN診斷及隨訪中的意義

李智珍

(宜春市婦幼保健院，江西宜春336000)

目的探討人乳頭瘤病毒檢測(cè)在宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）診斷及隨訪中的意義。方法在2014年4月-2016年4月本院收治的有臨床指征作陰道鏡活檢的宮頸病變患者中隨機(jī)抽取140例，所有患者均實(shí)施導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)，篩查人乳頭瘤病毒。根據(jù)陰道鏡下宮頸活檢結(jié)果，將其分為A組（慢性宮頸炎，n=62）、B組（CINⅠ級(jí)，n=46）、C組（CINⅡ級(jí)，n= 20）、D組（CINⅢ級(jí)，n=12），對(duì)比四組患者高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性率。結(jié)果本組140例患者中，高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性56例，陽(yáng)性率為40.0%；陰性84例，陰性率為60.0%；病理活檢結(jié)果顯示，A組、B組、C組、D組高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性率分別為6.5%（4/62）、54.3%（25/46）、75.0%（15/20）、100.0%（12/12）。A組陽(yáng)性率明顯低于B組、C組、D組，結(jié)果有顯著性差異（P<0.05），但B組、C組、D組之間對(duì)比，結(jié)果無(wú)顯著性差異（P>0.05）。結(jié)論在宮頸上皮內(nèi)瘤變的診斷和鑒別中，采用人乳頭瘤病毒檢測(cè)，不僅能對(duì)現(xiàn)行的宮頸疾病患者進(jìn)行確診，還能及時(shí)發(fā)現(xiàn)存在高危風(fēng)險(xiǎn)的人群，可作為診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的重要指標(biāo)應(yīng)用于臨床。

宮頸上皮內(nèi)瘤變；人乳頭瘤病毒；診斷；隨訪

近年來(lái)，宮頸癌的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升及年輕化趨勢(shì)[1，2]。臨床上大量研究認(rèn)為，在宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中，高危型人乳頭瘤病毒感染發(fā)揮著重要的作用[3，4]。一旦患者出現(xiàn)高危型人乳頭瘤病毒感染，會(huì)引發(fā)宮頸上皮內(nèi)瘤變，而一旦宮頸癌上皮內(nèi)瘤變發(fā)展到Ⅱ級(jí)及Ⅲ級(jí)，便是宮頸癌的癌前病變[5]。從這個(gè)意義上來(lái)說(shuō)，臨床上采取積極措施，尋找有效的方法，加強(qiáng)對(duì)人乳頭瘤病毒感染的檢測(cè)、治療和預(yù)防，在宮頸病變的早期診斷及宮頸癌的預(yù)防中具有重要的意義。本組以140例有臨床指征作陰道鏡活檢的宮頸病變患者為觀察對(duì)象，探討人乳頭瘤病毒診斷及在隨訪中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料在2014年4月-2016年4月本院收治的有臨床指征作陰道鏡活檢的宮頸病變患者中隨機(jī)抽取140例，所有患者均實(shí)施導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)，篩查人乳頭瘤病毒。本組140例患者中，年齡最小為25歲，年齡最大為57歲，平均年齡（34.8±2.5）歲；平均孕次（3.6±1.2）次；平均產(chǎn)次（1.5±0.6）次。根據(jù)陰道鏡下宮頸活檢結(jié)果，將其分為A組（慢性宮頸炎，n=62）、B組（CINⅠ級(jí)，n= 46）、C組（CINⅡ級(jí)，n=20）、D組（CINⅢ級(jí)，n= 12）。四組患者一般資料對(duì)比，P>0.05，可對(duì)比。本調(diào)查經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過(guò)。

1.2 方法

1.2.1 人乳頭瘤病毒檢測(cè)方法采用凱普人乳頭瘤病毒專用宮頸刷，將其緊貼宮頸口黏膜，緩慢旋轉(zhuǎn)3~5圈，對(duì)宮頸分泌物或脫落的細(xì)胞進(jìn)行收集，將取樣后宮頸刷置入備有0.5ml的無(wú)菌鹽水試管中，置于4℃冰箱內(nèi)備用。本調(diào)查所用儀器為廣東凱普生物科技有限公司生產(chǎn)的人乳頭瘤病毒低密度基因芯片檢測(cè)設(shè)備及人乳頭瘤病毒基因威針分型檢測(cè)試劑盒。對(duì)待檢樣本實(shí)施宮頸細(xì)胞總DNA抽提、基因擴(kuò)增、導(dǎo)流雜交，在固定妥當(dāng)?shù)腄NA探針低密度基因芯片膜上，對(duì)人乳頭瘤病毒進(jìn)行檢測(cè)。嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明書進(jìn)行操作和評(píng)定結(jié)果。

1.2.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)人乳頭瘤病毒正常參考值為0~ 1.00pg/ml。

1.2.3 隨訪方案每隔3個(gè)月進(jìn)行1次隨訪，持續(xù)隨訪24個(gè)月。隨訪時(shí)對(duì)患者實(shí)施宮頸細(xì)胞學(xué)檢查及高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)。針對(duì)細(xì)胞學(xué)或人乳頭瘤病毒檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常的患者，對(duì)其實(shí)施陰道鏡檢查，必要時(shí)給予患者宮頸多點(diǎn)活檢組織病理學(xué)檢查。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析將收集到的數(shù)據(jù)通過(guò)SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用χ2檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料，計(jì)量資料均用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性檢出結(jié)果本組140例患者中，高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性56例，陽(yáng)性率為40.0%；陰性84例，陰性率為60.0%。

2.2 四組患者高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性率對(duì)比病理活檢結(jié)果顯示，A組、B組、C組、D組高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性率分別為6.5%、54.3%、75.0%、100.0%。A組陽(yáng)性率明顯低于B組、C組、D組，結(jié)果有顯著性差異（P<0.05），但B組、C組、D組之間對(duì)比，結(jié)果無(wú)顯著性差異（P>0.05）。見表1。

表1 四組患者高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性率對(duì)比（n）

3 討論

作為臨床上一種常見婦科惡性腫瘤，宮頸癌發(fā)病率僅次于乳腺癌，而死亡率為女性生殖器腫瘤之首[6]。而且，值得注意的是，近年來(lái)，國(guó)內(nèi)宮頸癌發(fā)生率逐年增長(zhǎng)，且呈現(xiàn)出年輕化趨勢(shì)[7]。宮頸癌發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，考慮與人乳頭瘤病毒感染等因素有關(guān)[8]。

人乳頭瘤病毒是一種無(wú)外殼的雙鏈DNA型病毒，屬于乳頭瘤病毒系列[9]。人乳頭瘤病毒能對(duì)患者上皮組織造成感染，且能致使患者出現(xiàn)皮膚與黏膜良性、惡性病變[10]。在長(zhǎng)期的發(fā)展過(guò)程中，醫(yī)學(xué)界已發(fā)現(xiàn)200多種不同類型的人乳頭瘤病毒，且證實(shí)不同型別的人乳頭瘤病毒與體內(nèi)特定感染部位及病變有著密切的關(guān)系[11]。事實(shí)上，按照人乳頭瘤病毒的不同型別，以及腫瘤發(fā)生的危險(xiǎn)性，可以將人乳頭瘤病毒分為高危型、低危型兩種[12]。前者會(huì)致使患者出現(xiàn)全身很多部位的癌變，是引發(fā)宮頸癌前病變及宮頸癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。而后者可能是與尖銳濕疣、性傳播疣等因素有關(guān)，不會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)癌變[13]。

當(dāng)前，臨床上尚未具體明確高危型人乳頭瘤病毒導(dǎo)致癌變的具體機(jī)制，考慮與細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡等因素有關(guān)。有研究認(rèn)為，一旦高危型人乳頭瘤病毒對(duì)患者宮頸造成感染，可以將自身的DNA進(jìn)一步整合到宿主基因組。而人乳頭瘤病毒的E6和E7癌型蛋白能激活原癌基因，且能致使抑癌基因失活，從而對(duì)機(jī)體內(nèi)正常細(xì)胞周期調(diào)控產(chǎn)生影響，導(dǎo)致宮頸上皮細(xì)胞出現(xiàn)相應(yīng)的惡性轉(zhuǎn)變。這被認(rèn)為是高危型人乳頭瘤病毒感染引發(fā)宮頸癌的可能機(jī)制。從這個(gè)意義上來(lái)說(shuō)，人乳頭瘤病毒DNA的分型檢測(cè)，在宮頸癌前病變的早期診斷和治療中就有著重要意義。

本組所用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)為全新的檢測(cè)技術(shù)，可以集PCR、核酸雜交、基因芯片等多項(xiàng)技術(shù)于一身，能同時(shí)檢測(cè)人乳頭瘤病毒的18種常見基因分型，且能對(duì)中國(guó)人常見的66、53、CP 8304三種基因型進(jìn)行檢測(cè)[15]。該方法操作簡(jiǎn)單，診斷準(zhǔn)確，不易受人為主觀因素的影響，可作為篩查宮頸癌的重要手段應(yīng)用于臨床。

結(jié)果顯示，本組140例患者中，高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性56例，陽(yáng)性率為40.0%；陰性84例，陰性率為60.0%。表明在宮頸癌前病變的篩查中，高危型人乳頭瘤病毒檢測(cè)有著較高的敏感性，與國(guó)內(nèi)宮頸癌高發(fā)區(qū)篩查資料結(jié)果相符[16]。此外，病理活檢結(jié)果顯示，A組、B組、C組、D組高危型人乳頭瘤病毒陽(yáng)性率分別為6.5%、54.3%、75.0%、100.0%。A組陽(yáng)性率明顯低于B組、C組、D組（P< 0.05），但B組、C組、D組之間無(wú)顯著性差異（P> 0.05）。結(jié)果表明，高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)感染，是致使宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變持續(xù)和進(jìn)展的重要條件。

綜上所述，在宮頸上皮內(nèi)瘤變的診斷和鑒別中，采用人乳頭瘤病毒檢測(cè)，不僅能對(duì)現(xiàn)行的宮頸疾病患者進(jìn)行確診，還能及時(shí)發(fā)現(xiàn)存在高危風(fēng)險(xiǎn)的人群，可作為診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的重要參考指標(biāo)應(yīng)用于臨床。

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R711.74，R737.33，R446.8

A

1674-1129(2016)06-0764-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.06.022

2016-07-08；

2016-11-21)