周發(fā)為，喻 紅

武漢大學基礎醫(yī)學院(湖北 武漢 430071)

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白細胞酯酶檢測代替涂片細胞學計數(shù)評價痰液標本質量

周發(fā)為，喻 紅*

武漢大學基礎醫(yī)學院(湖北 武漢 430071)

目的 比較白細胞酯酶檢測和傳統(tǒng)涂片細胞計數(shù)評價痰液標本質量，并探討其臨床應用價值。方法 2015年6月—2016年3月湖北民族學院附屬民大醫(yī)院各臨床科室共4 571份細菌培養(yǎng)痰液標本，根據(jù)臨床是否檢測白細胞酯酶分為兩組。臨床未篩檢組2 068份痰液標本，在微生物實驗室涂片染色細胞計數(shù)，并用兩種試劑檢測白細胞酯酶。臨床篩檢組2 503份痰液標本，用一種試劑檢測白細胞酯酶，結果為陽性者的標本送至檢驗科，在微生物實驗室涂片細胞計數(shù)，結果為陰性的重新采集，比較兩組標本質量。結果 臨床未篩檢組2 068份痰液標本，涂片細胞計數(shù)合格率為31.0%，白細胞酯酶檢測陽性率(即合格率)為32.2%，兩種方法評價痰液標本質量差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；兩種國產(chǎn)白細胞酯酶檢測試劑之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。臨床篩檢組，涂片細胞計數(shù)，痰液標本合格率為76%，與臨床未篩檢組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 ①白細胞酯酶檢測用于評價痰液標本質量，與傳統(tǒng)的痰液涂片細胞計數(shù)有相同的效果；②白細胞酯酶檢測用于評價痰液標本質量，是一種經(jīng)濟、快速、簡便易行的方法，適宜在臨床推廣。

白細胞酯酶；痰液；顯微鏡檢查

合格痰液標本細菌培養(yǎng)對下呼吸道感染疾病的診斷有重要意義。但一般情況下，痰液標本由患者自己采集，很多患者不能正確留取痰液，嚴重影響了痰液致病菌的檢出[1]。目前，評價痰液標本是否合格，國內外都采用痰液涂片革蘭染色后細胞計數(shù)，即計數(shù)每個低倍視野中白細胞和鱗狀上皮細胞數(shù)量，來判斷痰液標本是否合格。但該方法有不足，一是確認標本不合格后，信息反饋給臨床，患者再留取痰液標本，整個周期較長。二是涂片革蘭染色鏡檢過程比較復雜，影響工作效率。近年來, 許多學者將尿液分析用的白細胞酯酶試紙用于腹水[2-3]、腦脊液[4]、尿液[5]、陰道分泌物[6]、骨骼系統(tǒng)疾病相關分泌物[7]和關節(jié)液[8-9]等細菌感染的快速診斷，該試紙條通過檢測標本中白細胞酯酶而間接反映標本中白細胞數(shù)量,可在床旁操作,在1～2 min內即可得到結果。下呼吸道細菌感染，多形核白細胞(polymorphonuclearneutrophil,PMN)在病灶聚集而釋放大量白細胞酯酶，來自下呼吸道的合格痰液標本，含有白細胞酯酶。本研究通過對痰液標本白細胞酯酶檢測與傳統(tǒng)痰液涂片細胞計數(shù)兩種方法的比較,旨在探討簡便易行的評價細菌培養(yǎng)痰液標本質量的方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料 湖北民族學院附屬民大醫(yī)院2015年6月—2016年3月共4 571份細菌培養(yǎng)痰液標本, 分別來自不同的臨床科室?；颊吣挲g(53.4±20.2)歲，男∶女為2 635∶1 936。4 571份細菌培養(yǎng)痰液標本分為兩組，即臨床未篩檢組和臨床篩檢組，2015年6月至2015年10月2 068份痰液標本為臨床未篩檢組，2015年11月—2016年3月2 503份痰液標本為臨床篩檢組。臨床未篩檢組：臨床采集痰液標本后，不檢測白細胞酯酶，直接送檢驗科，再檢測白細胞酯酶和涂片細胞計數(shù)。臨床篩檢組：臨床采集痰液標本后，及時檢測白細胞酯酶，結果為陽性的直接送檢；若為陰性，則重新采集痰液標本，該組痰液標本在實驗室僅涂片細胞計數(shù)。

1.2 痰液涂片革蘭染色 痰液涂片干燥后，根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)，進行革蘭染色。在顯微鏡下觀察，計數(shù)多個低倍視野白細胞和上皮細胞數(shù)。根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)中《下呼吸道標本的處理》，多個低倍視野鱗狀上皮細胞<10個、白細胞>25個為合格痰液標本。

1.3 白細胞酯酶檢測 為避免不同廠家的干化學試紙條敏感性和特異性存在明顯差異，臨床未篩檢組同時應用桂林優(yōu)利特和長春迪瑞公司生產(chǎn)的尿干化學試紙條(包含白細胞酯酶檢測)檢測痰液白細胞酯酶；臨床篩檢組采用同一種試紙條檢測白細胞酯酶，白細胞酯酶陽性則視為合格痰液標本。操作方法和結果判斷均嚴格按照各自操作說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1兩種不同方法評價痰液標本質量比較 臨床未篩檢組2 068份痰液標本，在實驗室涂片細胞計數(shù)和檢測白細胞酯酶，兩種檢測方法比較差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.21，P>0.05)，見表1。

表1 痰液標本細胞計數(shù)和白細胞酯酶檢測結果

2.2 前后痰液標本合格率比較 臨床未篩檢組2 068份痰液標本，直接以傳統(tǒng)的細胞學計數(shù)為是否合格判斷依據(jù)。臨床篩檢組2 503份痰液標本，白細胞酯酶檢測為陽性視為合格，并送檢，再以細胞學計數(shù)進行評價。兩組差異有統(tǒng)計學意義(χ2=35.6，P<0.05)，見表3。

表3 兩組痰液標本合格率比較

3 討論

下呼吸道細菌感染是常見病、多發(fā)病，其診斷主要依賴于實驗室痰液細菌培養(yǎng)，培養(yǎng)出致病菌并發(fā)出鑒定和藥敏報告，指導臨床抗生素的使用。臨床采集合格的痰液標本是分離出致病菌的關鍵。當前，由于不熟悉標本采集要求，以及對患者宣教不到位等因素的影響[10]，全國各醫(yī)院實驗室都面臨痰液標本采集合格率很低下的情況，有報道從30.3%到34.0%[11]。有些患者的痰液標本就是唾液[10]，以至于不能分離培養(yǎng)出致病菌，嚴重影響了下呼吸道細菌感染患者的及時治療。傳統(tǒng)的方法評價痰液標本質量，采用的是涂片革蘭染色，鱗狀上皮細胞<10個/低倍視野、白細胞>25個/低倍視野的標本，視為合格標本。這種評價方法有諸多不便之處。

白細胞酯酶是PMN，即中性粒細胞釋放的羧酸酯酶，在發(fā)生炎癥時，多形核白細胞在病灶聚集而大量釋放白細胞酯酶。細菌及真菌、霉菌感染均可見明顯多形核白細胞。下呼吸道感染時，白細胞會明顯增加，并釋放出白細胞酯酶到痰液中。近年來，國內外廣泛將白細胞酯酶檢測應用于快速鑒別尿液、腦脊液、胸水、腹水和關節(jié)液等樣本細菌感染，說明在這些標本中，白細胞酯酶與細菌的相關性非常高。下呼吸道細菌感染，痰液含有大量病原菌，白細胞和白細胞酯酶的量也相應增多。本研究顯示，痰液白細胞酯酶檢測合格率與涂片細胞計數(shù)合格率有高度的符合性。在研究中，我們通過比較，不同廠家生產(chǎn)的白細胞酯酶試紙條，對痰液白細胞酯酶檢測結果沒有差異，這與其他人員研究一致[12]。

經(jīng)過統(tǒng)計，臨床未篩檢組和篩檢組的合格率有明顯區(qū)別。由此可以說明，采集患者痰液標本后檢測白細胞酯酶，結果可以作為評價痰液標本是否合格的依據(jù)。如果痰液標本不合格，可以指導患者按照采集要求，重新留取痰液，直到合格為止。這樣既符合分析前質量保證的要求，也為及時診斷和救治患者提供了保障。

痰液白細胞酯酶檢測，操作簡單、方便快捷，不需要借助任何設備。經(jīng)過簡單的培訓后，護理人員就能正確的操作和判斷，這為該技術的推廣提供了保證。同時，白細胞酯酶試紙條可以保存在室溫下，在有效期內使用就能確保檢測結果可靠。市場上，每份白細胞酯酶試紙條價格在1元左右，不會明顯增加痰液標本檢測的成本。因為白細胞酯酶檢測結果靠肉眼判斷，不同的操作人員的判斷結果可能有小的差異，但檢測結果在兩個及以上“+”時，這種差異就可以忽略不計。

綜上所述，白細胞酯酶檢測評價痰液標本質量，與傳統(tǒng)的痰液涂片革蘭染色細胞計數(shù)相比，簡便易行，有同樣的效果，適合在采集患者痰液標本后，及時評價是否合格，值得在臨床推廣使用。但痰液涂片革蘭染色細胞計數(shù)是經(jīng)典的方法，可以用來定期評價白細胞酯酶檢測結果是否有偏差；如果有試劑過期、試劑保存不當或操作人員沒有經(jīng)過培訓等異常情況，可以及時發(fā)現(xiàn)并糾正。

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責任編輯：牟冬生

Comparison of Leukocyte Esterase Test with Conventional Smear Cytological Examination for Evaluation of Sputum Specimens

Zhou Fawei,Yu Hong*

(TheBasicMedicalSciencesSchoolofWuhanUniversity,Wuhan430071,China)

Objective To compare Leukocyte Esterase test with conventional smear cytological examination for evaluation of sputum specimens and explore its clinical values.Methods 4571 sputum samples in the Affiliated Hospital of Hubei University for Nationalities (June 2015 to March 2016) were divided into two groups.The non-screening Group (2 068 sputum specimens) was gram-stained at the microbiological laboratory and examined for Leukocyte Esterase by two detection reagents.The screening Group (2 503 sputum specimens) was examined for Leukocyte Esterase.The positive specimens were sent to the laboratory.The negative specimens were collected again.The specimens′ qualities of the two groups were compared.Results The qualified rate of sputum specimens was 31.0% by conventional smear cytological examination and positive rate was 32.2% by Leukocyte Esterase test in the non-screening Group.There were no statistical differences between the two methods for evaluation of sputum specimens (P>0.05).The qualified rate of sputum specimens was 76% by conventional smear cytological examination in the screening Group.There were statistically significant differences between the two groups (P<0.05).Conclusions ①The Leukocyte Esterase test and conventional smear cytological examination have the same effects for evaluation of sputum specimens.②The Leukocyte Esterase test for evaluation of sputum specimens is simple, economic and effective,so it is worth to be widely applied.

leukocyte esterase;sputum;microscopy

周發(fā)為(1971- )，男，湖北鶴峰人，副主任技師，研究方向：細菌耐藥機制；*

R

A

1008-8164(2016)04-0045-03

2016-08-23