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        IL-12、IL-4、IL-8、轉化生長因子-β1及1,25-二羥基維生素D3在嬰幼兒喘息性支氣管炎表達水平及其臨床意義

        2016-12-22 00:59:25徐建輝黃祖輝
        貴州醫(yī)藥 2016年11期
        關鍵詞:支氣管炎嬰幼兒細胞因子

        徐建輝 黃祖輝

        (1.啟東市第六人民醫(yī)院小兒內科,江蘇 啟東 226211;2.啟東市人民醫(yī)院,江蘇 啟東 226200)

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        IL-12、IL-4、IL-8、轉化生長因子-β1及1,25-二羥基維生素D3在嬰幼兒喘息性支氣管炎表達水平及其臨床意義

        徐建輝1黃祖輝2

        (1.啟東市第六人民醫(yī)院小兒內科,江蘇 啟東 226211;2.啟東市人民醫(yī)院,江蘇 啟東 226200)

        目的 探討IL-12、IL-4、IL-8、轉化生長因子-β1及1,25-二羥基維生素D3在嬰幼兒喘息性支氣管炎表達水平及其臨床意義。方法 選取2013年1月至2015年1月于我院接受治療的40例喘息性支氣管炎患兒為研究對象,設為喘息組;選取同一時期來我院健康中心接受體檢的嬰幼兒40名為研究對象,設為對照組。檢測兩組嬰幼兒1,25-(OH)D3及TGF-β1、IL-4、IL-8、IL-12表達水平。比較兩組嬰幼兒的1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-4、IL-8、IL-12水平及其相互關系。結果 喘息組1,25-(OH)D3、TGF-β1明顯低于對照組(P<0.05);喘息組患兒IL-4、IL-8水平明顯高于對照組(P<0.05);喘息組IL-12水平明顯低于對照組(P<0.05);1,25-(OH)D3與TGF-β1呈正相關(r=0.749,P<0.05);1,25-(OH)D3與IL-12呈正相關(r=0.802,P<0.05);1,25-(OH)D3與IL-4呈負相關(r=-0.895,P<0.05);1,25-(OH)D3與IL-8呈負相關(r=-0.736,P<0.05)。結論 1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-12降低及IL-4、IL-8升高與嬰幼兒喘息型支氣管炎發(fā)病有關,檢測1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-12、IL-4、IL-8表達水平可作為判斷嬰幼兒喘息型支氣管炎的重要指標。

        IL-12; IL-4; IL-8; 轉化生長因子-β1; 1,25-二羥基維生素D3; 嬰幼兒喘息性支氣管炎

        喘息型支氣管炎是兒童常見的疾病之一,在兒童喘息性疾病中占有重要地位,近年來該病的發(fā)病率呈現逐年上升趨勢[1]。喘息型支氣管炎主要臨床表現是喘息,支氣管發(fā)生炎癥,表現為氣促、胸悶、咳嗽,而且夜間加重[2]。為了探討IL-12、IL-4、IL-8、轉化生長因子-β1(TGF-β1)及1,25-二羥基維生素D3[1,25-(OH)D3]在嬰幼兒喘息性支氣管炎表達水平及其臨床意義,我院嘗試開展本研究,并取得了不錯的效果,現報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2013年1月至2015年1月于我院接受治療的40例喘息性支氣管炎患兒為為觀察組。所有患兒均符合經過X線胸片檢查、影像學檢查等,符合喘息性支氣管炎診斷標準。排除:既往無心肺、肝腎等疾病,無過敏性疾病或其他變態(tài)反應性疾病,無免疫性疾病史和慢性疾病史。另選取同一時期于我院健康中心接受體檢的健康嬰幼兒40名為設為對照組,所有對象既往無心肺、肝腎等疾病,無過敏性疾病或其他變態(tài)反應性疾病,無免疫性疾病史和慢性疾病史。觀察組中,男16例,女24例,平均年齡(1.74±0.84)歲;對照組中,男15名,女25名,平均年齡(1.65±0.74)歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究方案報送醫(yī)療道德委員會批準,所有參與此次研究的嬰幼兒監(jiān)護人、醫(yī)生以及護理人員均簽署知情同意書。

        1.2 方法 于清晨7~9時,抽取所有嬰幼兒的空腹靜脈血5~10 mL,留取后在室溫中自然凝固。約1 h后進行離心操作(離心頻率為3 000 r/min),離心15 min后靜置分離取出血清,將其移至EP管中,置于-80 ℃環(huán)境下保存?zhèn)溆?,避免反復凍融。選用美國R&D公司生產的試劑盒,按照操作說明檢測EP管中待測的1,25-(OH)D3及TGF-β1、IL-4、IL-8、IL-12。首先,標準品的稀釋與加樣,然后溫育、配液、洗滌、加酶(除空白孔外每個孔加酶標試劑50 μL)、再溫育、再洗滌、顯色(37 ℃避光顯色15 min)、終止(加終止液50 μL)、測定、標準曲線的繪制。在吸光值450 nm波長依次測量各孔的吸光度(OD值),測定時間應在加終止液15 min以內進行,根據標準曲線計算得出結果。

        1.3 觀察指標 比較兩組嬰幼兒血清1,25-(OH)D3、TGF-β1水平。比較兩組嬰幼兒血清IL-4、IL-8、IL-12水平。

        2 結 果

        2.1 兩組嬰幼兒血清1,25-(OH)D3、TGF-β1水平比較 喘息組血清1,25-(OH)D3、TGF-β1分別為(28.93±7.30) pmol/L、(3.86±0.80) ng/mL,明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

        組別1,25?(OH)D3/(pmol/L)TGF?β1/(ng/mL)喘息組2893±730386±080對照組5320±978751±066t37141911P<005<005

        2.2 兩組嬰幼兒血清IL-4、IL-8、IL-12水平比較 喘息組患兒IL-4、IL-8分別為(97.20±28.25) pg/mL、(13.22±3.78) pg/mL,對照組為(9.37±4.30) pg/mL、(6.82±2.30) pg/mL,喘息組IL-4、IL-8水平明顯高于對照組(P<0.05);而喘息組IL-12為(42.25±7.10) pg/mL,對照組為(57.29±16.36) pg/mL,喘息組IL-12水平明顯低于對照組(P<0.05)。見表2。

        組別IL?4/(pg/mL)IL?8/(pg/mL)IL?12/(pg/mL)喘息組9720±28251322±3784225±710對照組937±430682±2305729±1636t973616421964P<005<005<005

        2.3 血清1,25-(OH)D3與TGF-β1、IL-4、IL-8、IL-12之間的相關性 血清1,25-(OH)D3與TGF-β1呈正相關(r=0.749,P<0.05);血清1,25-(OH)D3與IL-12呈正相關(r=0.802,P<0.05);血清1,25-(OH)D3與IL-4呈負相關(r=-0.895,P<0.05);血清1,25-(OH)D3與IL-8呈負相關(r=-0.736,P<0.05)。

        3 討 論

        喘息型支氣管炎是臨床上常見的小兒呼吸道疾病之一,主要是由于多種病毒和細菌感染引起,該病主要癥狀與哮喘相似,臨床表現為氣促、氣喘、呼吸困難等,都是呼吸道感染疾病,該病需要及時干預,如果未及時診斷干預,有可能轉化成小兒哮喘,嚴重影響兒童的健康和成長。

        IL-4是Th2分泌的主要因子,IL-4是Th2型最具有代表性的細胞因子,其主要作用包括刺激和活化B細胞,促進體液免疫應答,刺激Th0細胞增殖并進一步分化成Th2型細胞,此外IL-4還能有效促進IgE分泌型B細胞增殖和轉化,進而對嗜酸粒細胞發(fā)揮募集、趨化、浸潤等作用[3]。動物實驗[4]顯示,在小鼠哮喘模型中,與健康對照組相比,哮喘組血清IL-4明顯高于健康對照組。陳文靖等[5]研究發(fā)現,IL-4表達增強,可能與哮喘組織中的NF-κB的激活有關,而且是引起和促進哮喘炎癥反應的發(fā)生和發(fā)展的重要因素。研究[6]認為IL-4與嬰幼兒喘息性疾病的發(fā)生存在密切聯(lián)系。而IL-12對Th2型細胞因子具有抑制作用,它可以直接抑制Th2型細胞因子,促進Th0向Th1型細胞因子轉化,從而促進Th1型細胞因子產生,因此,有學者[7]認為IL-12是促進T輔助細胞向Th1型細胞因子分化的始動因素。有研究[8]顯示,IL-12在哮喘的發(fā)病過程中具有重要作用,其基因多態(tài)性和哮喘發(fā)病的危險指數具有相關性。動態(tài)監(jiān)測IL-12水平可以有效判斷支氣管哮喘病情的進展,可作為判斷支氣管哮喘的重要指標。

        IL-8的來源和較為廣泛,機體內多種免疫細胞及非免疫細胞均可以產生IL-8,在氣道中主要來源是肺泡巨噬細胞、支氣管上皮細胞、EOS及其他肥大細胞、成纖維細胞、內皮細胞等[9]。IL-8自身活性較強,而且半衰期長,可以作用于多種炎性細胞,發(fā)揮趨化作用,引起氣道炎癥和變態(tài)反應。其作用機制如下:IL-8可以通過激活PMN并誘導其脫顆粒,促進Ca2+濃度升高,形成氧自由基,進而誘導炎癥反應發(fā)生。IL-8還能在免疫應答中趨化和活化T淋巴細胞,調節(jié)淋巴細胞的再循環(huán),影響對抗原的識別和殺傷[10]。IL-8可以直接作用于氣道,誘導支氣管平滑肌痙攣,還可提高氣道上皮ICAM-1的表達,促進炎性細胞的粘附,此外它還能增加呼吸膜滲透性,被激活的PMN產生“呼吸爆發(fā)”,釋放O2、H2O2、OH-,促進氣道上皮剝脫,血管通透性增強,黏膜水腫。研究[10]認為,IL-8對于診斷兒童重癥肺炎具有重要意義。本研究中,喘息型支氣管炎患兒的IL-8水平明顯高于對照組,且IL-8與1,25-(OH)D3呈負相關。

        TGF-β1是一種具有雙源雙鏈25 ku多肽的細胞因子,可反映哮喘患者氣道炎癥和結構變化,而且其特異性較高。正常和轉化細胞分泌的TGF-β1的存在形式是活性前體,只有經過活化才具有活性。其主要功能是調節(jié)細胞生長和分化,參與組織的發(fā)育以及組織受到損害后的修復過程,此外,TGF-β1具有刺激纖維細胞生長和分泌膠原的作用。有研究[11]顯示,在哮喘患者中其水平會明顯升高,而且上皮細胞、平滑肌細胞、纖維母細胞都可以直接或間接通過TGF-β1參與氣道炎癥。而且活性Th2細胞可分泌細胞因子IL-13,IL-13可促使嗜酸性粒細胞浸潤、上皮細胞破壞,通過TGF-β1參與氣道重塑。本研究中1,25-(OH)D3與TGF-β1呈正相關,喘息組TGF-β1水平明顯低于對照組,提示TGF-β1與嬰幼兒喘息型支氣管炎有關。

        有報道[12]指出,維生素D對人體非常重要,具有免疫調節(jié)作用,它不僅是骨代謝及鈣穩(wěn)態(tài)的關鍵調控因子,還是第二類固醇激素。血清1,25-(OH)D3,是維生素D在人體循環(huán)中的重要形式,通過檢測血清1,25-(OH)D3水平,可以衡量機體維生素D水平,因此維生素D與1,25-(OH)D3具有密切聯(lián)系,在正常生理狀態(tài)時,血清1,25-(OH)D3可以分化介導單核細胞,并促進其成熟為吞噬細胞,從而用來維持人體正常的免疫功能。而機體一旦缺乏維生素D,血清1,25-(OH)D3水平會相應地發(fā)生變化,呈現明顯的下降趨勢,而且隨之而來的還會伴隨多種疾病。還有研究認為,維生素D缺乏與兒童哮喘具有重要關聯(lián),但該論斷還需進一步的證實。但已有研究[13]證實維生素D對于預防哮喘等過敏性反應具有重要作用。一項針對產婦維生素D水平的研究顯示,產婦妊娠時期機體內維生素D水平與兒童患喘息性疾病的發(fā)生率存在明顯正相關性。本研究結果為喘息組血清1,25-(OH)D3水平明顯低于正常對照組,提示喘息型支氣管炎可能與1,25-(OH)D3有關。

        本研究中,1,25-(OH)D3與TGF-β1、IL-12呈正相關,與IL-4、IL-8呈負相關,印證了上述1,25-(OH)D3與TGF-β1、IL-4、IL-8、IL-12在嬰幼兒喘息型支氣管炎中的表達水平變化。因此,1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-12降低及IL-4、IL-8升高與嬰幼兒喘息型支氣管炎發(fā)病有關,可以將1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-12、IL-4、IL-8表達水平作為判斷嬰幼兒喘息型支氣管炎的重要指標。

        [1] 林道炯.普米克令舒霧化吸入治療兒童哮喘的療效及對IL-1β和IL-12水平的影響[J].中國婦幼保健,2014,20(4):3273-3276.

        [2] 顏婷,孫萍,陳婷婷,等.IL-4、IFN-γ及LTE-4濃度在嬰幼兒喘息性疾病中的變化及其意義[J].第三軍醫(yī)大學學報,2012,18(7):1873-1876.

        [3] 宋穎芳,洪景芳,柳德靈,等.1,25-二羥維生素D-3對哮喘氣道重塑小鼠模型NF-κB信號通路的調控研究[J].中國藥理學通報,2012,12(9):1704-1708.

        [4] 趙熒,李玉梅,安彩霞,等.布地奈德對哮喘大鼠氣道重塑及支氣管肺泡灌洗液、肺組織中轉化生長因子-β1表達的影響[J].臨床兒科雜志,2010,2(8):173-177.

        [5] 陳文靖,楊琳紅,董亮,等.卡介苗多糖核酸通過抑制支氣管哮喘小鼠核因子κB影響支氣管肺泡灌洗液中細胞因子水平的研究[J].中華哮喘雜志:電子版,2009,3(3):9-13.

        [6] 姜彬,陳盛,王元.1,25-二羥維生素D3的免疫學作用及其臨床應用[J].現代免疫學,2010,1(2):85-88.

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        [13] 葛鑫,崔湧,丁炎,等.1,25-二羥基維生素D-3在小鼠肺臟液體清除中的作用[J].中國醫(yī)科大學學報,2015,8(6):679-681.

        xpression levels and its clinical significance of IL-12, IL-4, IL-8 and transforming growth factorβ1 and 1, 25-dihydroxy vitamin D3in infants and young children with asthmatic bronchitis

        XuJianhui1,HuangZuhui2.

        1.DepartmentofPediatrics,theSixthQidongCityPeople'sHospital,Qidong226211,China. 2.QidongCityPeople'sHospital,Qidong226200,China.

        Objective T o investigate the IL-12, IL-4, IL-8, transforming growth factor β1 and 1, 25-two hydroxy vitamins D3 expression and its clinical significance in infants with asthmatic bronchitis. Methods 40 cases of children with asthmatic bronchitis methods from January 2013 to January 2015 in our hospital as the research object, for the wheezing group selected from the same period, the health center of our hospital for medical examination of the infant 40 cases as the research object, as the control group. Two groups were detected with 1, 25- (OH) D3and TGF-β1, IL-4, IL-8, IL-12 expression levels were compared between the two groups of infants. Results 1, 25-(OH) D3, TGF-β1, IL-4, IL-8, IL-12 and the level of each other the results of the wheezing group 1, 25-(OH) D3, TGF-β1 was significantly lower than the control group (P<0.05). Children with wheezing group IL-4, IL-8 was significantly higher than control group (P<0.05); the level of IL-12 in wheezing group was significantly lower than the control group (P<0.05).1,25- (OH) D3and TGF-β1 positive (r=0 .749,P<0.05); 1,25-(OH) D3and IL-12 was positively correlated (r= 0.802,P<0.05); 1,25-(OH) D3and IL-4 was negative correlation (r=-0.895,P< 0.05); 1,25-(OH) D3and IL-8 showed a negative correlation (r=-0.736,P<0.05). Conclusion 1,25-(OH) D3and TGF-β1, IL-12 decreased and IL-4, IL-8 increased with the pathogenesis of Infantile Asthmatic Bronchitis, detection of 1,25-(OH) D3, TGF-β1, IL-12, IL-4 and IL-8 expression level can be an important indicator of the as judged Infantile Asthmatic Bronchitis.

        IL-12; IL-4; IL-8; Transforming growth factor β1; 1, 25-dihydroxy vitamin D3; Infants and young children with asthmatic bronchitis

        R725.6

        A

        1000-744X(2016)11-1138-03

        2016-08-23)

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