鄧 飛，張 睿，李 麗，張 毅，丁夢蝶，邱明雙

（四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041）

禽流感滅活疫苗免疫效果評價(jià)試驗(yàn)

鄧 飛，張 睿，李 麗，張 毅，丁夢蝶，邱明雙

（四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041）

隨機(jī)抽取6個(gè)廠家的重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-8株）和6個(gè)廠家的禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-6株+H9N2 Re-2株）進(jìn)行免疫效果評價(jià)試驗(yàn)。結(jié)果表明，二免后28d，H5亞型二價(jià)滅活疫苗組的免疫抗體合格率在95.24%以上；二價(jià)滅活疫苗組H5和H9亞型抗體合格率在94.74%以上，免疫效果較好。

禽流感；滅活疫苗；免疫效果

為了準(zhǔn)確評價(jià)重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-8株）及禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-6株+H9N2 Re-2株）的免疫效果，我們在四川省某規(guī)模化雞場開展了本試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 檢測試劑 禽流感病毒H5亞型血凝抑制抗原，批號：2016001；禽流感病毒H5亞型陽性血清，批號：2015011；禽流感病毒H9亞型血凝抑制抗原，批號：2016001；禽流感病毒H9亞型陽性血清，批號：2015001。試劑生產(chǎn)廠家：哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.1.2 試驗(yàn)用疫苗 隨機(jī)抽取6家疫苗企業(yè)的重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-8株），用A、B、C、D、E、F表示；6家疫苗企業(yè)的禽流感病毒二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-6株+H9N2 Re-2株），用G、H、I、J、K、L表示。各組疫苗均按使用說明嚴(yán)格保存，并在保質(zhì)期內(nèi)使用。

1.1.3 試驗(yàn)動(dòng)物 從某規(guī)模場選擇12日齡、同一品種、同一批次的雛雞360只作為試驗(yàn)雞。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)分組及免疫程序 將360只雛雞隨機(jī)分成12組，每組30只。按照疫苗說明書進(jìn)行免疫注射，12日齡時(shí)進(jìn)行首次免疫，首免后28d進(jìn)行二免。

1.2.2 血清樣品采集 分別在免疫前0 d、二免后28 d采血，無菌分離血清后-20℃保存。

1.2.3 抗體檢測 采用血凝抑制試驗(yàn)分別進(jìn)行H5和H9亞型禽流感抗體檢測，檢測方法按照國家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 18936-2003高致病性禽流感診斷技術(shù)》進(jìn)行。

1.2.4 結(jié)果判定 按照《2016年國家動(dòng)物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》，禽流感滅活疫苗免疫的家禽，HI抗體效價(jià)≥4log2為免疫合格個(gè)體，免疫合格個(gè)體數(shù)量占群體總數(shù)的70%（含）以上為免疫合格群體，檢測最高效價(jià)為10log2，高于10log2按10log2計(jì)算。

2 結(jié)果

2.1 重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗免疫抗體檢測結(jié)果 A、B、C、D、E、F 6組免疫前0d，僅D組有3份樣品的母源抗體效價(jià)≥4log2，A、B、C、F組各一份樣品的抗體效價(jià)≥4log2，其余均＜4log2；母源抗體合格率在0～10%之間。二免后28d，平均抗體效價(jià)均在8log2以上，抗體合格率除B組為95.24%外，其余5組均為100%（結(jié)果詳見表1）。

表1 重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗免疫抗體檢測結(jié)果

2.2 禽流感二價(jià)滅活疫苗免疫抗體檢測結(jié)果

2.2.1 H5亞型禽流感抗體檢測結(jié)果 G、H、I、J、K、L各組免疫前0d，G、J、K組分別僅有2份樣品的母源抗體效價(jià)≥4log2，H組有一份≥4log2，其余均＜4log2；母源抗體合格率在0～6.67%之間。二免后28d，平均抗體效價(jià)均在7log2以上，抗體合格率為94.74%～100.00%（結(jié)果詳見表2）。

2.2.2 H9亞型禽流感抗體檢測結(jié)果 G、H、I、J、K、L各組免疫前0d，僅H組母源抗體平均效價(jià)為5log2，抗體合格率為80%；其余5組母源抗體效價(jià)均＜4log2，抗體合格率在0～16.67%之間。二免后28d，平均抗體效價(jià)均在7log2以上，抗體合格率為94.74%～100.00%（結(jié)果詳見表3）。

表2 禽流感二價(jià)滅活疫苗H5亞型免疫抗體檢測結(jié)果

表3 禽流感二價(jià)滅活疫苗H9亞型免疫抗體檢測結(jié)果

3 結(jié)論

3.1 本試驗(yàn)?zāi)冈纯贵w檢測結(jié)果顯示，各試驗(yàn)組雛雞除H組H9亞型的抗體效價(jià)水平較高外，其余各組僅個(gè)別雞只母源抗體效價(jià)≥4log2，母源抗體效價(jià)普遍較低，表明本試驗(yàn)選擇的雛雞首免日齡（12日齡）是合適的。

3.2 二免后28 d，H5亞型禽流感抗體效價(jià)均較高，各組抗體合格率也高，免疫不合格個(gè)體為極少數(shù)，其可能原因不排除個(gè)體差異。試驗(yàn)結(jié)果表明12個(gè)廠家的疫苗對H5亞型禽流感的免疫效果均較好，能達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的要求。

3.3 低致病性禽流感H9亞型盡管死亡率較低，但能使產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋率由90%～95%急劇下降到20%[1]，同時(shí)禽流感病毒具有較高的變異性，往往造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，因此H9亞型的禽流感免疫也應(yīng)引起高度重視。本試驗(yàn)使用6個(gè)廠家的禽流感二價(jià)滅活疫苗進(jìn)行免疫，結(jié)果H9亞型免疫抗體效價(jià)與合格率均較高，免疫效果較好。

3.4 疫苗免疫程序、接種日齡、接種次數(shù)、間隔時(shí)間以及免疫操作規(guī)范性都會影響免疫效果。各養(yǎng)殖場應(yīng)根據(jù)本地流行毒株制定合適的免疫程序，規(guī)范免疫。同時(shí)，堅(jiān)持“養(yǎng)重于防、防重于治、綜合防治”的理念，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，做好定期監(jiān)測。

[1]王鑑.禽流感病毒疫苗免疫效果的分析[J].中國畜禽種業(yè)，2010（3）：148-150.

Immune Effect Evaluation of Avian Influenza Virus Inactivated Vaccine

DENG Fei，ZHANG Rui，LI Li，et al.
（Animal Disease Prevention and Control Center of Sichuan Province，Sichuan Chengdu 610041，China）

Immune effect of recombinant AIV H5 subtype bivalent inactivated vaccine（Re-6+Re-8）and AIV bivalent inactivated vaccine（H5N1 Re-6+H9N2 Re-2）which were selected from 6 manufacturers were evaluated in this paper.The results showed that the qualified rate of immune antibody in the H5 subtype bivalent inactivated vaccine group was above 95.24%，the qualified rate of H5 and H9 subtype antibody were above 94.74%in the bivalent inactivated vaccine group.The results indicated that the effect of inactivated vaccine was better.

Avian influenza；Inactivated vaccine；Immune effect

S851.347.201

B

1001-8964（2016）12-0021-02

2016-10-11

鄧 飛（1982-），女，四川成都人，碩士研究生獸醫(yī)師，從事動(dòng)物疫病防控工作。