胡廣衛(wèi) ， 沈艷麗 ， 趙全邦 ， 晁宜林 ， 闞 威 ， 周繼章 ， 馬睿麟 ， 蔡金山

(1.青海省動物疫病預(yù)防控制中心 ， 青海西寧810001 ； 2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 ， 甘肅蘭州730046)

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青海省部分地區(qū)牦牛流產(chǎn)原因初步調(diào)查

胡廣衛(wèi)1， 沈艷麗1， 趙全邦1， 晁宜林1， 闞 威1， 周繼章2， 馬睿麟1， 蔡金山1

(1.青海省動物疫病預(yù)防控制中心 ， 青海西寧810001 ； 2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 ， 甘肅蘭州730046)

為查明青海省部分地區(qū)牦牛流產(chǎn)的病因，用問卷調(diào)查的方法對4個縣(市)7個鄉(xiāng)的104個牧戶進(jìn)行了牦牛流產(chǎn)情況調(diào)查，流產(chǎn)率平均為21.39%；用虎紅平板試驗(yàn)和間接血凝試驗(yàn)對采自4個縣(市)的616份牦牛血清分別進(jìn)行了布魯菌病、衣原體病和弓形蟲病抗體檢側(cè)，陽性率分別為45.62%、68.34%和13.96%。結(jié)果表明，這些地區(qū)牦牛的流產(chǎn)與衣原體病和布魯菌病密切相關(guān)。

青海 ； 牦牛 ； 流產(chǎn)

青海省牦牛存欄量約570 萬頭，占世界牦牛的三分之一還要多。牦牛產(chǎn)業(yè)是牧區(qū)農(nóng)牧民賴以生存的物質(zhì)基礎(chǔ)和支柱產(chǎn)業(yè)，是高原牧區(qū)藏族同胞生產(chǎn)和生活物資的來源。近年來，據(jù)部分地區(qū)獸醫(yī)工作人員和牧民反映，牦牛的空懷率和流產(chǎn)率逐年升高，對畜牧業(yè)的健康發(fā)展造成了極大的影響。青海省多年來未對布魯菌病進(jìn)行詳細(xì)調(diào)查，而各地對動物衣原體病越來越重視，牦牛衣原體病的流行病學(xué)資料比較多[1，3，8]，個別縣(市)的陽性率也比較高。另外，家畜的流產(chǎn)也與弓形蟲病的感染有一定的關(guān)系。為了查清這些地區(qū)牦牛流產(chǎn)與布魯菌病、衣原體病和弓形蟲病的聯(lián)系，我們開展了相關(guān)動物疫病的流行病學(xué)調(diào)查。近期，農(nóng)業(yè)部將布魯菌病納入強(qiáng)制免疫動物疫病范圍后，有必要對牦牛衣原體病的情況進(jìn)行一些調(diào)查和研究，所以我們及時開展了牦牛衣原體滅活疫苗研究與推廣項(xiàng)目。在項(xiàng)目依托下，我們深入牧區(qū)牧戶，采取問卷調(diào)查和血清學(xué)調(diào)查的方式，對衣原體病、布魯菌病和弓形蟲病3種動物疫病進(jìn)行檢測，分析結(jié)果，提出防治建議。

1 材料與方法

1.1 入戶調(diào)查 以問卷調(diào)查的方式，共調(diào)查貴南、海晏、烏蘭和玉樹4 個縣(市)7 個鄉(xiāng)的104 個牧戶，調(diào)查內(nèi)容包括牦牛存欄數(shù)、母牛數(shù)、懷孕數(shù)、產(chǎn)仔數(shù)、流產(chǎn)數(shù)等。

1.2 血清來源 在貴南、海晏、烏蘭和玉樹4 個縣(市)入戶調(diào)查的同時，采集并分離牦牛血清，共采集616份牦牛血清。

1.3 材料 布魯菌病虎紅平板凝集抗原、陰性血清、陽性血清；弓形蟲IHA 抗原、陰性血清、陽性血清及稀釋液；衣原體抗原、陰性血清、陽性血清及稀釋液均由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所提供。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 布魯菌病 采集和分離后的血清，每份按30 μL滴加到玻璃板上，加入30 μL虎紅平板凝集抗原，混勻后3 min 觀察結(jié)果。當(dāng)出現(xiàn)肉眼可見的凝集顆粒時，判為陽性；無凝集的判為陰性。

1.4.2 衣原體病 在V型反應(yīng)板所有孔中加入稀釋液0.075 μL；第1 孔加入被檢血清0.025 μL，呈4 倍遞增稀釋3 孔。第3 孔棄去0.025 μL，同時設(shè)陰、陽性和空白對照各2 孔；每孔加入抗原0.025 μL，置振蕩器上震蕩2 min，蓋上玻璃板在37 ℃恒溫箱中作用2 h 判定結(jié)果。要求陽性對照孔各稀釋度完全凝集，陰性、空白對照孔不發(fā)生凝集，則試驗(yàn)成立；被檢血清第2 孔(1∶16)出現(xiàn)“++”及以上凝集者為陽性；1∶4孔出現(xiàn)“+”及以下凝集者為陰性；1∶4 孔出現(xiàn)“++”至1∶16 孔出現(xiàn)“+”以下者為可疑。

1.4.3 弓形蟲病 反應(yīng)在96 孔V 型微量有機(jī)玻璃反應(yīng)板上進(jìn)行，設(shè)陰陽性對照孔，每孔加75 μL稀釋液和被檢樣品、陰性、陽性血清25 μL，稀釋至第3 孔。每孔加25 μL 診斷抗原，之后將反應(yīng)板置于微量振蕩器上1～2 min，蓋上一塊玻璃板以防落入灰塵，置37 ℃下作用2～3 h 后，進(jìn)行結(jié)果判定。陽性對照血清各孔均為凝集(+)，陰性對照血清除第l孔允許存在前滯現(xiàn)象(+)外，其余各孔均不能出現(xiàn)凝集(-)，被檢血清抗體滴度達(dá)到1∶64判為陽性，50%凝集(++)為陽性終點(diǎn)。

2 結(jié)果

入戶問卷調(diào)查結(jié)果顯示，牦牛流產(chǎn)率從高到低分別是玉樹市32.19%、海晏縣31.26%、貴南縣19.30%、烏蘭縣16.51%，平均為21.39%，見表1。實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果顯示，牦牛衣原體病血清學(xué)陽性率從高到低分別是海晏縣88.89%、貴南縣74.29%、玉樹市42.22%、烏蘭縣39.45%，平均為68.34%；牦牛布魯菌病血清學(xué)陽性率從高到低分別是海晏縣55.56%、玉樹市53.33%、烏蘭縣44.95%、貴南縣32.86%，平均為45.62%；牦牛弓形蟲病血清學(xué)陽性率從高到低分別是烏蘭縣20.18%、貴南縣 15.71%、海晏縣 13.53%、玉樹市3.33%，平均為13.96%，見表2。除了弓形蟲病的血清學(xué)陽性率較低外，布魯菌病和衣原體病的陽性率均比較高。

3 討論

本次牦牛流產(chǎn)的調(diào)查是在問卷調(diào)查的基礎(chǔ)上，以血清學(xué)監(jiān)測為主進(jìn)行的。從問卷調(diào)查結(jié)果來看，4縣(市)牦牛流產(chǎn)率為16.51%～32.19%，平均 21.39%，比侯生庫等[2]的調(diào)查結(jié)果要高；相對應(yīng)的，血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，衣原體病、布魯菌病和弓形蟲病的陽性率分別為68.34%、45.62% 和13.96%，相對于馬怡雋[1]和張立成等[3]開展的衣原體病血清學(xué)調(diào)查、王云平[4]和趙啟明等[5]進(jìn)行的布魯菌病調(diào)查、李曉卉[6]和陳世堂等[7]進(jìn)行的弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查結(jié)果來說，陽性率高出很多。這與問卷調(diào)查和血清學(xué)調(diào)查都集中在牦牛發(fā)生流產(chǎn)情況比較嚴(yán)重的牧戶中進(jìn)行有關(guān)，但也說明了這些地區(qū)牦牛比較嚴(yán)重，同時與多種動物疫病有關(guān)。

表1 2014-2015年貴南、海晏、烏蘭和玉樹

表2 2014-2015年貴南、海晏、烏蘭和玉樹4縣(市)

血清學(xué)監(jiān)測結(jié)果中，貴南、海晏、烏蘭和玉樹4 縣(市)牦牛衣原體病陽性率分別為74.29%、88.89%、39.45%和42.22%，處在較高的水平，特別是牦牛衣原體滅活疫苗研究與推廣項(xiàng)目的試點(diǎn)縣貴南和海晏，陽性率在80%左右。周繼章等[8]報(bào)道了用間接血凝試驗(yàn)對采自青海的牦牛血清檢測衣原體抗體，結(jié)果平均陽性檢出率為18.7%。馬怡雋等[1]報(bào)道了用正向間接血凝試驗(yàn)對全省227 份牛血清進(jìn)行了檢測，平均陽性率為26.4%。張立成等[3]報(bào)道了用正向間接血凝試驗(yàn)對全省506 份牛血清進(jìn)行了檢測，平均陽性率為36.8%。本次調(diào)查平均陽性率為68.34%，由此可見，近些年來青海省牦牛衣原體病的陽性率呈逐年上升的趨勢。從入戶調(diào)查的結(jié)果來看，4 縣(市)的牦牛流產(chǎn)率也比較高，除玉樹外，貴南、海晏和烏蘭牦牛流產(chǎn)率與衣原體病血清學(xué)陽性率呈正相關(guān)，說明這幾個地區(qū)牦牛的流產(chǎn)與衣原體病的感染有很大關(guān)系。

近些年，我國人間和畜間的布魯菌病感染率逐年上升，過去有布魯菌病流行的省區(qū)皆出現(xiàn)了疫情反彈，東北和西北的近10個省區(qū)尤為突出[9-10]。本次調(diào)查的牦牛布魯菌病血清學(xué)陽性率從高到低分別為海晏縣55.56%、玉樹市53.33%、烏蘭縣44.95%、貴南縣32.86%，4縣(市)陽性率均比較高，這也說明了這些地區(qū)牦牛的流產(chǎn)除了與衣原體病相關(guān)之外，還與布魯菌病有著密切的關(guān)系。李桂蘭等[11]在青海省天峻縣和祁連縣進(jìn)行牛羊布魯菌病感染情況的調(diào)查，祁連縣牦牛陽性率為7.49%，母牛流產(chǎn)在5%～7%之間；天峻縣牦牛陽性率為13.13%，牛的流產(chǎn)率在2%，流產(chǎn)率較往年有所上升。黃文明等[12]進(jìn)行了青海省牛布魯菌病血清學(xué)調(diào)查，陽性率為3.51%。本次調(diào)查的結(jié)果相比于以上數(shù)據(jù)，陽性率都比較高，說明這些地區(qū)牦牛布魯菌病嚴(yán)重流行。

弓形蟲病對動物繁殖的影響較大，我國牛弓形蟲病的感染率在2.41%～67.46%[13]。據(jù)蔡進(jìn)忠等[14]的調(diào)查，青海省牦牛弓形蟲病陽性率平均為8.03%，各地高低不一。另據(jù)傅義娟[15]的調(diào)查，青海省牛弓形蟲病陽性率平均為12.67%。本次調(diào)查的結(jié)果平均為13.96%，與歷史數(shù)據(jù)較為相近。

青海省牦牛數(shù)量眾多，牦牛在農(nóng)牧民的生產(chǎn)生活中占有十分重要的地位。牦牛的流產(chǎn)給農(nóng)牧民的生產(chǎn)和增收造成了巨大的損失，降低牦牛的流產(chǎn)率是我們動物防疫部門迫切需要解決的問題。綜合3種動物疫病的調(diào)查結(jié)果，布魯菌病和衣原體病陽性率較高，相對應(yīng)的，牧戶牦牛的流產(chǎn)率也較高，說明這兩種病是導(dǎo)致牦牛流產(chǎn)的主要原因；而弓形蟲病感染率相對不高，對牦牛流產(chǎn)的影響不如前兩種疫病。近年來，國家對家畜布魯菌病的防治比較重視，已經(jīng)把布魯菌病的免疫納入強(qiáng)制免疫計(jì)劃；而無論是畜牧獸醫(yī)機(jī)構(gòu)，還是牧戶，對家畜衣原體病的認(rèn)識和重視程度均不高。所以，對家畜衣原體病的防治顯得尤為重要。我們開展的牦牛衣原體滅活疫苗研究與推廣項(xiàng)目以此為出發(fā)點(diǎn)，在前期充分進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上，采集了流產(chǎn)牦牛的胎盤和流產(chǎn)胎兒，分離純化病原并研制疫苗，為有效的防控牦牛衣原體病，降低牦牛流產(chǎn)率打下了基礎(chǔ)。

[1] 馬怡雋.青海省畜禽衣原體病的血清學(xué)調(diào)查[J].中國獸醫(yī)科學(xué)，2013，43(02)：213-215.

[2] 侯生庫，謝仲秀.牦牛地方性流產(chǎn)的病因?qū)W調(diào)查[J].畜牧與獸醫(yī)，2012，03：109-110.

[3] 張立成，王謝忠，張茂華，等.青海省牲畜衣原體病血清學(xué)監(jiān)測[J].中國獸醫(yī)雜志，2014，50(4)：38-39.

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[11] 李桂蘭，趙啟明.青海省祁連、天峻地區(qū)牛羊布魯菌病現(xiàn)狀調(diào)查[J].中國動物檢疫，2011，28(06)：57-58.

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[15] 傅義娟.青海省豬牛羊弓形蟲病的血清抗體檢測[J].中國獸醫(yī)科技，2003，33(9)：69-70.

Preliminary investigation on Abortion of Yaks in part of Qinghai Province

HU Guang-wei1， SHEN Yan-li1， ZHAO Quan-bang1， CHAO Yi-lin1，KAN Wei1， ZHOU Ji-zhang2， MA Rui-lin1， CAI Jin-shan1

(1.Qinghai Animal Disease Control Center，Xining 810001，China；2.Lanzhou Veterinary Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology，Lanzhou 730046，China)

In order to find out the reason on abortion of Yaks in part of Qinghai Province，the rates of abortion of yaks from 104 farmers of 7 townships and 4 counties were investigated.The average abortion rate was 21.39%.Chlamydiosis，brucellosis and toxoplasmosis in yaks were examined by rose bengal plate test and indirect hemagglutination assay，and the positive rates were 45.62%，68.34% and 13.96%，respectively.The results show that abortion of yaks in these regions is related to chlamydiosis and brucellosis.

Qinghai ； yak ； abortion

CAI Jin-shan

2016-03-02

青海省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣計(jì)劃(2014-N K-532)

胡廣衛(wèi)(1982-)，男，獸醫(yī)師，碩士，從事動物疫病防控工作，E-mail：qhhgw@sina.com

蔡金山，E-mail：cjsheyf@163.com

S823.8+5

A

0529-6005(2016)10-0003-03