朱 航，周小毛?

（湖南省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410125）

田間小菜蛾對(duì)9種殺蟲劑的抗藥性測(cè)定

朱 航，周小毛

（湖南省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410125）

在室內(nèi)采用浸葉法測(cè)定湖南3個(gè)蔬菜產(chǎn)區(qū)（長(zhǎng)沙市長(zhǎng)沙縣、株洲市茶陵縣和永州市祁陽(yáng)縣）的田間小菜蛾對(duì)9種藥劑的抗藥性。試驗(yàn)結(jié)果表明，小菜蛾對(duì)高效氯氰菊酯抗性達(dá)到極高水，對(duì)定蟲隆、阿維菌素和茚蟲威抗性屬于高抗水平，對(duì)溴蟲腈, 甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和多殺菌素屬于中抗水平，對(duì)氯蟲苯甲酰胺和蘇云金桿菌相對(duì)敏感。因此，這3個(gè)地區(qū)的小菜蛾防治應(yīng)該減少溴蟲腈、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和多殺菌素的使用，交替使用氯蟲苯甲酰胺和蘇云金桿菌，停止阿維菌素、茚蟲威、高效氯氟氰菊酯的使用，以便延緩抗藥性的產(chǎn)生與發(fā)展。

小菜蛾；殺蟲藥劑；抗藥性監(jiān)測(cè)

小菜蛾（Plutella xylostella）屬于鱗翅目夜蛾科，是一種危害十字花科蔬菜的世界性的農(nóng)業(yè)害蟲[1]。防治小菜蛾的最有效的方法是使用殺蟲劑，但是由于頻繁用藥和小菜蛾的本身世代周期短、繁殖快的特點(diǎn)導(dǎo)致小菜蛾抗藥性發(fā)展得越發(fā)嚴(yán)重[2-3]。目前我國(guó)小菜蛾已經(jīng)對(duì)90%以上的殺蟲劑都產(chǎn)生了不同程度的抗性，已經(jīng)成為抗藥性最為嚴(yán)重和最難防治害蟲之一[4]。

自Ankersmit[5]首次報(bào)道印度尼西亞爪哇島的小菜蛾種群對(duì)DDT產(chǎn)生抗性以來(lái)，隨后在東南亞各國(guó)、中國(guó)臺(tái)灣、日本、美國(guó)等國(guó)家和地區(qū)先后報(bào)道了小菜蛾對(duì)各種殺蟲劑產(chǎn)生了不同程度的抗性[6-9]。近年來(lái)湖南地區(qū)小菜蛾的危害日益嚴(yán)重，試驗(yàn)利用小菜蛾敏感品系，采用浸葉法先建立了小菜蛾對(duì)阿維菌素、茚蟲威、溴蟲腈、高效氯氟氰菊酯等7種殺蟲劑的敏感毒力基線。并在此基礎(chǔ)上測(cè)定了2014年湖南部分地區(qū)小菜蛾田間種群的抗性水平，旨在準(zhǔn)確掌握該地區(qū)小菜蛾的抗性現(xiàn)狀，以便及時(shí)提出合理化建議，為田間科學(xué)合理施藥以及抗性治理提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1供試?yán)ハx

小菜蛾敏感品系：由湖南省植物保護(hù)研究所提供，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用甘藍(lán)和蘿卜苗飼養(yǎng)，不接觸任何殺蟲劑。

小菜蛾田間種群：分別采自湖南省長(zhǎng)沙縣、株洲茶陵縣和永州祁陽(yáng)縣的十字花科蔬菜上。采集3～4齡的小菜蛾幼蟲在室內(nèi)飼養(yǎng)一代，然后挑選蟲體大小基本一致的3齡幼蟲供室內(nèi)生物測(cè)定用。

1.2供試?yán)ハx的飼養(yǎng)

從長(zhǎng)沙縣、茶陵縣和祁陽(yáng)縣采集的小菜蛾田間種群在室內(nèi)人工氣候箱種用甘藍(lán)和蘿卜苗飼養(yǎng)至化蛹，然后將蛹轉(zhuǎn)移到養(yǎng)蟲籠中待其羽化，在籠中懸掛沾有15%蜂蜜水的脫脂棉球供小菜蛾成蟲取食，并定期更換新的脫脂棉球，在籠內(nèi)放置方形蠟紙供其產(chǎn)卵，每天將產(chǎn)有卵的蠟紙轉(zhuǎn)移到放有甘藍(lán)葉的養(yǎng)蟲缸內(nèi)待其孵化，全程置于人工氣候箱內(nèi)，飼養(yǎng)條件：溫度（25±1）℃，相對(duì)濕度60%～70%，光照條件L/D=16h/8 h。

1.3供試藥劑

97.2%阿維菌素（abamectin，河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司）；97 % 茚蟲威（indoxacarb）美國(guó)杜邦公司；95.3%氯蟲苯甲酰胺（chlorantraniliprole，上海悅聯(lián)化工有限公司）；95%高效氯氟氰菊酯（Beta-Cypermethrin，江蘇揚(yáng)農(nóng)化工集團(tuán)有限公司）；97%定蟲隆（chlorfuazuron，石家莊濟(jì)泰三沐化工有限公司）；90%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（emamectin benzoate，河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司）；16 000 IU/mg 蘇云金桿菌粉劑（bacillus thuringiensis，揚(yáng)州綠源生物化工有限公司）；90%多殺菌素（spinosad，美國(guó)陶氏公司）；94.5% 溴蟲腈[chlorfenapyr，巴斯夫（中國(guó)）有限公司]。

1.4測(cè)定方法

參照 Tabashnik 和 Cushing[10]提出的葉片浸漬飼喂法，對(duì)小菜蛾3齡幼蟲進(jìn)行毒力測(cè)定。根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果，先用0.1% Triton X-100 溶液等比級(jí)數(shù)稀釋藥劑，順次配制5個(gè)系列濃度，以清水作為對(duì)照。將新鮮潔凈的甘藍(lán)葉（避開主脈）用打孔器制成直徑為6.5 cm的圓形葉片。將葉片在系列濃度的藥液中浸漬10 s，擱置于平板上自然風(fēng)干后放置在事先墊有潤(rùn)濕的濾紙的培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿中接入10頭小菜蛾試蟲，每個(gè)處理4次重復(fù)。將培養(yǎng)皿置于溫度為(25±1)℃，相對(duì)濕度60%～70%，光周期L∶D=16∶8的人工氣候箱中，飼養(yǎng)條件同1.2放置48 h后檢查試蟲的死亡情況，用毛筆尖輕觸蟲體，不動(dòng)者是為死亡。室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果用DPS軟件進(jìn)行分析處理。

2　結(jié)果與分析

2.1小菜蛾對(duì)9種殺蟲劑的敏感毒力基線

采用浸葉法建立了小菜蛾敏感品系3齡幼蟲敏感獨(dú)立基線，從表中的結(jié)果得知，小菜蛾的敏感品系對(duì)不同的殺蟲劑的敏感性不同，對(duì)阿維菌素的敏感性最高，LC50僅為0.033 mg/L，對(duì)高效氯氟氰菊酯的敏感性最低，LC50為3.282 mg/L。敏感性由高到低依次為阿維菌素＞多殺菌素＞甲維鹽＞茚蟲威＞蘇云金桿菌＞氯蟲苯甲酰胺＞定蟲?。句逑x腈＞高效氯氟氰菊酯。

2.2小菜蛾對(duì)9種藥劑的抗藥性監(jiān)測(cè)

從調(diào)查結(jié)果（表2）可以看出相對(duì)于敏感種群，湖南3個(gè)地區(qū)小菜蛾田間種群對(duì)9種殺蟲劑的抗藥性差異較大，其中對(duì)高效氯氟氰菊酯（RR=108.7～207.9）的抗性水平最高，長(zhǎng)沙地區(qū)達(dá)到了極高水平抗性，對(duì)阿維菌素（RR=57.6～95.0）、茚蟲威（RR=71.2～91.2）、定蟲?。≧R=40.6～53.0）表現(xiàn)為高等水平抗性，對(duì)溴蟲腈（RR=21.2～25.6）、甲維鹽（RR=21.4～31.6）、多殺菌素（RR=15.2～27.3）表現(xiàn)為中等水平抗性，對(duì)氯蟲苯甲酰胺（RR=4.4～7.9）、蘇云金桿菌（RR=5.3～10.5）主要表現(xiàn)為低水平抗性。

表1　小菜蛾敏感種群對(duì)9種藥劑的敏感基線

圖2　湖南部分地區(qū)小菜蛾田間種群對(duì)9種殺蟲劑的抗性水平監(jiān)測(cè)

3　討 論

試驗(yàn)選用9種在田間小菜蛾防治過(guò)程中應(yīng)用廣泛的藥劑，對(duì)2015年湖南省長(zhǎng)沙、茶陵和祁陽(yáng)3個(gè)縣的小菜蛾田間種群進(jìn)行了抗藥性監(jiān)測(cè)，隨著阿維菌素和茚蟲威推廣使用的時(shí)間越來(lái)越長(zhǎng)，它們的復(fù)配制劑大量、頻繁的使用，其防治效果明顯下降，害蟲的抗性水平不斷提高。黃雄英等[11]的研究表明2006年長(zhǎng)沙地區(qū)小菜蛾對(duì)阿維菌素、茚蟲威的抗藥性倍數(shù)僅為18.2、11.7倍，而試驗(yàn)中長(zhǎng)沙地區(qū)小菜蛾對(duì)阿維菌素和茚蟲威的抗藥性倍數(shù)達(dá)到了95倍和108.5倍。高效氯氟氰菊酯表現(xiàn)為高水平至極高水平抗性，說(shuō)明阿維菌素、茚蟲威和高效氯氟氰菊酯這3種藥劑已經(jīng)不適合繼續(xù)作為這3個(gè)縣小菜蛾防治的主要藥劑。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)3個(gè)縣對(duì)溴蟲腈、甲維鹽和定蟲隆表現(xiàn)為中等水平抗性，應(yīng)當(dāng)適當(dāng)?shù)慕档瓦@3種藥的使用頻率，減少其使用量。氯蟲苯甲酰胺屬于鄰酰胺基苯甲酰胺類殺蟲劑，其作用位點(diǎn)是魚尼丁受體，通過(guò)活化魚尼丁受體來(lái)到達(dá)殺蟲的目的[12-13]，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小菜蛾田間種群對(duì)該藥較為敏感，因此氯蟲苯甲酰胺可以作為長(zhǎng)沙、茶陵和祁陽(yáng)縣小菜蛾防治的主要藥劑之一。此外，試驗(yàn)結(jié)果還表明微生物源低毒殺蟲劑——蘇云金桿菌表現(xiàn)出低水平抗性，所以這兩種藥劑可以在3個(gè)縣輪換使用。研究還發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)沙地區(qū)小菜蛾的抗藥性水平普遍高于其他兩個(gè)地方，這可能是因?yàn)殚L(zhǎng)沙地區(qū)屬于湖南的平原地帶，因?yàn)橛辛己玫慕?jīng)濟(jì)效益，該地區(qū)的十字花科蔬菜的復(fù)種指數(shù)較高，這種連續(xù)性的種植十字花科蔬菜導(dǎo)致了小菜蛾有著豐富的寄主植物，有利于其種群繁殖，致使農(nóng)民使用化學(xué)農(nóng)藥防治的次數(shù)相對(duì)更多，所以該地區(qū)的表現(xiàn)出相對(duì)較高的抗性水平。

表2　湖南部分地區(qū)小菜蛾田間種群對(duì)9種殺蟲劑的抗性水平

目前，小菜蛾的抗藥性發(fā)展越來(lái)越快，抗藥性的治理也越發(fā)困難，因此應(yīng)該做好小菜蛾的抗藥性監(jiān)測(cè)。因地制宜，根據(jù)不同地區(qū)小菜蛾抗性監(jiān)測(cè)結(jié)果交替輪換使用敏感，低抗藥劑、合理混用和使用增效劑等手段，并結(jié)合農(nóng)業(yè)防治、生態(tài)防治、生物防治等措施，在減緩抗藥性的發(fā)展速度的同時(shí)提高防治效果。

[1]Sarfraz R M，Dosdall L M，Keddie A B，et al．Larval survival，host plant preferences and developmental responses of the diamondback moth Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) on wild brassicaceous species[J]．Entomological Science，2011，14（1）：20-30．

[2]梁 沛，高希武，鄭炳宗，等．小菜蛾對(duì)阿維菌素的抗性機(jī)制及交互抗性研究[J]農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2001，3（1）：41-45．

[3]Zalucki M P，F(xiàn)urlong M J．Predicting outbreaks of a migratory pest: an analysis of DBM distribution and abundance revisited[A].Srinivasan R，Shelton A M，Collins H L．Management of the diamondback moth and other crucifer insect pests：proceedings of the sixth international workshop[A].AVRDC The World Vegetable Center，Shanhua，Taiwan.2011：8-14．

[4]白 濱，劉敏艷．3 種生物殺蟲劑防治蔬菜害蟲試驗(yàn)研究[J]．甘肅農(nóng)業(yè)科技，2003，（3）：51-53．

[5]Ankersmit G W．DDT-resistance in Plutella maculip ennis(curt.)(Lep.) in Java[J]．B.EntomolRes，1953，44（3）：421- 425．

[6]Barroga S F．A survey of diamondback moth population for resistance to the insecticides in the Philippines [D]．Los Banos:Univ Philippines，1974.117．

[7]The Sixth International Workshop on Management of the Diamondback Moth and Other Crucifer Insect Pests[M].AVRDCWorldVegetableCenter, 2011.

[8]Altmann J A．An investigation of resistance in cabbage moth (Plutellaxylostella L.) to pyrethroids in the Lockyer Valley[J]．Graduate Diploma, Queensland Agricultural College，1988．

[9]Hama H .Insecticide resistance characteristic of the diamondback moth [C].Talekared NS．Management of the diamondback moth and other crucifer pests．Proceedings of the Second International Work shop，1992：455-463．

[10]Tabashnik B E，Cushing N L，Johnson M W．Diamondback moth (Lepidoptera: Plutellidae) resistance to insecticides in Hawaii: intra-island variation and cross-resistance[J]．Journal of Economic Entomology， 1987，80（6）：1091-1099．

[11]黃雄英，周小毛，柏連陽(yáng).長(zhǎng)沙地區(qū)小菜蛾對(duì)13種藥劑的抗藥性測(cè)定.植物保護(hù)，2008，34（5）：146-149．

[12]孫麗娜，閆曉靜，芮昌輝.以昆蟲魚尼丁受體為靶標(biāo)的化合物活性篩選方法研究進(jìn)展[J]．農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2010，12（4）：402-407．

[13]張一賓．魚尼汀受體抑制劑類殺蟲劑的研發(fā)現(xiàn)況[J].世界農(nóng)藥，2008，30（1）：1-8．

（責(zé)任編輯：肖 亮）

Determination?of?Plutella xylostella?(L.)Resistance?to?Nine?Insecticides?in?Field?Populations

ZHU Hang，ZHOU Xiao-mao
（Hunan Agricultural Biotechnology Research Center, Changsha 410125, PCR）

The resistance of field population of Plutella xylostella to nine insecticides in three production areas of vegetables (Changsha Country of Changsha City, Chaling Country of Zhuzhou City and Qiyang Country of Yongzhou City) in Hunan province was determined by leaf-dip method under experimental conditions.The results showed that the P.xylostella have an extremely high level of resistance to beta-cypermethrin and high level of resistance to Chlorfluazuron, abamectin and indoxacarb.Mean while it have moderate level of resistance to spinosad,chlorfenapyr and emamectin benzoate and remain a relatively high level of sensitivity to chlorantraniliprole and bacillus thuringiensis(Bt).Therefore, the prevention of Plutella xylostella would focus on the alternative use of spinosad,chlorfenapyr, emamectin, chlorantraniliprole and bacillus thuringiensis.what’s more, we must stop using beta-cypermethrin so as to delay the generation and development of resistance to insecticides.

Plutella xylostella; insecticide; drug resistance determination

S572

A

1006-060X（2016）11-0049-03

10.16498/j.cnki.hnnykx.2016.011.015

2016-08-17

國(guó)家自然科學(xué)基金（31371966）

朱 航（1990-），男，湖南益陽(yáng)市人，研究實(shí)習(xí)員，主要從事農(nóng)藥毒理學(xué)及害蟲抗藥性相關(guān)研究。

周小毛