王 敏 ，王麗萍 ，高 俊 ，王燕春 ，張廣和 ，徐彥玲 ，韓天龍

（1.赤峰市農(nóng)牧科學(xué)研究院，內(nèi)蒙古赤峰 024031；2.吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，吉林長春 130062；3.赤峰市農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全管理站，內(nèi)蒙古赤峰 024000；4.林西縣農(nóng)牧業(yè)局，內(nèi)蒙古赤峰 025250）

噬線蟲真菌是指寄生、捕捉、定殖和毒害線蟲的一類真菌。線蟲病是線蟲寄生于動植物及人體內(nèi)引起的一種寄生蟲病，呈世界性分布，給種養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。到目前為止，國內(nèi)外對線蟲病的防治還是主要依靠藥物。近年來，線蟲的抗藥性不斷增強，而且其流行有越來越嚴重的趨勢。吳國濤[1]應(yīng)用敵百蟲、四咪唑、丙硫咪唑、蟲克星4種藥物進行消化道驅(qū)蟲試驗，結(jié)果表明除蟲克星外，蟲體已經(jīng)對敵百蟲等藥物產(chǎn)生了嚴重抗藥性。驅(qū)蟲藥的使用造成了動植物產(chǎn)品中的藥物殘留、環(huán)境污染及生態(tài)平衡破壞等問題。隨著人們生活水平的提高，人們對食品安全的關(guān)注日益加強，對食品中的藥物殘留控制也越來越嚴格。鑒于此，噬線蟲真菌作為一種安全、使用方便、無殘留無污染的新型防治線蟲方法，受到了越來越多的人關(guān)注。

1 噬線蟲真菌的作用機理

到目前為止，全世界共報道有700多種噬線蟲真菌。根據(jù)真菌對線蟲作用方式的不同將其分為：捕食 線 蟲 真 菌 （Trapping fungi）、 內(nèi) 寄 生 真 菌（Endoparasitic fungi）、機會真菌（Opportunistic fungi）和產(chǎn)毒真菌（Toxic fungi）[2]。噬線蟲真菌對線蟲的作用方式分為：捕捉、內(nèi)寄生、定殖、分泌毒素4種類型。

1.1 捕捉

有些真菌能夠產(chǎn)生各種捕捉器來捕捉線蟲，稱為捕食線蟲真菌。根據(jù)捕捉器的不同，又分為粘著性捕捉器真菌和環(huán)狀捕捉器真菌2類[3]。

粘著性捕捉器真菌，可產(chǎn)生粘著性菌絲、粘著性菌絲分枝、簡單粘著網(wǎng)、立體粘著網(wǎng)和粘著球，5種類型的粘著性捕捉器。粘著性捕捉器分泌粘液，將與之接觸的線蟲緊緊粘住，菌絲穿透線蟲表皮，侵入蟲體，吸收線蟲體內(nèi)的物質(zhì)，使線蟲死亡。

環(huán)狀捕捉器真菌，可產(chǎn)生收縮性捕環(huán)和非收縮性捕環(huán)，2種類型的環(huán)狀捕捉器。環(huán)狀捕捉器將進入環(huán)內(nèi)的線蟲緊緊套住，菌絲通過機械和酶的作用，侵入線蟲體內(nèi)并吸收其內(nèi)含物，使線蟲死亡。

1.2 內(nèi)寄生

內(nèi)寄生真菌產(chǎn)生各種孢子，孢子通過線蟲體表、生殖孔、排泄孔、口腔等侵入線蟲體，在蟲體內(nèi)大量繁殖致線蟲死亡。有些內(nèi)寄生真菌還能寄生線蟲的卵，線蟲卵被寄生后，內(nèi)含物完全被菌絲取代[4]。

1.3 定殖

有些真菌能定殖于胞囊線蟲上，通過吸收胞囊內(nèi)的營養(yǎng)物而生長。主要侵染的線蟲種類有：球形胞囊線蟲、胞囊線蟲和根結(jié)線蟲等固定性內(nèi)寄生線蟲，也稱為機會真菌。這類真菌能侵染根內(nèi)和根表以及土壤中的繁殖體，同時還可以產(chǎn)生多種酶抑制線蟲卵的孵化[5]。

1.4 分泌毒素

有些真菌能夠分泌殺死線蟲的物質(zhì)，這類物質(zhì)能夠毒殺線蟲，便于菌絲侵入蟲體。如部分環(huán)狀捕捉器真菌能釋放氨，可迅速殺死捕獲的線蟲。擔子菌綱中有部分真菌能產(chǎn)生殺死線蟲的毒素，如Pleurotus ostreatus和 Hyphoderma albicans等 ，Pleurotus ostreatus所產(chǎn)生的微量的毒素可立即殺死線蟲，而后菌絲便從線蟲的自然孔口侵入蟲體。

2 噬線蟲真菌的應(yīng)用

噬線蟲真菌已有百余年的研究歷史，土壤線蟲和植物線蟲真菌研究起步較早。70年代，我國曾利用白僵菌大規(guī)模成功地防治過多種農(nóng)林害蟲，噬線蟲真菌研究達到了一個高峰。噬動物寄生線蟲真菌的研究起步較晚，始于1939年。Roubaud首先發(fā)現(xiàn)D.ellipsospora菌在麥芽瓊脂培養(yǎng)基上捕食類圓線蟲屬和鉤口線蟲屬的感染性幼蟲。1941年他們進行臨床實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)D.ellipsospora菌和A.oligospora菌可明顯降低羔羊的腸道寄生線蟲的幼蟲數(shù)量。隨后，研究人員對噬動物線蟲性真菌進行了系統(tǒng)的研究，并篩選出了數(shù)種最有發(fā)展?jié)摿Φ氖删€蟲真菌[6-7]。

2.1 捕食線蟲真菌

捕食線蟲絲孢菌涉及接合菌門、子囊菌門、擔子菌門和半知菌類等380余個物種，迄今為止，我國已報道的約有140種左右。捕食線蟲真菌呈世界性廣泛分布，存在于各種生態(tài)環(huán)境，如：農(nóng)田、園林、森林等土壤中，只要有線蟲，就可能存在有捕食線蟲真菌。在自然條件下，捕食線蟲真菌是調(diào)節(jié)線蟲密度的主要因子。多年來，研究人員進行了一系列捕食線蟲真菌生態(tài)多樣性的研究，結(jié)果表明，在各種不同生態(tài)環(huán)境條件下，捕食線蟲絲孢菌A.oligospora都顯示出了對線蟲極強的捕食的能力，如：環(huán)境中存在其他競爭腐生真菌、具有極高的碳氮比或是重金屬嚴重污染的土壤等[8]。

20世紀30年代開始，就有人進行利用捕食線蟲真菌防治不同植物及動物的寄生線蟲研究，但由于捕食線蟲真菌對線蟲無選擇性，且腐生能力強，導(dǎo)致其防治效果不穩(wěn)定。隨后人們開始進行捕食線蟲真菌的商品制劑研究，如將其包裹在種子外面等，但當線蟲數(shù)量較多時，其防治作用很不理想。目前，對于捕食線蟲真菌仍然沒有研制出理想的商品制劑。

2.2 內(nèi)寄生真菌

目前，全世界已報道的內(nèi)寄生真菌有120余種。內(nèi)寄生真菌產(chǎn)生的孢子主要有：成囊孢子、粘性孢子和吞食孢子3種。形成成囊孢子的線蟲內(nèi)寄生菌物主要是線蟲鏈枝菌Catenaria anguillulae orokin和Myzocytium屬的部分種；形成粘性分生孢子的線蟲內(nèi)寄生菌物主要是半知菌的Drechmeria屬、Hirsutella屬和Harposporium屬以及擔子菌亞側(cè)耳屬Nematoctonus的部分種；形成吞食孢子的線蟲內(nèi)寄生菌物主要見于鉤絲孢屬的一些種[4，9]。

早在20世紀70年代，國外已將圓錐掘氏梅里霉等內(nèi)寄生真菌用于線蟲的生物防治及真菌與線蟲識別機制研究的主要材料。直到1991年，圓錐掘氏梅里霉才在我國首次發(fā)現(xiàn)報道，并逐步研究用于根結(jié)線蟲防治。內(nèi)寄生真菌包括許多卵寄生真菌，廣泛存在于土壤中，這類真菌在自然條件下，對植物線蟲的控制有著重要作用。目前，許多內(nèi)寄生真菌已被制為商品制劑，應(yīng)用于線蟲的防治。

2.3 產(chǎn)毒真菌

目前，已報道的產(chǎn)毒真菌約有270多種，其中涉及擔子菌、半知菌、子囊菌以及接合菌等的140余屬。目前，已從噬線蟲產(chǎn)毒真菌中分離得到萜類、大環(huán)內(nèi)酯類、生物堿類、肽類、雜環(huán)類、簡單芳香類、脂肪酸類、醌類、炔類、甾醇類、木脂素類、神經(jīng)酰胺類和哌嗪類等230余種殺線蟲活性代謝產(chǎn)物。

產(chǎn)生毒害線蟲物質(zhì)的真菌種類很多，如土壤真菌、捕食線蟲真菌、機會真菌中的許多菌都可以產(chǎn)生毒素，但是專一憑借毒素侵染的真菌只有擔子菌門的側(cè)耳屬和絲霉屬。近年來，研究發(fā)現(xiàn)了擔子菌毛頭鬼傘Coprinus comatus侵染線蟲的機制，即菌絲產(chǎn)生的棘狀小球劃傷線蟲體壁，使線蟲喪失了運動能力，之后菌絲產(chǎn)生一類含氧雜環(huán)類化合物毒殺線蟲。

2.4 機會真菌

機會真菌常見的有茄孢鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、淡紫擬青霉、蠟蚧輪枝菌、柱孢菌、細柱孢菌、粘紅粘掃霉、異皮多孢菌等。機會真菌廣泛存在于土壤中，是土壤中線蟲自然衰退的一個重要因素。

早在20世紀60年代，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在單作作物的土壤中線蟲數(shù)量明顯減少，隨后，陸續(xù)有其他學(xué)者觀察到了相似的情況，經(jīng)研究表明，機會真菌在土壤線蟲的自然衰退中起著重要的作用。機會線蟲寄生于線蟲的胞囊、雌蟲或卵，致線蟲死亡。

3 展望

菌株的選育是生物防治的基礎(chǔ)，目前報道約有700多種噬線蟲性真菌，但迄今為止，只對其中少數(shù)的菌種進行了研究。其次，對噬線蟲真菌進行選育研究的最終目的是將要其應(yīng)用于生產(chǎn)，目前在菌種的應(yīng)用研究方面已取得了一些進展，但在菌株的商品化生產(chǎn)應(yīng)用研究還需加強，應(yīng)著重考慮以下問題。

3.1 劑型研究

在生產(chǎn)中，應(yīng)選用適合真菌生長和保存的劑型。獸醫(yī)上最常使用的給藥方法就是將藥物添加在家畜的飼料中讓其采食，既節(jié)約成本，又簡潔方便。因此，要達到這樣的目的，真菌制劑尚有一系列的關(guān)鍵問題要解決，如培養(yǎng)、篩選適宜的保護劑使孢子不受消化酶的影響，還需再進行深入的研究。此外，生防制劑的規(guī)格化和有效含量的標準化問題等也尚需研究。

3.2 使用時機

實行防治時，不同的菌種在不同季節(jié)或時間的活力不同，不同菌種針對線蟲不同發(fā)育階段的作用不同等，應(yīng)正確選擇或考慮不同真菌的使用時機。

3.3 給藥途徑

不同菌種制劑使用的方法不同，如經(jīng)消化道給藥或者直接施用于草場等。

3.4 聯(lián)合用藥

噬線蟲真菌與其他生防制劑、化學(xué)制劑的相互作用以及聯(lián)合使用等。有些學(xué)者從已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的真菌中提取其生物活性分子，如對捕食線蟲性真菌或殺卵性真菌進行粗提等，這些活性產(chǎn)物與主要真菌聯(lián)合使用，可相互增強殺線蟲作用。

參考文獻：

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［3］徐春蘭，劉 偉，秦鴿鴿，等.食線蟲真菌防治家畜胃腸道線蟲研究進展［J］.動物醫(yī)學(xué)進展，2014，35（12）：127-131.

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