高娃，馬銀鵬，陳鶴，張先成

（1.黑龍江省科學(xué)院微生物研究所，哈爾濱 150010；2.黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院，哈爾濱 150090）

黑木耳基內(nèi)、外菌絲生長一致性研究

高娃1,2，馬銀鵬1，陳鶴1，張先成1,2

（1.黑龍江省科學(xué)院微生物研究所，哈爾濱 150010；2.黑龍江省科學(xué)院高技術(shù)研究院，哈爾濱 150090）

本文通過對(duì)黑木耳菌絲在cPDA培養(yǎng)基質(zhì)內(nèi)、外菌絲生長速度一致性的研究，探索培養(yǎng)基氣生菌絲與基內(nèi)菌絲生長狀況，考察其生長的均一性、一致性問題。結(jié)果表明，cPDA培養(yǎng)基質(zhì)中氣生菌絲生長速度和基內(nèi)菌絲生長速度高度一致，不同生長圈氣生、基內(nèi)菌絲生長也高度一致，僅在回接時(shí)菌絲萌發(fā)和生長速度上存在差異性。

黑木耳；氣生菌絲；基內(nèi)菌絲；生長速度；一致性

黑木耳［Auricularia auricula(L.ex Hook．)Underw］，又稱光木耳、細(xì)木耳、云耳，是生長在朽木上的一種腐生真菌，由菌絲體和子實(shí)體組成［1-3］。黑木耳在我國的自然分布很廣，北起黑龍江、吉林，南到海南島，西自陜西、甘肅，東至福建、臺(tái)灣，遍及20多個(gè)省，但主要產(chǎn)區(qū)是湖北、四川、吉林和黑龍江等地［4］。不同地區(qū)黑木耳的品質(zhì)和營養(yǎng)成分略有差異，其中東北黑木耳質(zhì)量最好［5］。黑木耳菌絲培養(yǎng)和子實(shí)體栽培的研究報(bào)道很多［6-8］，但對(duì)黑木耳基內(nèi)、氣生菌絲生長的一致性，均一性的研究還未見報(bào)道。本研究通過對(duì)cPDA培養(yǎng)的黑木耳菌絲進(jìn)行基內(nèi)、氣生菌絲生長狀況的檢測(cè)，觀察基內(nèi)、外菌絲生長速度，了解菌絲基內(nèi)、外菌絲生長一致性。具體操作及結(jié)果如下：

1 材料和方法

1.1 供試菌株

黑29，由微生物研究所菌種保藏中心提供。

1.2 培養(yǎng)基

土豆200g（煮汁1 000 mL），瓊脂粉13.0g，葡萄糖20.0g，磷酸二氫鉀3.0g，硫酸鎂1.5g，蛋白胨0.5g，維生素B110.0mg，pH自然。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 菌絲培養(yǎng)

取直徑88mm的滅菌平皿，倒入35mLcPDA培養(yǎng)基，鋪6mm厚的cPDA培養(yǎng)平皿，接入2×2mm的母種，25℃培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。

1.3.2 菌絲一致性測(cè)定

分別取接種生長4d、8d、14d的cPDA平皿，于培養(yǎng)基的上、中、下3層分別取樣，取樣點(diǎn)分別位于接種點(diǎn)四周圓逐漸向外菌絲生長圈和外延表面未見氣生菌絲圈，具體見圖1。取樣后轉(zhuǎn)接于cPDA試管（18× 180mm）斜面中，25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察各取樣點(diǎn)菌絲萌發(fā)生長狀況。

圖1 不同培養(yǎng)時(shí)間平皿菌絲生長菌圈Fig.1 The plate mycelial growth ring of different incubation time

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析

計(jì)算菌絲生長速度和進(jìn)行DPS差異顯著性分析。

2 結(jié)果

2.1 不同菌絲圈上、中、下培養(yǎng)基回接菌絲生長情況

菌絲培養(yǎng)不同時(shí)期生長速率上、中部取樣點(diǎn)轉(zhuǎn)接長速差異不大，下部菌絲培養(yǎng)前期（4d、8d）取樣點(diǎn)轉(zhuǎn)接長速差異不大，培養(yǎng)后期（14d）差異明顯，不同取樣圈的菌絲生長速度有較大的差異，尤其是生長初期（4d）的下部菌絲和取樣點(diǎn)為生長前端的菌絲，萌發(fā)生長速度較慢。

圖2 不同培養(yǎng)時(shí)間菌絲轉(zhuǎn)接Fig.2 The mycelial through connection results of different incubation time

2.2 不同菌絲生長圈上、中、下培養(yǎng)基取樣點(diǎn)菌絲生長速度及差異性

不同生長圈取樣點(diǎn)菌絲生長速率和差異性分析表明，1、2、3菌圈取樣點(diǎn)菌絲生長速率差異不顯著，以為這些菌絲已經(jīng)萌發(fā)生長一定的時(shí)間，萌發(fā)生長速度較一致。4、5菌圈取樣點(diǎn)菌絲生長速率差異較顯著，這些菌絲則為剛生長的幼嫩菌絲，因此在轉(zhuǎn)接傳代時(shí)表現(xiàn)萌發(fā)速度慢，菌絲生長速度差異性大。

不同培養(yǎng)時(shí)間（4d、8d、14d）、不同部位（上、中、下部）取樣點(diǎn)菌絲生長速率和差異比較見表1，不同取樣部位菌絲萌發(fā)生長上、中部1、2、3菌圈菌絲長速無差異，其他部位存在差異，尤其是取樣部位為培養(yǎng)基質(zhì)的下部時(shí)，菌絲萌發(fā)速度、生長速度均較慢。不同取樣時(shí)間對(duì)菌絲萌發(fā)生長影響不大，相同部位不同培養(yǎng)時(shí)間只有下部菌絲萌發(fā)速度有小的差異，其他處理無差異性。

3 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)利用88mm平皿，基質(zhì)培養(yǎng)基厚度為6mm，我們對(duì)表層、基質(zhì)中部和基質(zhì)下部培養(yǎng)基取樣進(jìn)行了菌絲回接，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，雖然菌絲培養(yǎng)時(shí)間、取樣圈生長點(diǎn)、基質(zhì)取樣部位存在不同，但發(fā)現(xiàn)表面氣生菌絲與基內(nèi)菌絲生長速度高度一致。菌絲萌發(fā)生長后，不同部位氣生、基內(nèi)菌絲生長存在高度一致性，僅在回接后菌絲萌發(fā)和生長速度上存在差異性。

表1 取樣點(diǎn)回接菌絲生長速度Tab.1 Sampling point tieback mycelial growth rate

［1］楊新美.食用菌栽培學(xué)［M］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，1995.

［2］于文志.黑龍江省森工企業(yè)黑木耳產(chǎn)業(yè)發(fā)展方向［J］.中國林副特產(chǎn)，2007，91(6):93-95.

［3］李楠，李玉.黑木耳代用料栽培關(guān)鍵技術(shù)研究［J］.菌物研究，2008，6(3): 183-186.

［4］張介馳，張丕奇，韓增華，等.黑木耳袋栽技術(shù)研究進(jìn)展［J］.中國食用菌，2010，29(6):3-7.

［5］任立新.伊春市黑木耳產(chǎn)品質(zhì)量調(diào)查研究［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2012，(4): 351,353.

［7］張介馳，韓增華，張丕奇，等.發(fā)菌溫度對(duì)黑木耳菌絲和子實(shí)體生長的影響［J］.食用菌學(xué)報(bào)，2014，21(2):36-40.

［8］孫永琴.黑木耳秋季栽培技術(shù)［J］.食用菌，2009，31(6):51-52.

Study on Consistency of Growth Rate of Internal and External Mycelium of Auricularia auricula-judae

GAO Wa1,2，MA Yin-peng1，Chen He1，ZHANG Xian-cheng1,2
(1.Institute of Microbiology,Heilongjiang Academy of Sciences,Harbin 150010;
2.Institute of Advanced Technology,Heilongjiang Academy of Sciences,Harbin 150090,China)

The mycelium growth rate of internal and external of Auricularia auricula-judae was studied to know consistency of aerial and substrate mycelia.The results showed that the mycelium growth rate of internal and external mycelium was highly consistent.What's more,it was also highly consistent at different times.However,there were differences in both mycelium germination and growth speed.

A.auricula-judae;Aerial mycelia;Substrate mycelia;Growth rate;Consistency

S646.6

A

1674-8646（2016）01-0014-02

2015-11-16

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金（CARS-24）

高娃（1971-），女，黑龍江哈爾濱人，高級(jí)工程師，從事食藥用菌菌種分類、鑒定、栽培研究。

張先成（1984-），男，高級(jí)工程師，從事食藥用菌菌種分離鑒定、栽培生理生化、功效成分提取開發(fā)研究。