謝鳳鳳，唐玉榮，黎 理，蔡 毅（廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南寧 530001）

瑤藥過節(jié)風(fēng)的質(zhì)量標準初步研究Δ

謝鳳鳳＊，唐玉榮，黎 理，蔡 毅#（廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，南寧 530001）

目的：初步建立瑤藥過節(jié)風(fēng)的質(zhì)量標準。方法：觀察原植物形態(tài)、性狀和顯微鑒別特征；采用薄層色譜法（TLC）對藥材進行定性鑒別；測定藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物量。結(jié)果：過節(jié)風(fēng)的植物形態(tài)、性狀、顯微鑒別特征顯著；藥材的TLC斑點清晰，分離良好，陰性對照無干擾；藥材水分為6.45%～12.71%，總灰分為2.74%～5.86%，酸不溶性灰分為0.09%～0.68%，浸出物為52.32%～72.98%。結(jié)論：該研究所建標準可用于瑤藥過節(jié)風(fēng)的質(zhì)量初步控制。

過節(jié)風(fēng)；質(zhì)量標準；薄層色譜法；顯微鑒別

過節(jié)風(fēng)為常用瑤藥之一，來源為百合科植物開口箭Tupistra chinensis Baker.的根莖[1]。瑤醫(yī)認為其味甘、微苦，性涼，臨床主要用于治療咽喉炎、風(fēng)濕骨痛、關(guān)節(jié)炎、跌打損傷、癰瘡腫毒、毒蛇或狂犬咬傷[2]?，F(xiàn)代研究表明，過節(jié)風(fēng)含甾體皂苷、生物堿、強心苷和揮發(fā)油、脂肪酸、多糖等成分[3-4]。筆者通過對過節(jié)風(fēng)的原植物鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別四大經(jīng)典方法對其進行鑒別研究，同時測定藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物量，總結(jié)過節(jié)風(fēng)的鑒別特征，擬定檢查限量，為制定過節(jié)風(fēng)的基本質(zhì)量標準提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

RM2145型半自動輪轉(zhuǎn)切片機、DM2500型光學(xué)生物顯微鏡、DM500型圖像分析系統(tǒng)（德國Leica公司）；BT224S型電子分析天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；LSY型電熱恒溫水浴鍋（北京市醫(yī)療設(shè)備廠）；B2200S-T型超聲儀（上海必能信超聲有限公司，功率：250 W，頻率：40 kHz）。

1.2 試劑

薄層層析用硅膠G（化學(xué)純，青島海洋化工有限公司，批號：0110520）；FAA固定液（95%乙醇-冰醋酸-甲醛，8∶1∶1，V/V/V）、1%番紅水溶液、1%固綠乙醇溶液、水合氯醛、稀甘油均為分析純，水為蒸餾水。

1.3 藥材

過節(jié)風(fēng)藥材采于廣西壯族自治區(qū)各地（見表1），經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院蔡毅教授鑒定為真品，以GJF-1為對照藥材。藥材經(jīng)曬干后打粉，統(tǒng)一過2號篩，顯微鑒定的粉末過4號篩，備用。

表1 過節(jié)風(fēng)藥材來源Tab 1 Origin of T.chinensis

2 方法與結(jié)果

2.1 原植物鑒別

采用原植物鑒別法，觀察多產(chǎn)地原植物形態(tài)，匯總其形態(tài)特征如下：根狀莖長圓柱形，直徑1～1.5 cm，多節(jié)。葉基生，近革質(zhì)，條狀披針形，長15～65 cm，寬1.5～9.5 cm，先端漸尖，基部漸狹。穗狀花序直立，少有彎曲，密生多花；花短鐘狀；裂片卵形，肉質(zhì)，黃色或黃綠色；花絲大部分貼生于花被片上，上部分離，花藥卵形；子房近球形，花柱不明顯，柱頭頂端3裂。漿果球形，熟時紫紅色，詳見圖1。

2.2 性狀鑒別

樣品根莖呈扁圓柱形，略扭曲，長10～15 cm，直徑約1 cm。外表面黃棕色至黃褐色，有皺紋；節(jié)明顯，略膨大，節(jié)處有膜質(zhì)鱗片狀葉及圓點狀凹下的須根痕，節(jié)間短。質(zhì)地硬，不易折斷；斷面黃白色，細顆粒狀。氣微，味苦澀，詳見圖2。

2.3 顯微鑒別

2.3.1 根莖橫切面 呈類圓形。表皮細胞類方形，外壁增厚，棕色。外皮層細胞2～3列，排列整齊，紅棕色；皮層較寬，由數(shù)十列薄壁細胞構(gòu)成，可見葉跡維管束；內(nèi)皮層明顯。中柱有周木型或者外韌型維管束散在，40～70個，以近內(nèi)皮層處為多。薄壁組織常有草酸鈣針晶束，詳見圖3、圖4。

圖1 過節(jié)風(fēng)原植物圖Fig 1 Original plant of T.chinensis

圖2 過節(jié)風(fēng)藥材圖Fig 2 T.chinensis

圖3 過節(jié)風(fēng)根莖橫切面顯微圖（20×）Fig 3 Rhizome cross-section micrograph of T.chinensis（20×）

圖4 過節(jié)風(fēng)根莖橫切面顯微放大圖（40×）Fig 4 Rhizome cross-section micrograph of T.chinensis（40×）

2.3.2 粉末特征 類白色或黃白色。草酸鈣針晶、柱晶，成束或單個散在，長約150μm。表皮細胞黃棕色，垂周壁厚，彎曲。薄壁細胞類圓形，直徑約100μm，可見連珠狀增厚。導(dǎo)管多為螺紋導(dǎo)管、梯紋導(dǎo)管，管徑5～20μm。淀粉粒較小，類圓形，臍點為點狀、線狀、人字形，以單粒為主，復(fù)粒多以2～3個分粒組成，直徑2.5～14μm，詳見圖5。

2.4 薄層色譜（TLC）鑒別

取樣品粉末1 g，加乙酸乙酯20 ml，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，加乙酸乙酯2 ml使溶解，作為供試品溶液。另取過節(jié)風(fēng)對照藥材粉末1 g，按供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。按TLC法[2015年版《中國藥典》（四部）][5]試驗，吸取上述兩種溶液各10 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水-甲酸（15∶3∶0.5∶0.25，V/V/V/V）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以香草醛濃硫酸試液，于105℃加熱至斑點顯色清晰，置日光燈下檢視。結(jié)果，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點，詳見圖6。

圖5 過節(jié)風(fēng)粉末顯微圖（40×）Fig 5 Micrograph of the powder of T.chinensis（40×）

圖6 過節(jié)風(fēng)的薄層色譜圖1.對照藥材；2～8.供試品Fig 6 TLC chromatograms of T.chinensis1.control medicinal herb；2-8.test samples

2.5 水分檢測

按2015年版《中國藥典》（四部）水分測定法[5]項下方法檢測樣品水分。結(jié)果，8批樣品水分在6.45%～12.71%范圍內(nèi)（見表2），故擬定過節(jié)風(fēng)藥材水分含量不得過15.0%。

表2 過節(jié)風(fēng)各項目測定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Determination results of each items of T.chinensis（n＝3）

2.6 總灰分檢測

按2015年版《中國藥典》（四部）灰分測定法[5]項下方法檢測定樣品總灰分。結(jié)果，8批樣品總灰分在2.74%～5.86%范圍內(nèi)（見表2），故擬定過節(jié)風(fēng)藥材總灰分含量不得過7.0%。

2.7 酸不溶性灰分檢測

按2015年版《中國藥典》（四部）灰分測定法[5]項下方法檢測樣品酸不溶性灰分。結(jié)果，8批樣品酸不溶性灰分在0.09%～0.68%范圍內(nèi)（見表2），故擬定過節(jié)風(fēng)藥材酸不溶性灰分含量不得過0.8%。

2.8 浸出物檢測

按2015年版《中國藥典》（四部）熱浸法[5]項下方法檢測樣品浸出物量。結(jié)果，8批樣品浸出物量在52.32%～72.98%范圍內(nèi)（見表2），故擬定過節(jié)風(fēng)藥材浸出物量不得少于48.0%。

3 討論

過節(jié)風(fēng)的鑒別特征為：（1）原植物形態(tài)：根狀莖長圓柱形；葉基生，近革質(zhì)，條狀披針形；穗狀花序直立。（2）藥材根莖呈扁圓柱形；外表面黃棕色至黃褐色，有皺紋；節(jié)明顯，略膨大；切面黃白色。（3）根莖橫切面皮層較寬，可見葉跡維管束；內(nèi)皮層明顯；中柱有周木型或者外韌型維管束，薄壁組織常有草酸鈣針晶束。粉末特征中有草酸鈣針晶、柱晶。（4）粉末用乙酸乙酯提取，取10 μl進行點樣，以氯仿-甲醇-水-甲酸（15∶3∶0.5∶0.25，V/V/V/V）下層液為展開劑，展開，展距為8 cm，晾干，噴以香草醛濃硫酸試液。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，可見較為圓整的5個斑點。（5）水分含量初步擬定不得過15.0%，總灰分含量不得過7.0%，酸不溶性灰分含量不得過0.8%，浸出物含量不得少于48.0%。

通過對多產(chǎn)地的樣品進行觀察，原植物鑒別、性狀鑒別、顯微鑒別、TLC鑒別特征均明顯、穩(wěn)定，可作為過節(jié)風(fēng)的鑒別依據(jù)；對水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的測定并初步確定各常規(guī)檢查限量，為過節(jié)風(fēng)藥材質(zhì)量標準的進一步提高和完善提供試驗基礎(chǔ)。

綜上所述，本研究所建標準可用于瑤藥過節(jié)風(fēng)的質(zhì)量初步控制。

[1] 廣西壯族自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局編.瑤族習(xí)用藥材質(zhì)量評價與標準研究[M].南寧：廣西科學(xué)技術(shù)出版社，2014：127.

[2] 覃迅云，羅金裕，高志剛.中國瑤藥學(xué)[M].北京：民族出版社，2002：145.

[3] 廖安妮.神農(nóng)架開口箭皂苷提取物對動脈粥樣硬化的影響[D].武漢：華中科技大學(xué)，2009.

[4] 王慧娜，趙樺.開口箭脂肪酸成分氣相色譜-質(zhì)譜分析[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2011，17（8）：85.

[5] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部[S].2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：57、103、204、418.

Preliminary Study on the Quality Standard of Yao Medicine Tupistra chinensis

XIE Fengfeng，TANG Yurong，LI Li，CAI Yi（College of Pharmacy，Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning 530001，China）

OBJECTIVE：To preliminarily establish the quality standard of Yao medicine Tupistra chinensis.METHODS：The original plant morphology，properties and characteristics microscopic identification were observed；TLC was adopted for the qualitative identification；contents of moisture，total ash，acid-insoluble ash and extract were determined.RESULTS：T.chinensis morphology，properties and characteristics microscopic identification were remarkable；TLC spots were clear and well separated，negative control with interference；the moisture was 6.45%-12.71%，total ash was 2.74%-5.86%，acid-insoluble ash was 0.09%-0.68%and extract was 52.32%-72.98%.CONCLUSIONS：The standard can be used for the preliminary quality control of T.chinensis.

Tupistra chinensis；Quality standard；TLC；Microscopic identification

R917

A

1001-0408（2016）33-4704-03

2015-12-03

2016-03-15）

（編輯：張 靜）

廣西自然科學(xué)基金資助項目（No.2011GXNSFF018006）；廣西“2011協(xié)同創(chuàng)新中心”項目（No.桂教科研〔2013〕20號）；瑤族習(xí)用藥材質(zhì)量評價與標準研究項目（No.MZY2012034）

＊碩士研究生。研究方向：中藥及民族藥品種質(zhì)量。E-mail：15177143553@163.com

#通信作者：教授。研究方向：中藥及民族藥品種鑒別及資源開發(fā)利用。E-mail：Caiyi118@163.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.33.32