高峰 朱嚴(yán) 殷金山

摘要：本研究以五味子藤莖醇提物以及五味子果實(shí)提取物為原料，以感官為指標(biāo)，通過正交L9（34）試驗(yàn)設(shè)計(jì)，確定五味子藤莖飲料的最佳配方，并采用體外抗氧化實(shí)驗(yàn)及小白鼠抗疲勞試驗(yàn)評(píng)價(jià)其保健作用。結(jié)果顯示：飲料的最佳配方為五味子藤莖提取物添加濃度為4毫克/毫升，五味子提取物添加濃度為1.2毫克/毫升，白砂糖添加濃度為90毫克/毫升，檸檬酸添加濃度為1.0毫克/毫升，食鹽添加濃度為1.0毫克/毫升；該成品飲料的羥自由基清除率可達(dá)29%以上，小白鼠力竭游泳時(shí)間較對(duì)照組提高了約76%，血乳酸含量較對(duì)照組降低了15.9%，差異均顯著，說明該款飲料具有較好的抗氧化、抗疲勞的保健作用。

關(guān)鍵詞：五味子藤莖；保健飲料；羥自由基；抗疲勞

中圖分類號(hào)： R284 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2016.16.025

北五味子Schisandra chinensis（Turcz.）Baill習(xí)稱“五味子”，為木蘭科多年生落葉木質(zhì)藤本植物的成熟果實(shí)，主產(chǎn)于東北，具有斂肺滋腎，生津斂汗，澀精止瀉、寧心安神的功效[1]。近年來，韓國、日本、美國等從我國大量進(jìn)口五味子，用于藥物研究及保健品開發(fā)，例如俄羅斯將北五味子的根、莖、葉制備成茶葉[2]、韓國國內(nèi)熱銷的五味子速溶茶、東歐利用五味子果實(shí)加工的五味子果酪、果糕、果凍、果漿及各類飲料已經(jīng)上市，然而作為最大五味子出口國的中國在相關(guān)保健品方面的開發(fā)與研究卻不夠完善，以保健飲料為例，國內(nèi)僅有少量相關(guān)企業(yè)和學(xué)者做了五味子保健飲料的研發(fā)，且多存在工藝簡單、缺乏功能性評(píng)價(jià)的特點(diǎn)。針對(duì)這一現(xiàn)象，本研究以北五味子藤莖提取物[3-5]及果實(shí)提取物為原料，研制五味子保健飲料，并通過抗氧化性及抗疲勞試驗(yàn)對(duì)其功能性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1試驗(yàn)材料，儀器

1.1 試驗(yàn)材料與儀器

北五味子藤莖提取物（65%乙醇超聲提取干燥后備用），北五味子提取物（水提取絮凝后干燥備用），磷酸緩沖液，鄰二氮菲，硫酸來鐵，過氧化氫，全血乳酸測(cè)定試劑盒（南京建成生物工程研究所）；小白鼠；超聲波清洗儀，恒溫水浴鍋，725紫外分光光度計(jì)，游泳箱，離心機(jī)等。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 制定感官指標(biāo)（見表1）

1.2.2 五味子藤莖飲料配方研究

為突出天然植物源飲料的保健作用及藥用植物資源開發(fā)，本研究以五味子藤莖醇提取物以及五味子果實(shí)提取物為原料，在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上采用正交試驗(yàn)考察不同劑量的原料添加以及其他添加劑用量對(duì)飲料質(zhì)量的影響，得出最佳配方工藝。

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)飲料質(zhì)量影響程度不顯著的因素五味子藤莖提取物及食鹽固定水平分別3毫克/毫升、1.0毫克/毫升；采用L9（34）的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，對(duì)五味子提取物用量、白砂糖用量及檸檬酸用量配比進(jìn)行優(yōu)化，見表2。

取配方飲料10毫升，采用鄰二氮菲法[8]測(cè)定保健飲料對(duì)羥基自由基清除率的抗氧化性。

1.2.3 抗疲勞試驗(yàn) 共選20克左右（20±2克）的小白鼠20只，雌雄兼用，按體重、性別隨機(jī)分為2組，每組10只。實(shí)驗(yàn)組按劑量0.6毫升/20克飲料灌胃，對(duì)照組同劑量生理鹽水灌胃，每天一次，15天后對(duì)小白鼠進(jìn)行運(yùn)動(dòng)能力及全血乳酸測(cè)試。

（1）負(fù)重游泳試驗(yàn)[9]：取2組小白鼠，連續(xù)灌胃15天，末次灌胃給藥30分鐘后，將白小鼠放入游泳箱中，水深30厘米，水溫25℃±1.0℃，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛塊，力竭后取出，記錄小白鼠（力竭）游泳時(shí)間（開始入水游泳至力竭沉入水面10秒不能浮起的時(shí)間）。

（2）全血乳酸（BLA）含量測(cè)定[10]：取2組小白鼠，連續(xù)給藥15天，末次給藥30分鐘及負(fù)重游泳30分鐘后，分別眼眶采血（約20 uL）。對(duì)照組同離心取血清，試劑盒測(cè)定小白鼠血乳酸含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 五味子藤莖保健飲料配方研究結(jié)果

由表3 可知，3 種因素對(duì)口感的影響程度由大到小依次B、A、C，其中五味子提取物的質(zhì)量濃度飲料感官影響最大；經(jīng)正交試驗(yàn)得出最優(yōu)配方為A3、B3、C2；五味子藤莖飲料最佳配方為：五味子藤莖提取物用量為3.0毫克/毫升、五味子提取物添加量1.0毫克/毫升、白砂糖添加量90毫克/毫升、檸檬酸添加量1.0毫克/毫升，氯化鈉添加量為1.0毫克/毫升。

2.2體外抗氧化試驗(yàn)

由表4可知：羥基自由基是機(jī)體代謝中產(chǎn)生的最活躍的自由基，作為致病因子和人類常見疾病有著密切的關(guān)系。筆者經(jīng)前期試驗(yàn)得知五味子藤莖提取物具有一定的羥基自由基清除作用[11]，以此為依據(jù)，考察功能飲料的抗氧化性。本試驗(yàn)采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法測(cè)定成品飲料的羥基自由基，重復(fù)三次。經(jīng)測(cè)定，1.0毫升成品飲料對(duì)羥基自由基的清除率能較穩(wěn)定地維持在29 %以上，說明該工藝條件下五味子藤莖飲料有一定的抗氧化作用。

2.3 體外抗疲勞試驗(yàn)

負(fù)重游泳時(shí)間能夠反映小白鼠疲勞程度，由表5結(jié)果可知，試驗(yàn)組小白鼠力竭游泳時(shí)間較對(duì)照組提高了約76%，差異顯著，說明該款運(yùn)動(dòng)飲料能夠有效緩解疲勞，提高小白鼠耐力，從而延長運(yùn)動(dòng)時(shí)間。小白鼠運(yùn)動(dòng)后的血乳酸含量較對(duì)照組降低了15.9%，差異顯著，說明配方飲料對(duì)運(yùn)動(dòng)后血乳酸的升高有顯著抑制作用，能通過減少運(yùn)動(dòng)中乳酸的生成起到緩解疲勞的效果，從而有效增強(qiáng)小白鼠的運(yùn)動(dòng)能力。

3 結(jié)論

通過單因素與正交試驗(yàn)，確定飲料的最佳配方：五味子藤莖提取物添加濃度為4毫克/毫升，五味子提取物添加濃度為1.2毫克/毫升，白砂糖添加濃度為90毫克/毫升，檸檬酸添加濃度為1.0毫克/毫升，食鹽添加濃度為為1.0毫克/毫升，此時(shí)飲料口感最佳。

研究表明，高強(qiáng)度、長時(shí)間的勞動(dòng)或運(yùn)動(dòng)可導(dǎo)致機(jī)體疲勞，主要原因是體內(nèi)能源物質(zhì)大量消耗、代謝產(chǎn)物乳酸大量積累引起pH降低、自由基增多[12]。而適當(dāng)補(bǔ)充外源性抗氧化劑，如天然植物提取物類抗氧化劑，則可減輕自由基對(duì)機(jī)體的不良影響，增強(qiáng)免疫能力，預(yù)防某些疾病，提高機(jī)體抗疲勞能力和運(yùn)動(dòng)能力[13]。因此，本研究在制備中藥源飲料的基礎(chǔ)上，對(duì)其體外抗氧化性、小白鼠力竭游泳時(shí)間以及血乳酸含量進(jìn)行了研究，經(jīng)體外抗氧化試驗(yàn)結(jié)果可知，該成品飲料具有較好的清除羥自由基的作用，清除率可達(dá)29%以上。經(jīng)小白鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)結(jié)果可知，該飲料能夠顯著提高小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間，且能顯著降低小白鼠負(fù)重游泳后血乳酸含量。說明本飲料為具有抗氧化、抗疲勞作用的功能性飲料。然而，本飲料的體內(nèi)抗氧化作用是否也能達(dá)到期望水平以及試飲后人體生理指標(biāo)測(cè)定等方面還有待于進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1] 雷載權(quán).中藥學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.2006.

[2] 田穎.五味子保健飲料配方優(yōu)選研究[J].試驗(yàn)報(bào)告與理論研究，2007，10（10）：12-14.

[3] 史琳，何曉霞，潘英，等.五味子藤莖化學(xué)成分的研究[J].中草藥，2009（11）：1707-1710.

[4] 劉娜，樸惠善.北五味子莖藤多糖的提取和含量測(cè)定[J].延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)，2010（03）：29-31.

[5] 候微，魏忠寶，姜艷玲，等.五味子根藤莖體外抗氧化活性評(píng)價(jià)[J].吉林中醫(yī)藥，2010（12）：1086-1088.

[6] 王昌.復(fù)方五味子護(hù)肝保健飲料的研制及其功能性評(píng)價(jià)[D].黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，2010，（31）.

[7] 李樹聲.復(fù)方北五味子抗氧化功能飲料的研制及功能性評(píng)價(jià)的研究[D].黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，2010，（34）.

[8] 敖純.蟲茶醇提取物對(duì)超氧陰離子和羥基自由基的清除作用[J].肉類研究，2010（04）：60～64.

[9]吳越，曲敏，佟長青.羊棲菜多糖對(duì)小鼠抗疲勞作用的研究[J].食品工業(yè)科技，2013 （08），350-352.

[10] 蔡愈杭，榮耀中，羅殷，等.不同功效組分的功能飲料抗疲勞作用的研究[J].食品工業(yè)，2012，（03）

[11] 劉清瑋，孫莉佳，高延輝.五味子藤莖抗氧化物質(zhì)超聲波醇提取工藝研究[J].人參研究，2013，（03）：32-34.

[12] 鄧文輝，李新生.黑米色素抗疲勞的生化機(jī)理及研究展望[J].食品工業(yè)科技，2010（06）：372-374.

[13] 姚績偉，楊永亮.試論外源性抗氧化劑對(duì)運(yùn)動(dòng)自由基代謝的影響[J].四川體育科學(xué)，2004（01）：21-23.

作者簡介：高峰，本科學(xué)歷，吉林紫鑫般若藥業(yè)有限公司，工程師，研究方向：中藥產(chǎn)品開發(fā)。