徐勝春，范恩勇

(江蘇省揚(yáng)州市中心血站 225007)

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·臨床研究·

不同時(shí)間及溫度保存血液對紅細(xì)胞功能的影響研究

徐勝春，范恩勇△

(江蘇省揚(yáng)州市中心血站 225007)

目的 分析不同時(shí)間、溫度對保存血液紅細(xì)胞攜氧能力的影響。方法 10例當(dāng)日采集的CPDA-1抗凝新鮮全血，在封閉條件下分離大部分血漿，制備成懸浮紅細(xì)胞，分別放入4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃冰箱保存，然后分別在24 h、7 d、14 d、21 d、28 d，分別取樣測定，計(jì)算攜氧量、氧親和力值。結(jié)果 4 ℃、10 ℃、16 ℃組24 h、7 d、14 d、21 d有效攜氧量組內(nèi)、組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；24 h、7 d的4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃組間有效攜氧量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；4 ℃、10 ℃、16 ℃組24 h、7 d、14 d、21 d、28 d氧親和力組內(nèi)、組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 存放時(shí)間、溫度對血液中紅細(xì)胞功能影響較顯著，4 ℃后溫度越高、時(shí)間越長攜氧能力越差。

紅細(xì)胞功能； 保存； 時(shí)間； 溫度

輸血是重要的治療手段，紅細(xì)胞是輸血治療中的重要組成部分[1-2]。在保存過程中，紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)性與功能性損傷而引起的輸血相關(guān)危害逐漸成為研究熱點(diǎn)[3-4]。紅細(xì)胞衰老變化與其貯存環(huán)境有關(guān)，庫存時(shí)間、溫度是影響紅細(xì)胞輸注存活率以及有效性的關(guān)鍵影響因素。成熟紅細(xì)胞主要包括攜氧功能、免疫功能，臨床輸血主要利用其攜氧功能保障其輸注中的正常功能，達(dá)到治療目的[5-6]。本次研究嘗試探討不同時(shí)間、溫度保存下對紅細(xì)胞攜氧能力的影響?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料及方法

1.1 一般資料 采集血液均來自揚(yáng)州市中心血站街頭采血點(diǎn)，采用血袋為CPDA-1保養(yǎng)液的新鮮全血400 mL，共10例；男、女各5袋；采集血液均符合《全血及成分血質(zhì)量要求》。

1.2 方法 將全血在封閉條件下分離大部分血漿，制備成懸浮紅細(xì)胞，然后將每袋懸浮紅細(xì)胞平均分成4等份，共設(shè)A、B、C、D組，分別放入4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃冰箱保存。而后分別在24 h、7 d、14 d、21 d、28 d分別取樣測定。儀器主要包括血氧分析儀(測定氧親和力)，計(jì)算攜氧量。攜氧量計(jì)算采用直觀方法測量：將0.5 mL紅細(xì)胞配置成50 mL紅細(xì)胞懸液，在標(biāo)準(zhǔn)大氣壓、37 ℃條件下，向懸液中混入空氣，檢測溶液中氧分壓變化，待其穩(wěn)定在100 mm Hg時(shí)，測定溶液中血紅蛋白氧飽和度S1；同理改變氣壓，穩(wěn)定在400 mm Hg條件下，測定血紅蛋白氧壓飽和度S2；紅細(xì)胞有效攜氧量Q=20×(S1-S2)。繪制氧飽和度曲線，記錄氧親和力值。

2 結(jié) 果

2.1 時(shí)間與溫度對血液中有效攜氧量影響 4 ℃、10 ℃、16 ℃組24 h、7 d、14 d、21 d有效攜氧量組內(nèi)、組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；24 h、7 d的4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃組有效攜氧量組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； 28 d，4 ℃、10 ℃組有效攜氧量組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2 氧親和力變化 4℃、10℃、16℃組24 h、7 d、14 d、21 d、28 d氧親和力組內(nèi)、組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 有效攜氧量水平對比

表2 氧親和力水平對比±s，mm Hg)

3 討 論

血液在離體后置于不同保存條件下，紅細(xì)胞形態(tài)、生化狀況、氧化損傷都會發(fā)生不同程度改變。紅細(xì)胞存在自然衰老過程，在此過程中，細(xì)胞膜形態(tài)發(fā)生不可逆性改變[7-8]。有調(diào)查顯示[9-10]，紅細(xì)胞懸液存儲14d后開始出現(xiàn)光滑球型紅細(xì)胞，存儲3周后80%紅細(xì)胞變?yōu)榧?。本次研究證實(shí)，無論何種溫度條件下，血液中紅細(xì)胞攜氧量、氧親和力均低于24h前，反映紅細(xì)胞離體后存在自然衰老變化，且這種變化不會因存儲條件逆轉(zhuǎn)，故血站、醫(yī)院進(jìn)行血液管理時(shí)，需加強(qiáng)庫存血周轉(zhuǎn)，縮短保存時(shí)間，制訂嚴(yán)格的庫存血出入庫制度。醫(yī)院在領(lǐng)用血液時(shí)，若病情較危重時(shí)，對輸血質(zhì)量要求較高，也應(yīng)盡量使用存儲時(shí)間1周以上的紅細(xì)胞懸液。

4 ℃、10 ℃、16 ℃組24h、7d、14d、21d有效攜氧量組內(nèi)、組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；24h、7d后的4 ℃、10 ℃、16 ℃、25 ℃組間有效攜氧量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。離體紅細(xì)胞離體時(shí)間越長，隨著自然衰老，其可出現(xiàn)形態(tài)、生化狀況改變與氧化損傷。相同時(shí)間下，隨時(shí)間推移，有效攜氧量、氧親和力均顯著下降。其中，形態(tài)變化不可逆，紅細(xì)胞硬度增加，變形能力下降，紅細(xì)胞囊泡化增加，釋放某些亞微粒，進(jìn)一步造成形態(tài)變化，進(jìn)而導(dǎo)致攜氧能力下降[11-12]。

4 ℃、10 ℃、16 ℃組24h、7d、14d、21d、28d氧親和力組內(nèi)、組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明保存溫度對紅細(xì)胞保存影響較顯著。正常溫度下，紅細(xì)胞代謝速度加快，影響其攜氧能力。4 ℃條件下，相同時(shí)間內(nèi)攜氧量、氧親和力更高。研究證實(shí)，2～6 ℃保存時(shí)，紅細(xì)胞為維持自身細(xì)胞功能，會出現(xiàn)脂蛋白、脂質(zhì)量喪失，自然衰老加快，而在(4±2)℃低溫中存儲，紅細(xì)胞為維持自身代謝需求，大量消耗葡萄糖，導(dǎo)致電解質(zhì)平衡失調(diào)，pH值下降，發(fā)生細(xì)胞膜氧化損傷，直接影響其功能形態(tài)；氧化損傷會釋放危害因子，進(jìn)一步影響紅細(xì)胞功能。而在低溫環(huán)境下，紅細(xì)胞代謝進(jìn)一步下降，脂蛋白、脂質(zhì)量喪失，細(xì)胞膜氧化損傷減速，有助于紅細(xì)胞功能的維持。

需要注意的是，低溫環(huán)境可降低紅細(xì)胞代謝速度，但可能加速葡萄糖消耗，ATP生成減少，可能導(dǎo)致電解質(zhì)失衡，pH值下降，進(jìn)而影響輸血安全。此外，在保存血液過程中，不可避免會出現(xiàn)紅細(xì)胞細(xì)胞膜氧化損傷，其隨著時(shí)間的延長而加重，也可能影響輸血安全[13-15]。目前，已有大量研究證實(shí)，紅細(xì)胞存儲損傷與輸血對象病死率、住院時(shí)間、并發(fā)癥感染率、器官衰竭有關(guān)，應(yīng)合理保存血液，嚴(yán)格控制保存問題、保存時(shí)間，加強(qiáng)指標(biāo)檢測，分析保存時(shí)間、溫度對各項(xiàng)功能參數(shù)指標(biāo)的影響，建立量化標(biāo)準(zhǔn)，指導(dǎo)保存工作。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.050

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1673-4130(2016)21-3069-03

2016-03-27

2016-06-05)

△通訊作者,E-mail：fanenyong@163.com。