石 天，余瑩瑩，袁 杰

(湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院：1.輸血科；2.檢驗(yàn)科，湖北恩施 445000)

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·論 著·

交叉配合試驗(yàn)在腫瘤患者血小板輸注中的臨床應(yīng)用*

石 天1，余瑩瑩2，袁 杰1

(湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院：1.輸血科；2.檢驗(yàn)科，湖北恩施 445000)

目的 探討血小板交叉配合試驗(yàn)對腫瘤患者血小板輸注效果的臨床價(jià)值。方法 選擇39例血小板相關(guān)抗體陽性的腫瘤患者，分為隨機(jī)輸注組與交叉配合輸注組，計(jì)算輸注后1 h和24 h血小板增加校正指數(shù)(CCI)，判斷血小板輸注效果并進(jìn)行比較分析。結(jié)果 隨機(jī)輸注組與交叉配合輸注組的1、24 h CCI分別為(6.34±1.82)、(3.05±1.42)×109/L與(15.58±3.12)、(8.13±2.55)×109/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；血小板輸注有效率分別為23.81%、83.33%與14.29%、72.22%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 對血小板相關(guān)抗體陽性的腫瘤患者進(jìn)行輸注前交叉配型可顯著提高血小板輸注的有效性。

交叉配合試驗(yàn)； 血小板輸注； 腫瘤

單采血小板成分輸血是目前臨床主要采用的血小板輸注方式，其因血小板水平高并且治療效果良好而在近年來得到廣泛應(yīng)用。臨床輸注血小板指征為預(yù)防和治療因血小板數(shù)量減少或血小板功能缺陷引起的出血[1]。特別是在腫瘤患者自身的血小板減少，放、化療期間所引起的血小板生成減少和破壞等情況下，需輸注血小板。但是，對于多次、反復(fù)輸血或血小板的腫瘤患者，容易產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體，因免疫因素導(dǎo)致輸入的血小板遭到破壞而輸注無效(PTR)。產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體的患者中有26%～71%產(chǎn)生人類白細(xì)胞抗原(HLA)抗體，其中10%除HLA抗體外，同時(shí)存在血小板特異性(HPA)抗體[2]。由于血小板相關(guān)抗體導(dǎo)致PTR的相關(guān)作用已確定，逐漸發(fā)展出選擇相合供者血小板的方法，血小板交叉配合試驗(yàn)即為目前臨床實(shí)驗(yàn)室用于血小板供者選擇的常用方法。筆者于臨床輸血工作中對39例血小板相關(guān)抗體陽性腫瘤患者采用交叉相合血小板輸注治療的血小板增加校正指數(shù)(CCI)和有效率展開觀察，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1～12月本院腫瘤科住院、經(jīng)血小板相關(guān)抗體檢測陽性患者39例，其中男18例，女21例；年齡12～74歲，平均(38.0±0.5)歲。其中肺癌16例，宮頸癌6例，乳腺癌9例，淋巴瘤6例，多發(fā)性骨髓瘤2例?；颊叩呐R床診斷均符合疾病診斷相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。隨機(jī)分為2組,血小板交叉配合輸注組(后稱交叉配合組)輸注經(jīng)交叉配合試驗(yàn)相合的血小板，隨機(jī)輸注組(后稱隨機(jī)組)輸注隨機(jī)血小板。

1.2 儀器與試劑 SYSMEX XT-2000i全自動(dòng)五分類血細(xì)胞分析儀，專用血型血清學(xué)離心機(jī)，儀器性能已經(jīng)過相關(guān)驗(yàn)證；血小板計(jì)數(shù)試劑均由日本SYSMEX公司提供，血小板抗體檢測試劑盒由長春博迅公司提供。

1.3 方法

1.3.1 血小板的輸注 臨床醫(yī)師根據(jù)患者實(shí)驗(yàn)室檢查和臨床癥狀決定血小板的輸注，操作均符合《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》的指征。機(jī)采血小板由恩施州中心血站提供，在(22±2)℃血小板保存箱震蕩保存，血小板水平大于或等于2.5×1011/L。5 d內(nèi)使用。盡快并一次性足量輸注。

1.3.2 血小板輸注效果評價(jià) 血小板輸注后效果評價(jià)采用CCI[3]，輸注后1 h的CCI大于7.5×109/L或者24 h的CCI大于4.5×109/L為輸注有效，否則無效。檢測血小板計(jì)數(shù)需分別采集3次外周血并用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，時(shí)間分別為輸注前、后1 h和輸注后24 h，立即檢測并計(jì)算CCI。

1.3.3 血小板交叉配型 采用固相紅細(xì)胞凝集原理進(jìn)行血小板交叉配型，嚴(yán)格依照試劑盒使用說明書操作及判讀結(jié)果，設(shè)標(biāo)記供者、陽性、陰性對照孔，分別加入100×109/L水平的供者機(jī)采血小板懸液50 μL，離心5 min后洗滌3次，每孔中加入低離子強(qiáng)度溶液100 μL，再依次向各孔中加入受者標(biāo)本、陽性對照、陰性對照50 μL，搖勻后于37 ℃孵育30 min，洗滌5次后加入抗人IgG和指示紅細(xì)胞各50 μL，用離心機(jī)離心5 min后觀察結(jié)果，紅細(xì)胞均勻分布在孔底部表面為陽性，而孔底部中央形成紅細(xì)胞聚集為陰性，陰性表示血小板交叉配合試驗(yàn)相合。

2 結(jié) 果

2.1 腫瘤患者隨機(jī)輸注與交叉配合輸注的CCI值評價(jià) 39例采用固相凝集法檢測血小板抗體陽性患者中，交叉配合組輸注血小板后1、24 h的CCI與隨機(jī)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。交叉配合組輸注血小板后1、24 h的CCI值分別為(15.58±3.12)、(8.13±2.55)×109/L，隨機(jī)組輸注血小板后1、24 h的CCI值分別為(6.34±1.82)、(3.05±1.42)×109/L。

表1 隨機(jī)輸注與交叉配合輸注的CCI值評價(jià)(×109/L)

2.2 腫瘤患者隨機(jī)輸注與交叉配合輸注的效果評價(jià) 39例采用固相凝集法檢測血小板抗體陽性患者中，交叉配合組血小板輸注后1、24 h有效率與隨機(jī)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。交叉配合組輸注血小板后1、24 h有效例數(shù)分別為15、13例，輸注有效率分別為83.33%、72.22%。隨機(jī)組輸注血小板后有效例數(shù)分別為5、3例，輸注有效率分別為23.81%、14.29%。

表2 隨機(jī)輸注與交叉配合輸注的效果評價(jià)[n(%)]

3 討 論

腫瘤患者往往需要血小板的支持治療，但同時(shí)也面臨著易發(fā)生PTR的問題。PTR指患者連續(xù)2次或2次以上接受保存時(shí)間在5 d內(nèi)的合格血小板輸注后，血小板數(shù)目增加不滿意，即臨床出血癥狀未見改善，血小板計(jì)數(shù)未見顯著增高，甚至出現(xiàn)下降的情況[4]。PTR發(fā)生后，臨床處理相當(dāng)棘手，血小板再次輸注也無法達(dá)到提升血小板、預(yù)防出血及止血的預(yù)期效果，造成患者負(fù)擔(dān)加重和血液資源的浪費(fèi)。出現(xiàn)PTR的原因大致可分為非免疫因素及免疫因素。其中，目前認(rèn)為非免疫因素為主要原因，包括血小板本身質(zhì)量、感染、發(fā)熱、藥物、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)、脾功能亢進(jìn)及造血干細(xì)胞移植等[5]。免疫因素包括患者受免疫刺激產(chǎn)生的HLA同種抗體、HPA抗體、ABO血型系統(tǒng)抗體及患者自身免疫異常狀態(tài)等因素[6]。

目前，臨床對PTR的評價(jià)指標(biāo)常使用CCI。本研究顯示，采用2種不同策略的血小板輸注，CCI的升高程度和輸注有效率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，采用血小板隨機(jī)輸注的CCI和輸注有效率顯著低于交叉配合輸注，與國內(nèi)相關(guān)報(bào)道一致[7]。然而，并非所有隨機(jī)輸注的1、24 h CCI均低于有效標(biāo)準(zhǔn)，仍有部分血小板相關(guān)抗體陽性的腫瘤患者通過隨機(jī)輸注血小板達(dá)到治療目的。提示此類患者開始接受血小板輸注時(shí)，可考慮隨機(jī)輸注；如其產(chǎn)生PTR，則輸注交叉配合的血小板。相反，有部分通過交叉配合輸注血小板患者并沒有引起CCI值的有效增高而被判斷為輸注無效。這些患者輸血后效果和配合性試驗(yàn)結(jié)果并不相符，說明除已知的血小板相關(guān)抗體等免疫因素外，還存在干擾血小板輸注有效性其他因素。這部分腫瘤患者住院期間多接受過化療、放療、干細(xì)胞移植等，使其情況更為復(fù)雜，可能產(chǎn)生更多影響血小板輸注有效的不利因素[8]。

血小板配合輸注在為患者提供合適的血小板、提高血小板的輸注有效率及避免PTR發(fā)生方面，值得肯定[9]。但是，患者反復(fù)輸注血小板，易受同種免疫刺激，血小板相關(guān)抗體陽性率逐漸增加[10]。尤其是體內(nèi)存在HLA抗體的患者，即使通過血小板交叉配合輸注，也不易找到與之相合的供者。另一方面，供者的動(dòng)員、血小板的供給一定程度上制約著血小板交叉配合試驗(yàn)的開展，也對HLA配型產(chǎn)生影響。在對患者HLA進(jìn)行基因分型后尋找與之配合血型的血小板供者時(shí)，幾乎無法找到HLA完全一致的供者，為及時(shí)滿足患者的血小板輸注需求，往往選擇部分配合的供者[11]。HLA配型程度不同，導(dǎo)致輸注效果不同，當(dāng)前仍沒有被廣泛認(rèn)同的方案。由于條件限制，此次研究未對2種方法的輸血效果進(jìn)行比較。

總之，腫瘤患者血小板輸注效果受各種復(fù)雜因素的影響，而相關(guān)問題已經(jīng)引起臨床工作者的重視。對于血小板相關(guān)抗體陽性的腫瘤患者而言，血小板交叉配合試驗(yàn)作為經(jīng)濟(jì)易行的方法，在為其尋求合適的血小板輸注及解決PTR方面有一定優(yōu)勢。

[1]Panzer S,Eichelberger B,Koren D,et al.Monitoring survival and function of transfused platelets in Bernard-Soulier syndrome by flow cytometry and a cone and plate(let) analyzer(Impact-R)[J].Transfusion,2007,47(1):103-106.

[2]潘艷莎,賈蒼松.血小板制品輸注與血小板抗體相關(guān)進(jìn)展[J].中國實(shí)用兒科雜志,2011,26(10):789-791.

[3]劉景漢.臨床輸血學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:30-37.

[4]魏亞明.基礎(chǔ)輸血學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:275-280.

[5]British Committee for Standards inHaematology,BloodTransfusionTaskForce.Guidelinesfortheuseofplatelettransfusions[J].BritJHaem,2003,122(1):10-23.

[6]程麗霞,楊和軍.血小板輸注無效的原因和防治[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(2):180-184.

[7]葉海輝,李智山,鐘萬芬,等.血小板抗體檢測在本地區(qū)血小板輸注無效患者診斷中的應(yīng)用[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2015，19(2):298-300.

[8]Rioux-MasseB,CohnC,LindgrenB,etal.Utilizationofcross-matchedorHLA-matchedplateletsforpatientsrefractorytoplatelettransfusion[J].Transfusion,2014,54(12):3080-3087.

[9]陳活強(qiáng),蔡葵,容伯芬.血小板抗體檢測及配型對血小板輸注無效的臨床意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(14):1704-1705.

[10]王輝.血小板抗體檢測及交叉配型在臨床血小板輸注中的應(yīng)用[J].江蘇醫(yī)藥,2015，41(8):910-912.

[11]伍偉健.同種免疫性抗體致血小板輸注無效輸血策略的國內(nèi)外研究進(jìn)展[J].中國免疫學(xué)雜志,2014,30(3):426-429.

Clinical application of cross matching in platelet transfusion of patients with tumor*

SHITian1,YUYingying2,YUANJie1

(1.DepartmentofBloodTransfusion;2.DepartmentofClinicalLaboratory,UniversityHospitalofHubeiUniversityforNationalities,Enshi,Hubei445000,China)

Objective To investigate the clinical value of platelet cross matching for platelet transfusion in patients with tumor.Methods A total of 39 cases of patients with tumors and platelet associated antibody-positive were randomly divided into a random transfusion group and cross-matched transfusion group,corrected count increment(CCI) of platelet of 1 h and 24 h after transfusion were calculated,platelet transfusion effect was determined and compared.Results CCI of 1 h and 24 h after the transfusion in the randomized transfusion group were(6.34±1.82)×109/L and(3.05±1.42)×109/L respectively,and which of cross-matched transfusion group were(15.58±3.12)×109/L and(8.13±2.55)×109/L,the differences were statistically significant(P<0.05).Efficiency rates of platelet transfusion were 23.81% and 83.33%,14.29% and 72.22%,the differences were statistically significant(P<0.05).Conclusion The efficiency of platelet transfusion can be increased significantly in patients with tumors and platelet associated antibody-positive before transfusion by platelet cross matching.

cross matching; platelet transfusion; tumor

湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院2014年度科研項(xiàng)目(MDYY201409)。

石天，男，技師，主要從事臨床輸血治療方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.010

A

1673-4130(2016)21-2976-03

2016-02-20

2016-05-15)