徐衛(wèi)益，許 青，陳保德

(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院檢驗科/浙江省臨床體外診斷技術(shù)研究重點實驗室，杭州 310003)

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·論 著·

尿液對羥基苯丙氨酸水平在癌癥篩選中的應(yīng)用研究*

徐衛(wèi)益，許 青，陳保德

(浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院檢驗科/浙江省臨床體外診斷技術(shù)研究重點實驗室，杭州 310003)

目的 探討尿液中對羥基苯丙氨酸(酪氨酸)尿液檢測(TUT)在癌癥篩選中的應(yīng)用。方法 取癌癥組、非癌癥組、健康受試組晨尿，用對水平TUT試劑盒檢測，統(tǒng)計分析各組及同組各種疾病間檢測結(jié)果的差異性。結(jié)果 癌癥組、非癌癥組、健康受試組陽性檢出率分別為81.3%、30.8%、33.8%，癌癥組顯著高于非癌癥組和健康受試組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；非癌癥組和健康受試組陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.653)。癌癥組中胃、食管癌、腸癌陽性檢出率顯著高于其他類型癌癥，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其他類型癌癥檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.449)。非癌癥組中糖尿病患者陽性檢出率高于其他各種疾病，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其他各種疾病患者陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.327)。結(jié)論 尿液TUT能很好地用于癌癥患者的篩選，尤其是胃腸道癌癥患者。

癌； 對羥基苯丙氨酸； 篩選

腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的高發(fā)病率和高病死率疾病，大量研究和資料證實，早期診斷和治療是防治腫瘤和降低病死率的最有效辦法[1]。目前，常規(guī)腫瘤標(biāo)志物檢測方法存在單項檢出率低、不能早期發(fā)現(xiàn)等缺點[2-3]，常常延誤疾病的診斷和治療。尋找一種能早期發(fā)現(xiàn)、檢測準(zhǔn)確且操作簡便的標(biāo)志物及試驗方法，是醫(yī)學(xué)研究者不斷努力的方向。對羥基苯丙氨酸(酪氨酸)尿液檢測(TUT)試劑用于早期發(fā)現(xiàn)癌癥，科技技術(shù)較高，主要原理為：癌癥患者尿液中異常升高的酪氨酸代謝產(chǎn)物與檢測試劑發(fā)生特異性反應(yīng)，生成具有特征顏色的沉淀物，根據(jù)沉淀物顏色目測判斷測試結(jié)果。筆者通過其在癌癥患者、非癌癥疾病患者、健康對照者中的檢測，了解其在癌癥篩選中的作用?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 TUT試劑由吉林生物研究有限公司生產(chǎn)并提供(產(chǎn)品商標(biāo)名稱“六早”)。收集2015年1～10月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院及浙江省腫瘤醫(yī)院癌癥患者209例，男性124例，女性85例。其中胃、食管癌患者46例，中位年齡59.5歲；腸癌患者38例，中位年齡63.0歲；肝癌患者42例，中位年齡56.0歲；膽囊、胰腺癌患者14例，中位年齡62.0歲；乳腺癌患者30例，中位年齡53.0歲。所有患者均病理組織學(xué)診斷明確，并在治療前留取尿樣送檢。收集2015年1～10月浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院非癌癥患者908例，男性382例，女性526例。其中糖尿病患者114例，中位年齡56.0歲；結(jié)核患者57例，中位年齡52.0歲；胃炎患者151例，中位年齡49.0歲；腸炎患者44例，中位年齡32.5歲；肝炎患者119例，中位年齡43.0歲；腎病患者104例，中位年齡46.0歲；膽結(jié)石患者110例，中位年齡59.0歲；反流性食管炎患者7例，中位年齡50.0歲；子宮肌瘤患者102例，中位年齡46.0歲；卵巢囊腫患者100例，中位年齡34.5歲。所有患者均通過相應(yīng)的影像學(xué)、試驗指標(biāo)、內(nèi)鏡檢查診斷明確病情。收集浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院健康體檢者標(biāo)本80例，其中男性46例，女性34例，中位年齡51.0歲，影像學(xué)及試驗指標(biāo)均正常。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 用一次性留尿容器留取患者和健康體檢者晨尿標(biāo)本備檢，所有檢測在標(biāo)本留取后2 h內(nèi)完成。排除黃疸及紅、綠色等異常顏色尿液。

1.2.2 檢測操作 打開測試瓶，用一次性定量吸管將5 mL尿液加入測試瓶并混勻，靜置5 min后觀察沉淀物(或混合液)顏色并與標(biāo)準(zhǔn)比色卡對照判斷結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 檢測結(jié)果以陰性、弱陽性、陽性和強(qiáng)陽性表示，分別計算各自比例，其中將弱陽性、陽性和強(qiáng)陽性均歸為陽性統(tǒng)計。用SPSS16.0軟件進(jìn)行四格表分析，計算敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值等指標(biāo)，組間陽性檢出率比較采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組相關(guān)檢測數(shù)據(jù) 癌癥組、非癌癥組、健康受試組臨床信息，見表1、2。癌癥組、非癌癥組、健康受試組檢測陽性檢出率分別為81.3%、30.8%和33.8%。癌癥組陽性檢出率顯著高于非癌癥組和健康受試組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；非癌癥組和健康受試組陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.653)，見表3。該檢測試劑敏感性為81.3%，特異性為68.9%，陽性預(yù)測值為35.6%，陰性預(yù)測值為94.6%，見表4。

表1 癌癥組患者臨床信息一覽表

表2 非癌癥組及健康受試組臨床信息一覽表

2.2 不同癌癥患者陽性檢出率及比較 癌癥組患者中，胃、食管癌、結(jié)腸癌患者陽性檢出率顯著高于其他癌癥患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其他類型癌癥檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.449)，見表5。

2.3 非癌癥組和健康受試組陽性檢出率及比較 非癌癥組、健康受試組陽性檢出率為14.3%～47.4%；其中糖尿病患者陽性檢出率顯著高于其他疾病和健康受試組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；其他各種疾病患者和健康受試組陽性檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.327)，見表6。

表3 3組陽性檢出率及組間比較

表4 尿?qū)αu基苯丙氨酸檢測法診斷癌癥的結(jié)果(n)

表5 不同癌癥患者陽性檢出率及比較

表6 非癌癥組和健康受試組陽性檢出率及比較

3 討 論

世界衛(wèi)生組織發(fā)表《全球癌癥報告2014》指出，新增癌癥患者有一半出現(xiàn)在亞洲，大部分來自中國，中國新增癌癥患者數(shù)量位居世界第一。全國腫瘤登記中心發(fā)布《2012中國腫瘤登記年報》顯示，我國每天新增腫瘤患者8 550例，患者數(shù)最多的癌癥類型依次為肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌和食管癌，每分鐘有6人被診斷為癌癥、5人死于癌癥。癌癥高病死率主要由于我國癌癥患者發(fā)現(xiàn)時較多處于中晚期，對腫瘤缺乏快速、特異的早期診斷手段，目前癌癥的診斷主要通過實驗室免疫學(xué)酶學(xué)檢測、影像學(xué)檢查等，某些檢查費(fèi)用昂貴，在一般健康體檢過程中無法普及。

早在20世紀(jì)80年代，有學(xué)者采用核磁共振(NMR)技術(shù)檢測癌癥患者尿液成分，證實癌癥患者尿液單羥酚類物質(zhì)顯著增加。近年來，通過體液代謝組學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)癌癥患者尿液中存在腫瘤標(biāo)志物[4-7]。目前采用的尿液檢測試劑原理為：當(dāng)檢查者體內(nèi)有癌細(xì)胞活動時，腫瘤細(xì)胞異常增殖引發(fā)機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)，體內(nèi)特異氨基酸代謝異常增高，導(dǎo)致尿液中色氨酸、酪氨酸及代謝衍生物-5-羥吲哚乙酸、對羥基苯丙酮酸水平增高[8]，此類物質(zhì)能與尿檢試劑呈特異性顯色反應(yīng)，幫助其用于臨床對癌癥的早期普查篩選，有利于癌癥早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。

本次試驗結(jié)果顯示，癌癥組陽性檢出率顯著高于非癌癥組和健康受試組，3組分別為81.3%、30.8%和33.8%。癌癥組中陽性檢出率從高到低依次為結(jié)直腸癌、胃及食管癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、膽囊和胰腺癌。胃腸癌患者陽性檢出率顯著高于其他種類癌癥，與羅陽等[9]的報道部分一致，分析原因可能與胃腸癌病變能加速體內(nèi)氨基酸代謝，導(dǎo)致尿中氨基酸代謝產(chǎn)物增多；但肝癌患者的陽性檢出率(73.8%)比報道(100.0%)顯著偏低，可能與研究人群不同有關(guān)，還需進(jìn)一步分析。TUT試劑敏感性為81.3%，特異性為68.9%，陽性預(yù)測值為35.6%，陰性預(yù)測值為94.6%，說明檢測陰性者排除癌癥可靠性高，但檢出陽性者還需進(jìn)一步檢查，以排除某些干擾導(dǎo)致的假陽性。

針對非癌癥組中出現(xiàn)假陽性，服用能產(chǎn)生大量分解氨基酸的藥物、食物可能為主要干擾因素[10]。因此患者需停藥3 d、空腹8 h再取新鮮晨尿檢測，以提高正確性。在非癌癥組中糖尿病患者陽性檢出率最高，可能與糖尿病患者機(jī)體糖代謝異常生成類似于對羥基苯丙氨酸類物質(zhì)有關(guān)，有待于在以后的試驗中加以證明。由此提示，糖尿病患者采用該試劑篩選癌癥時若出現(xiàn)陽性，需排除干擾。此外，該試驗不適合檢測黃疸及紅、綠色尿樣，以免錯判。

綜上所述，尿液檢測試劑能早期篩選癌癥，尤其對胃腸癌患者。檢測陽性時需排除藥物、食物等干擾因素，并進(jìn)一步安排相關(guān)檢查以明確診斷結(jié)果。

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Application of urine p-hydroxyphenyl alanine in screening cancer*

XUWeiyi,XUQing,CHENBaode

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofCollegeofMedicine,ZhejiangUniversity/KeyLaboratoryofClinicalinVitroDiagnoisticTechnologyofZhejiangProvince,Hangzhou,Zhejiang310003,China)

Objective To evaluate the effect of urine p-hydroxyphenyl alanine test(TUT) in screening cancer.Methods Study subjects were consisted of three groups including cancer patients,non-cancer patients and healthy individuals.Morning urine from the subjects were collected and detected for urine p-hydroxyphenyl alanine(tyrosine) with TUT kit.Chi-square test was used for analysis of differences between the three groups.Results The positive rates of p-hydroxyphenyl alanine in cancer patients(81.3%) was significantly higher than that of non-cancer patients(30.8%) and healthy individuals(33.8%,P<0.05).The difference of the positive rate between the non-cancer patients and healthy individuals didn′t have statistical significance(P=0.653).In cancer patients,positive rates of gastric,esophageal and colon cancer positive rate were significantly higher than other types of cancer(P<0.05).And the positive rate of diabetes in non-cancer group was significantly higher than that of other diseases(P<0.05).Conclusion TUT could be used in screening cancer effectively,especially in screening the gastrointestinal cancer.

cancer; p-hydroxyphenyl alanine; screening

浙江省衛(wèi)生和計劃生育委員會基金項目(2014KYB097)；浙江大學(xué)橫向科技項目(15-491010-026)。

徐衛(wèi)益，男，主管技師，主要從事臨床基礎(chǔ)檢驗方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.007

A

1673-4130(2016)21-2967-03

2016-02-04

2016-04-24)