施 璇 孔建平 涂 巖 張曉良

(東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院腎內(nèi)科,江蘇 南京 210009)

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血清NGAL與慢性腎臟病患者腎功能和蛋白尿的相關(guān)性

施 璇 孔建平 涂 巖 張曉良

(東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院腎內(nèi)科,江蘇 南京 210009)

目的 探討血清中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)與慢性腎臟病(CKD)患者腎功能和蛋白尿的相關(guān)性。方法 選取118例CKD患者為研究組，選取同期20例健康志愿者為對(duì)照組，采用生化分析儀檢測(cè)血肌酐(SCr)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)，采用酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)測(cè)定血清中NGAL，雙縮脲法測(cè)定尿蛋白量，應(yīng)用Cockcroft-Gault公式計(jì)算腎小球?yàn)V過(guò)率估計(jì)值(eGFR)。結(jié)果 研究組患者的NGAL為(297.56±138.15)ng/ml，明顯高于對(duì)照組(91.73±32.47)ng/ml(P<0.05)。CKD患者的NGAL與eGFR呈負(fù)相關(guān)(r=-0.751，P<0.01)，CKD患者NGAL與尿蛋白水平、SCr和CRP呈正相關(guān)(r分別為0.343，0.135和0.114，P<0.05).結(jié)論 血清NGAL水平與CKD患者腎功能損傷和蛋白尿密切相關(guān)，NGAL可能成為監(jiān)測(cè)CKD患者腎功能損害和進(jìn)展的標(biāo)志物。

NGAL；慢性腎臟??；腎功能；蛋白尿

慢性腎臟病(CKD)進(jìn)展至終末期腎病需要依賴(lài)腎臟替代治療而生存。CKD起病隱匿，且呈慢性、進(jìn)行性發(fā)展，疾病初期臨床表現(xiàn)無(wú)特異性，當(dāng)病變發(fā)展到纖維化以后臨床治療十分困難。因此，早發(fā)現(xiàn)并采取積極治療，對(duì)CKD的治療及預(yù)后具有重要意義〔1〕。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)是一種調(diào)控腎小管上皮細(xì)胞凋亡的小分子蛋白，正常情況下NGAL在腎組織表達(dá)極低，腎小管間質(zhì)中性粒細(xì)胞發(fā)生增殖，腎組織免受炎細(xì)胞的侵害時(shí)NGAL增高，且NGAL在腎損傷時(shí)具有良好的敏感性和特異性〔2〕。本研究通過(guò)探討血清NGAL在慢性腎臟病患者中的變化，以及和腎功能及蛋白尿的相關(guān)性，以期為NGAL評(píng)估CKD提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年11月至2015年6月在我院腎內(nèi)科就診的118例CKD患者為研究組，所有入選患者均符合美國(guó)國(guó)家腎臟基金會(huì)(NKF)2002年腎臟病預(yù)后質(zhì)量指南(K/DOQI)的CKD診斷標(biāo)準(zhǔn)〔3〕，且均為CKD3期和CKD4期患者；排除標(biāo)準(zhǔn)：排除惡性腫瘤；排除心、肝等重要臟器功能不全者；排除甲狀腺疾病患者；排除近期創(chuàng)傷、手術(shù)史以及急性感染性疾病患者。另選取同期20例健康志愿者為對(duì)照組。其中研究組男73例，女45例，年齡35～75〔平均(62.34±12.56)〕歲，CKD3期56例，CKD4期62例；對(duì)照組男12例，女8例；年齡34～74〔平均(61.53±12.47)〕歲。兩組患者性別、年齡等一般資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。本研究方案經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批并經(jīng)患者或家屬簽字同意。

1.2 檢測(cè)方法 健康志愿者于體檢當(dāng)日，CKD患者于就診當(dāng)日早晨，采用取肘靜脈血3 ml，4℃，1 000 r/min離心15 min，取上清存于-80℃冰箱保存。同時(shí)收集保存尿液5 ml，置無(wú)致熱源及內(nèi)毒素的試管中，1 000 r/min離心20 min，取上清-80℃冰箱保存。采用生化分析儀檢測(cè)血肌酐(SCr)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)水平。采用ELISA法測(cè)定血清中NGAL含量(試劑盒購(gòu)于上海生工生物技術(shù)有限公司)，嚴(yán)格按試劑盒操作方法操作。采用雙縮脲法測(cè)定尿蛋白量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0軟件，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者NGAL比較 研究組患者的NGAL為(297.56±138.15)ng/ml，明顯高于對(duì)照組的(91.73±32.47)ng/ml(t=6.613，P=0.000)。研究組CKD3期患者的NGAL為(295.86±136.73)ng/ml，與CKD4期患者(302.51±139.86)ng/ml無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=0.261，P=0.397)。

2.2 兩組患者的腎功能及蛋白尿比較 研究組患者的SCr含量及腎小球?yàn)V過(guò)率(eGFR)水平明顯低于對(duì)照組，CRP及尿蛋白量含量明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者的腎功能及蛋白尿比較

2.3 NGAL水平與腎功能及蛋白尿相關(guān)性分析 CKD患者的NGAL與eGFR呈負(fù)相關(guān)(r=-0.751，P=0.003)，CKD患者NGAL與尿蛋白水平、SCr和CRP呈正相關(guān)(r=0.343，P=0.012；r=0.135，P=0.039；r=0.114，P=0.046)。

3 討 論

CKD已成為嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康的公共衛(wèi)生問(wèn)題〔4〕。臨床以SCr、CRP等腎功能指標(biāo)和尿蛋白作為篩查CKD的標(biāo)志物。血清SCr、CRP的檢測(cè)雖然簡(jiǎn)便易行，但容易受性別、肌肉含量等諸多因素的影響，有時(shí)不能真實(shí)反映患者水平，尤其是不能發(fā)現(xiàn)eGFR的早期下降，容易使患者錯(cuò)過(guò)最佳的治療時(shí)機(jī)〔5〕。NGAL在胃腸道、呼吸道、腎小管等的上皮細(xì)胞已廣泛存在，它結(jié)合不同疏水性的配基，具有不同的功能。最近研究表明NGAL在腎臟缺血、腎實(shí)質(zhì)性損害、腎毒性損害等腎損傷，患者的血、尿以及近端和遠(yuǎn)端腎小管中存在高表達(dá)，且較易被檢測(cè)到〔6〕。

本研究發(fā)現(xiàn)，CKD患者NGAL、SCr、eGFR、CRP及尿蛋白量水平與健康志愿者間存在差異。這與CKD患者腎小球?yàn)V過(guò)膜破壞嚴(yán)重，腎小管重吸收功能差，致使蛋白容易從腎小管滲漏，且不易被重吸收有關(guān)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，CKD患者NGAL水平的變化與腎功能和蛋白尿間存在一定的相關(guān)性。有研究表明，NGAL在腎損傷時(shí)表達(dá)迅速上調(diào)，且明顯高于SCr、CRP等傳統(tǒng)腎損傷標(biāo)志物水平〔7〕。CKD早期中性粒細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞等產(chǎn)生少量的NGAL，就可以被腎小球自由濾過(guò)，幾乎全部被近端腎小管重吸收，轉(zhuǎn)運(yùn)至近端腎小管細(xì)胞，誘導(dǎo)上皮細(xì)胞再生和抑制凋亡來(lái)保護(hù)腎臟〔8〕。另外在CKD患者中由于存在類(lèi)似急性腎損傷(AKI)背景下的防御代償機(jī)制，NGAL是腎小管細(xì)胞在長(zhǎng)期慢性刺激表達(dá)的產(chǎn)物，比SCr、CRP等更能反映慢性腎臟病變，NGAL蛋白主要來(lái)源于腎小管細(xì)胞，NGAL升高使eGFR下降導(dǎo)致NGAL清除能力降低，或者隨著腎功能下降功能紊亂，激活炎癥系統(tǒng)，NGAL作為適應(yīng)性應(yīng)答而含量增加〔9〕。蛋白尿程度與腎功能惡化呈正相關(guān)，是腎病的重要預(yù)測(cè)因子，研究顯示，CKD患者NGAL與尿蛋白水平呈正相關(guān)，這可能是因?yàn)槟I小球?yàn)V過(guò)膜破壞嚴(yán)重，腎小管重吸收功能差，蛋白漏出不易被吸收〔10〕。本研究發(fā)現(xiàn)NGAL與SCr和CRP正相關(guān)。這是因?yàn)槟I功能的減退與炎癥反應(yīng)之間存在密切的聯(lián)系，CRP是反映炎癥和組織損傷的敏感指標(biāo)。

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3 刁宗禮，劉 莎，郭 王，等.慢性腎臟病繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)的發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2015;15(31)：6186-9.

4 黃 成.探討聯(lián)合檢測(cè)血清Cys-C和RBP對(duì)慢性腎臟病早期腎功能診斷的意義〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2015;19(10)：1676-9.

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6 Palazzuoli A，Ruocco G，Beltrami M，etal.Admission plasma neutrophil gelatinase associated lipocalin(NGAL)predicts worsening renal function during hospitalization and post discharge outcome in patients with acute heart failure〔J〕.Acute Card Care，2014;16(3)：93-101.

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8 張雅麗，崔麗艷，張 捷，等.中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白在急性腎損傷中的保護(hù)作用〔J〕.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2015;30(1)：80-4.

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10 Shen SJ，Hu ZX，Li QH，etal.Implications of the changes in serum neutrophil gelatinase-associated lipocalin and cystatin C in patients with chronic kidney disease〔J〕.Nephrology(Carlton)，2014;19(3)：129-35.

〔2015-12-29修回〕

(編輯 袁左鳴)

張曉良(1966-)，男，博士，副主任醫(yī)師，主要從事腎臟纖維化發(fā)生機(jī)制研究。

施 璇(1981-)，女，碩士，住院醫(yī)師，主要從事腎臟纖維化發(fā)生機(jī)制研究。

R692.3

A

1005-9202(2016)21-5386-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.21.080