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        Ag85A抗體IgG表型在結核性胸膜炎診斷中的應用

        2016-12-06 03:35:31蘇永勝張秀芳華樹成
        中國老年學雜志 2016年21期
        關鍵詞:胸膜炎結核性胸膜

        蘇永勝 宋 磊 李 丹 張秀芳 華樹成

        (吉林大學第一醫(yī)院,吉林 長春 130021)

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        Ag85A抗體IgG表型在結核性胸膜炎診斷中的應用

        蘇永勝 宋 磊 李 丹 張秀芳 華樹成

        (吉林大學第一醫(yī)院,吉林 長春 130021)

        目的 探討Ag85A抗體IgG在結核性胸膜炎患者外周血清及胸腔積液中的表達水平并探索其對臨床診斷與預后判斷的指導意義。方法 收集53例結核性胸膜炎患者,38例惡性腫瘤胸膜轉移患者和28例良性胸水患者的外周血及胸腔積液,并收集12例正常人的外周血,ELISA法檢測血清和胸腔積液中Ag85A抗體IgG的表達,并對胸腔積液進行總蛋白和乳酸脫氫酶(LDH)檢查。結果 與腫瘤胸膜轉移患者、良性胸水患者和正常人相比,結核性胸膜炎患者外周血及胸腔積液中Ag85A抗體IgG水平明顯升高(P<0.01);而腫瘤胸膜轉移患者、良性胸水患者和正常人體液中的Ag85A抗體IgG水平無明顯差異(P>0.05)。胸腔積液中Ag85A抗體IgG吸光度為1.435,可作為診斷結核性胸膜炎的cut-off值,其敏感性和特異性分別為79.2%和87.2%。結核性胸膜炎患者胸腔積液中Ag85A抗體IgG水平與胸腔積液中總蛋白質和LDH含量呈正相關。結論 胸腔積液中Ag85A抗體IgG水平可作為結核性胸膜炎診斷和預后判斷的生物學標志物。

        結核性胸膜炎;Ag85A

        結核性胸膜炎診斷的金標準是結核菌的檢出或活檢胸膜有典型結核感染的病理特TGH ,但檢出率低或創(chuàng)傷性操作限制了其在臨床上的廣泛應用〔1〕。本文通過對Ag85A抗體IgG在各種胸膜炎中的表達水平進行比較,初步探討其在結核性胸膜炎診斷中的應用價值。

        1 資料與方法

        1.1 研究對象 收集2012年12月至2015年6月吉林大學第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科住院和門診患者共131例,其中結核性胸膜炎53例,均為首次發(fā)病,在診斷之前未經(jīng)任何抗結核藥物治療;惡性腫瘤胸膜轉移患者38例,非結核感染胸膜炎28例,12例健康對照者(HC)。見表1。

        表1 入組患者的一般資料

        結核性胸膜炎診斷符合Thwaites診斷標準〔2〕。同時收集惡性腫瘤胸膜轉移患者,非結核菌感染性胸膜炎和正常人作為對照。所有患者排除合并其他傳染性疾病如艾滋病(HIV)、麻疹和傷寒等,除外近1 w出現(xiàn)心衰、燒傷、外傷和手術等應激情況者。

        1.2 主要試劑和儀器 96孔板(corning,美國),Ag85A抗原(Abcam,美國),HRP標記的抗人IgG抗體(Abcam,美國),酶標儀(Bio-Tek,美國)。

        1.3 檢測方法 采集靜脈血5 ml,不抗凝,800 r/min離心10 min后取血清。并留取胸腔積液5 ml,離心后取上清液分裝儲存于-80℃冰箱。測定時將樣品放于冰上解凍,Ag85A抗原包被96孔板,按照ELISA方法對樣品中Ag85A抗體IgG進行檢測。在450 nm處測各樣品的OD值。

        1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS15.0軟件,兩組間比較采用t檢驗,多組間比較采用方差分析。胸腔積液中Ag85A抗體IgG對結核性胸膜炎診斷價值的評定采用受試者工作特征曲線(ROC)分析,相關性分析采用Spearman相關法。

        2 結 果

        2.1 血清和胸腔積液中Ag85A抗體IgG的表達 結核性胸膜炎患者血清中Ag85A抗體IgG的OD值為(2.66 ± 0.17)g/L;腫瘤胸膜轉移患者、非結核感染性胸膜炎和健康對照血清中的Ag85A抗體IgG的OD值分別為(1.78 ± 0.29)g/L、(1.93±0.29)g/L,結核性胸膜炎組患者血清中Ag85A抗體IgG水平明顯高于后三者(P<0.01)。結核性胸膜炎患者胸腔積液中的Ag85A抗體IgG的OD值為(107.8±4.94)ng/L,也較腫瘤胸膜轉移患者(73.58±3.76)ng/L、非結核感染性胸膜炎和健康對照(76.25±5.09)ng/L明顯升高(P<0.01)。

        2.2 Ag85A抗體IgG對結核性胸膜炎的診斷價值 胸腔積液Ag85A抗體IgG可作為診斷結核性胸膜炎的生物學標志物,其最佳診斷切點值(cut off)為OD值1.435(AUC=0.866,P<0.01),此值在診斷結核性胸膜炎時的敏感度為79.2%,特異度為87.2%。見圖1。

        圖1 胸腔積液Ag85A抗體IgG診斷價值的ROC分析

        2.3 Ag85A抗體IgG與結核性胸膜炎病情的相關性 結核性胸膜炎患者胸腔積液中的Ag85A抗體IgG水平與胸水中總蛋白以及乳酸脫氫酶(LDH)含量呈正相關,相關性分別為0.373(P<0.01)和0.438(P<0.01)。

        3 討 論

        Ag85A是結核分支桿菌合成的一種外分泌蛋白,分子量約為35 kD,與Ag85B和Ag85C構成復合物,具有分支桿菌酸轉移酶的活性,在結合菌細胞壁的生物合成過程中發(fā)揮著重要作用〔3〕。Ag85A曾被當做生物標志物用于結合診斷的研究。Kumar等〔4〕研究顯示,在對0~18歲的人群中,Ag85A作為結核病診斷的的敏感性為56%,而特異性為72%。由于Ag85A作為結核菌的一種重要的抗原,可誘導機體產(chǎn)生強烈的免疫反應。因此,作為Ag85A的抗體表型被推測在結核病患者體內(nèi)表達增加,并可用于結核診斷的標志物。Osada-Oka等〔5〕發(fā)現(xiàn),Ag85A在活動性和陳舊性結核病患者的血漿中的水平明顯高于正常人,用于陳舊性結核的診斷敏感性為86.7%。Senoputra等〔6〕的研究同樣顯示Ag85A在結核病患者血清中表達增高,并與其他抗結核抗體水平存在相關性。但Ag85A抗體在結核性胸膜炎患者胸水中的表達以及對結核性胸膜炎的診斷意義尚未完全清楚。本研究與前人的研究結果一致。本研究還發(fā)現(xiàn),與健康人、其他感染性胸膜炎和腫瘤胸膜轉移患者比較,結核性胸膜炎患者的胸腔積液中Ag85A抗體IgG水平也發(fā)生上調(diào)。

        目前依靠胸腔積液常規(guī)檢查只能分辨積液的來源是滲出性還是漏出性,結核性胸膜炎的診斷仍靠結核桿菌和(或)結核典型病灶的檢出。但由于結核性胸膜炎胸腔積液中結核菌檢出率非常低,典型病灶的檢查需要依賴于有創(chuàng)性的胸膜活檢。因此結核性胸膜炎的診斷特別是早期診斷仍是一個重要問題。本研究發(fā)現(xiàn)胸腔積液Ag85A抗體IgG水平還可作為區(qū)別結核性胸膜炎和其他胸膜炎或腫瘤的生物學標志物。

        Ag85A抗體IgG高表達是結核菌感染和機體免疫系統(tǒng)相互作用的體現(xiàn)。胸腔積液總蛋白和LDH含量反映結核性胸膜炎病情的嚴重程度,常被應用于判斷結核性胸膜炎預后的兩項重要指標。本研究表明,除了作為診斷依據(jù)外,胸腔積液Ag85A抗體IgG水平還可作為評估結核性胸膜炎疾病嚴重程度的重要指標。

        1 Wallis RS,Maeurer M,Mwaba P,etal.Tuberculosis-advances in development of new drugs,treatment regimens,host-directed therapies,and biomarkers〔J〕.Lancet Infect Dis,2016;16(4):34-46.

        2 Thwaites GE,Chau TT,Stepniewska K,etal.Diagnosis of adult tuberculous meningitis by use of clinical and laboratory features〔J〕.Lancet,2002;360(9342):1287-92.

        3 Belisle JT,Vissa VD,Sievert T,etal.Role of the major antigen of mycobacterium tuberculosis in cell wall biogenesis〔J〕.Science,1997;276(5317):1420-2.

        4 Kumar G,Dagur PK,Singh M,etal.Diagnostic potential of Ag85C in comparison to various secretory antigens for childhood tuberculosis〔J〕.Scand J Immunol,2008;68(2):177-83.

        5 Osada-Oka M,Tateishi Y,Hirayama Y,etal.Antigen 85A and mycobacterial DNA-binding protein 1 are targets of immunoglobulin G in individuals with past tuberculosis〔J〕.Microbiol Immunol,2013;57(1):30-7.

        6 Senoputra MA,Shiratori B,Hasibuan FM,etal.Diagnostic value of antibody responses to multiple antigens from Mycobacterium tuberculosis in active and latent tuberculosis〔J〕.Diagn Microbiol Infect Dis,2015;83(3):278-85.

        〔2015-11-19修回〕

        (編輯 袁左鳴)

        吉林省科技廳資助項目(No.20130413030GH)

        華樹成(1961-),男,教授,主要從事呼吸疾病研究。

        蘇永勝(1991-),男,碩士,主要從事呼吸疾病研究。

        R561.1

        A

        1005-9202(2016)21-5373-02;

        10.3969/j.issn.1005-9202.2016.21.074

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