張海霞，馮雪云，張林昌

(天津市第五中心醫(yī)院，天津300450)

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MGD伴蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥患者淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平與眼部體征的關(guān)系

張海霞，馮雪云，張林昌

(天津市第五中心醫(yī)院，天津300450)

目的 觀察瞼板腺功能障礙(MGD)伴蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥患者淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1受體拮抗劑(IL-1Ra)水平變化，并探討其與眼部體征的關(guān)系。方法 選擇MGD伴蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥患者90例(觀察組)及健康志愿者30例(正常對(duì)照組)，均行淚河高度檢測(cè)、淚液分泌試驗(yàn)、淚膜破裂時(shí)間測(cè)算、角膜結(jié)膜熒光染色評(píng)分、瞼板腺功能評(píng)分5項(xiàng)檢查；用ELISA法檢測(cè)淚液中fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平；用Spearman秩相關(guān)分析fractalkine/CX3CL1、IL-1 Ra水平變化與患者眼部體征的關(guān)系。結(jié)果 兩組淚河高度、淚膜破裂時(shí)間、角膜結(jié)膜熒光染色評(píng)分、瞼板腺功能評(píng)分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。觀察組淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平高于對(duì)照組(P均<0.05)。觀察組淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平與淚液分泌量呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.475、-0.684，P均<0.05)，IL-1Ra水平與淚膜破裂時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.529，P<0.05)。結(jié)論 MGD伴蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥患者淚液中fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平升高；IL-1Ra與淚膜穩(wěn)定性、淚液分泌有關(guān)，F(xiàn)ractalkine/CX3CL1與淚液分泌有關(guān)。

干眼癥，蒸發(fā)過強(qiáng)型；瞼板腺功能障礙；fractalkine/CX3CL1；白細(xì)胞介素1受體拮抗劑；眼部體征

干眼癥是由于淚液的量、質(zhì)或流體動(dòng)力學(xué)異常引起的淚膜不穩(wěn)定和(或)眼表?yè)p害，從而導(dǎo)致眼部不適及視功能障礙的一類疾病[1]。炎癥反應(yīng)是干眼癥發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。有研究提出，干眼癥急性和慢性炎癥機(jī)制假說[2]，從炎癥方面進(jìn)一步闡明干眼癥的發(fā)病機(jī)制和臨床合理治療方法。瞼板腺功能障礙(MGD)是一種慢性、彌漫性瞼板腺異常疾病。據(jù)報(bào)道超過87.6%的干眼癥患者與MGD有關(guān)[3]。本研究觀察由于MGD導(dǎo)致的蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1受體拮抗劑(IL-1Ra)水平變化，并分析二者與眼部體征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年2月～2015年1月本院就診的干眼癥患者90例(觀察組)，均符合干眼癥診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，男27例、女63例，年齡(57.7±12.5)歲?；颊呷脒x標(biāo)準(zhǔn)：干眼相關(guān)癥狀至少持續(xù)存在6個(gè)月；近3個(gè)月內(nèi)除人工淚液外無其他治療史；停用藥物至少1周；均為伴有瞼緣改變和瞼板腺疾病；有或無眼表?yè)p害；伴有異常淚膜破裂；有正常淚液生成；角結(jié)膜染色為陽(yáng)性。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往或現(xiàn)有其他眼病史；有手術(shù)或隱形眼鏡配戴史；其他系統(tǒng)疾病(除外不需藥物控制的高血壓或高脂血癥)。同期選取健康志愿者30例作為對(duì)照組，男8例、女22例，年齡(53.1±8歲)；無妊娠、無眼病史、無眼部異常癥狀體征、無隱形眼鏡配戴史、未服用任何藥物。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。兩組均知情同意。

1.2 眼部體征檢查 ①淚河高度檢測(cè)：利用裂隙燈測(cè)量下瞼中央淚河高度。②淚液分泌試驗(yàn)：采用美國(guó)博士倫公司提供的Whatmann 41號(hào)濾紙(5 mm×35 mm)，測(cè)量患者不滴用表面麻醉藥狀態(tài)下濾紙5 min的濕長(zhǎng)代表淚液分泌量。③淚膜破裂時(shí)間測(cè)算：將1%熒光素鈉溶液滴入結(jié)膜囊內(nèi)，患者連續(xù)輕微眨眼3次后計(jì)時(shí)[4]，重復(fù)3次取平均值。④眼表?yè)p害程度評(píng)價(jià)：采用角膜結(jié)膜熒光染色評(píng)分。將1%熒光素鈉滴入結(jié)膜囊內(nèi)，在藍(lán)鈷光裂隙燈下觀察，按牛津方案[5]行角膜結(jié)膜染色分級(jí)。角膜和結(jié)膜各取5個(gè)區(qū)域計(jì)分：中央、下方、上方、鼻側(cè)和顳側(cè)，各個(gè)區(qū)域均1分，總得分為5個(gè)區(qū)域之和，得分越高眼表?yè)p害越嚴(yán)重。⑤瞼板腺功能評(píng)分：無癥狀、無異常體征，計(jì)0分；無癥狀或輕微癥狀，臨床體征示瞼脂分泌異常，無新生血管，無充血，計(jì)1分；輕到中度癥狀，臨床體征示瞼脂分泌異常，瞼緣變鈍圓或增厚，輕度新生血管增生有充血，計(jì)2分；中到重度癥狀，臨床體征示瞼脂分泌異常，瞼緣明顯增厚增生，新生血管明顯增生充血，計(jì)3分。統(tǒng)計(jì)各項(xiàng)總分。

1.3 淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra檢測(cè) 自外眥角用微量吸管無創(chuàng)傷性采集淚液1 μL，按1∶10比例稀釋入含Beadlyte細(xì)胞因子分析緩沖液(冰預(yù)冷)的無菌試管。采用ELISA法檢測(cè)淚液炎性因子fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平。

2 結(jié)果

2.1 兩組眼功能檢查指標(biāo)比較 除濾紙濕長(zhǎng)外，兩組淚河高度、淚膜破裂時(shí)間、角膜結(jié)膜熒光染色評(píng)分、瞼板腺功能評(píng)分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。

表1 兩組眼功能檢查指標(biāo)比較±s)

2.2 兩組淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平比較 觀察組淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平[(965±1)、(50 216±1)pg/mL]高于對(duì)照組[(73±4)、(6 875±4)pg/mL]，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

2.3 觀察組淚液fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra水平與眼功能檢查指標(biāo)的關(guān)系 經(jīng)Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，觀察組淚液fractalkine/CX3CL1水平與淚液分泌量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.475，P<0.05)，與淚膜破裂時(shí)間、淚河高度、角膜結(jié)膜熒光染色評(píng)分、瞼板腺功能評(píng)分無相關(guān)性。觀察組淚液IL-1Ra水平與淚液分泌量(濾紙濕長(zhǎng))呈負(fù)相關(guān)(r=-0.684，P<0.05)，與淚膜破裂時(shí)間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.529，P<0.05)，與淚河高度、角膜結(jié)膜熒光染色評(píng)分、瞼板腺功能評(píng)分無相關(guān)性。

3 討論

干眼癥是一種眼表炎癥，臨床上常發(fā)現(xiàn)患者體征和癥狀不相符。特別是輕、中度干眼癥患者，雖然只具有輕、中度眼表體征，卻有中、重度臨床癥狀[6]。多數(shù)干眼癥與MGD有關(guān)，通過癥狀詢問和裂隙燈下體征檢查即可確診MGD。在確診MGD的基礎(chǔ)上，如果患者出現(xiàn)淚膜破裂時(shí)間異常即可確診為MGD致蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼。同時(shí)，患者可伴有角膜熒光染色的異常。眼表與淚膜相互依賴，是構(gòu)成眼部微環(huán)境的重要組成部分。淚膜的穩(wěn)定與神經(jīng)、激素的精細(xì)調(diào)節(jié)有關(guān)，它們之間構(gòu)成一個(gè)整體功能單位，其中任何一個(gè)環(huán)節(jié)的異常都可導(dǎo)致淚液質(zhì)、量及淚液動(dòng)力學(xué)的異常，從而導(dǎo)致淚膜的不穩(wěn)定和眼表異常，最終導(dǎo)致干眼病。免疫炎癥反應(yīng)是各種類型干眼癥發(fā)病的共同機(jī)制，瞼板腺分泌的淚液是組成淚膜脂質(zhì)層的主要成分，瞼板腺功能障礙，導(dǎo)致脂質(zhì)合成和分泌的減少，淚膜破裂時(shí)間縮短，淚膜蒸發(fā)率升高，是導(dǎo)致蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥的主要原因。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組淚河高度高于對(duì)照組，其可能與干眼癥淚液清除延遲、淚液表面張力增大有關(guān)。觀察組淚膜破裂時(shí)間短于對(duì)照組，角膜結(jié)膜熒光染色評(píng)分高于對(duì)照組，說明干眼癥影響了眼表的穩(wěn)定性，已對(duì)眼表造成損害。觀察組瞼板腺功能評(píng)分高于對(duì)照組，說明患者為MGD伴蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥。

Fractalkine/CX3CL1屬于CX3C類炎癥趨化因子，具有特殊的分子結(jié)構(gòu)，既有可溶性形態(tài)又可以膜結(jié)合形態(tài)存在[7]。Fractalkine/CX3CR1參與眾多疾病的病理過程，通過調(diào)節(jié)單核細(xì)胞浸潤(rùn)及下游炎癥因子釋放，直接或間接影響纖維增生過程。正常人淚液中含有一定量的fractalkine/CX3CL1,本研究發(fā)現(xiàn)，在MGD致蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥患者淚液中水平升高，可能會(huì)促進(jìn)眼表局部炎癥的進(jìn)展。目前已有人進(jìn)行了Fractalkine/CX3CL1對(duì)Sj?gren綜合征動(dòng)物模型作用的研究[8]，但是，其在人類干眼癥中的具體作用機(jī)制仍不明確。促炎性細(xì)胞因子IL-1參與人類多種炎癥性疾病(如感染性休克、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等)的病理過程，是一種重要的炎癥和免疫介質(zhì)。IL-1與許多眼科疾病相關(guān)，特別是與角膜及眼表疾病(如圓錐角膜、無菌性角膜潰瘍等)關(guān)系尤為密切。IL-1有IL-1α和IL-1β兩種促炎性形式。有研究觀察到淚液中成熟形式的IL-1β濃度與角膜熒光染色檢測(cè)眼表破壞的嚴(yán)重程度相關(guān)，IL-1β在干眼癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用[9]。在許多炎性疾病中，IL-1的活性是通過其天然的受體拮抗劑IL-1Ra來調(diào)節(jié)的。正常淚液中存在高水平IL-1Ra，濃度大約是IL-1α和IL-1β濃度的15～100倍。這可能與正常狀態(tài)下淚液維持穩(wěn)態(tài)，抑制IL-1介導(dǎo)的眼表炎癥反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)[10]。IL-1Ra基因包含2個(gè)內(nèi)含子，有著眾多的多態(tài)性等位基因；IL-1Ra競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合IL-1受體后，并不會(huì)激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路，而是阻斷下游級(jí)聯(lián)炎癥反應(yīng)，作為IL-1活性抑制劑發(fā)揮作用。本研究發(fā)現(xiàn)，在MGD所致干眼癥患者淚液中有高水平的IL-1Ra。IL-1Ra基因作為可誘導(dǎo)基因，在炎癥狀態(tài)下其表達(dá)可上調(diào)，這種表達(dá)上調(diào)在被脂多糖刺激下培養(yǎng)的人角膜上皮細(xì)胞中也有發(fā)現(xiàn)[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，fractalkine/CX3CL1、IL-1Ra在觀察組淚液中表達(dá)明顯增高。兩種炎性因子水平均與淚液分泌量呈負(fù)相關(guān)，說明兩種炎性因子均影響了淚液的分泌，在某種意義上顯示炎性因子可能導(dǎo)致淚液分泌不足型干眼癥。IL-1Ra水平與淚膜破裂時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，說明IL-1Ra影響了淚液分泌功能的穩(wěn)定性。淚液Fractalkine/CX3CL1水平未顯示與淚膜破裂時(shí)間的相關(guān)性，可能與本研究病例不足、研究時(shí)間短有關(guān)，其結(jié)論尚待進(jìn)一步證實(shí)。

目前研究證實(shí)，抗炎治療對(duì)MGD有效。糖皮質(zhì)激素可以顯著改善MGD患者的癥狀和體征，其效果優(yōu)于非甾體類抗炎藥[11]。進(jìn)一步研究炎性因子的作用，明確下游信號(hào)通路的傳導(dǎo)途徑，采取多效性抑制甚至阻斷其下游信號(hào)因子，可能會(huì)為MGD伴蒸發(fā)過強(qiáng)型干眼癥的治療提供新的方向。

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