林曉婕，梁璋成，黃 飛，任香蕓，林曉姿，何志剛*

(1. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究所，福建 福州 350003；2.福建省農(nóng)產(chǎn)品(食品)加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 福州 350003)

?

紅曲米糖化酶提取工藝及其糖化力測(cè)定方法選優(yōu)

林曉婕1,2，梁璋成1,2，黃 飛1,2，任香蕓1,2，林曉姿1,2，何志剛1,2*

(1. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究所，福建 福州 350003；2.福建省農(nóng)產(chǎn)品(食品)加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 福州 350003)

研究了固液比、提取溫度和時(shí)間對(duì)制備的福建紅曲米粗酶液酶活的影響，比較了以碘量法、DNS法和菲林試劑法的紅曲米糖化力測(cè)定結(jié)果，并進(jìn)行紅曲黃酒釀造驗(yàn)證糖化力檢測(cè)試驗(yàn)。結(jié)果表明，紅曲米糖化酶最佳提取方式為選擇固液比(m∶V)=1g∶25mL，紅曲米粉末于緩沖液溶解搖勻后立即過(guò)濾，取濾液檢測(cè)。碘量法與DNS法均為紅曲米糖化酶適宜的檢測(cè)方法，兩種方法檢測(cè)數(shù)據(jù)具有可比性。從時(shí)效性考慮，碘量法適宜少量樣品測(cè)定，DNS法適宜用于快速測(cè)定多個(gè)樣品。經(jīng)釀造驗(yàn)證，紅曲米糖化力的測(cè)定值與以其為糖化劑的黃酒出酒率檢測(cè)結(jié)果是一致。

紅曲米；糖化酶；糖化力

紅曲米是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵食品，以秈稻、粳稻、糯米等稻米為原料，用紅曲霉菌發(fā)酵而成，在釀造福建黃酒過(guò)程中，發(fā)揮了提供色澤、風(fēng)味和糖化等作用[1-2]。糖化力是衡量紅曲米糖化力作用強(qiáng)弱的一個(gè)重要指標(biāo)。然而，如何判斷紅曲米糖化力強(qiáng)弱至今沒(méi)有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。糖化酶提取方法直接影響到紅曲米糖化力測(cè)定的高低，提取方式就有很多種，如溫小英[3]等采用35℃浸提1 h的方法提取，汪志君[4]等采用30℃浸提1 h，馬歌麗[8]等采用緩沖液直接提取。不同的提取方法對(duì)糖化酶活力影響不同，高溫長(zhǎng)時(shí)的提取方法有可能造成酶活損失。同時(shí)，測(cè)定糖化力的方法有很多，國(guó)標(biāo)針對(duì)糖化酶制劑采用碘量法[5]，該方法準(zhǔn)確可靠，操作復(fù)雜，尤其在處理大量樣品時(shí)，分析速度慢，對(duì)糖化力較低的樣品則顏色變化不明顯，判斷誤差較大；胡衛(wèi)明[6]、馬耀宏[7]等采用菲林試劑法，此法應(yīng)用較為廣泛，但張鳳英[8]等認(rèn)為其影響因素較多，且操作繁瑣、時(shí)間長(zhǎng)，測(cè)定技術(shù)要求高，結(jié)果差異大；白利濤[9]、馬歌麗[10]等研究了DNS法測(cè)定糖化酶活力，認(rèn)為DNS法和碘量法在精密度和正確度上都無(wú)顯著差異，操作簡(jiǎn)便，對(duì)于多個(gè)樣品可實(shí)現(xiàn)快速測(cè)定；許明明[11]等采用試飯法直接測(cè)定。本研究考察了固液比、提取溫度和提取時(shí)間對(duì)粗酶提取液酶活的影響，同時(shí)對(duì)比了碘量法、DNS法和菲林試劑法，并對(duì)釀造紅曲米糖化力檢測(cè)進(jìn)行了驗(yàn)證試驗(yàn)，以期為釀造紅曲米檢測(cè)技術(shù)規(guī)程的制訂以及紅曲米糖化力評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 原料

紅曲米，由福建永春、平湖、三明、寧德等地收集。

1.2 儀器與藥品

GX-04多功能粉碎機(jī)，上海高翔食品機(jī)械廠；電熱恒溫水浴鍋；BS224S電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試劑 0.05 mol·L-1乙酸-乙酸鈉緩沖溶液(pH4.6)，DNS試劑，200 g·-1氫氧化鈉，20 g·-1可溶性淀粉溶液，0.1%葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3.2 粗酶液提取 紅曲米用多功能粉碎機(jī)打成粉末(80目)，精確稱取適量粉末，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)以0.05 mol·L-1乙酸-乙酸鈉緩沖溶液為溶劑，經(jīng)一定溫度、時(shí)間下浸提后抽濾，洗滌3次，收集濾液定容至250 mL，待用。

1.3.3 單因素試驗(yàn) 為了考察固液比、提取溫度和時(shí)間對(duì)粗酶提液酶活的影響，按1.3.2方法進(jìn)行以下3個(gè)單因素試驗(yàn)。固液比(m/g∶V/mL)分別為1∶100、1∶50、1∶25、2∶25、3∶25、4∶25、5∶25，在40℃水浴中進(jìn)行浸提40 min；以較優(yōu)固液比，在4、20、30、40、50℃水浴中浸提40 min；以較優(yōu)固液比，在最適溫度水浴中分別進(jìn)行浸提0、10、20、30、40 min。每處理重復(fù)2次。

1.4 3種檢測(cè)方法比較

1.4.1 碘量法 參考GB 8276-2006，略作修改。

糖化酶酶解：取兩支50 mL比色管(A、B管)，分別加入可溶性淀粉溶液10 mL和乙酸-乙酸鈉緩沖液8 mL，搖勻。于40℃恒溫水浴中預(yù)熱5 ～10 min。在B管中加入待測(cè)酶液10.0 mL，立即記時(shí)，搖勻。在此溫度下準(zhǔn)確反應(yīng)60 min后，立即向A、B管中各加氫氧化鈉溶液0.2 mL，搖勻，同時(shí)將兩管取出，迅速用水冷卻，并于A管中補(bǔ)加待測(cè)酶液10.0 mL作為空白對(duì)照。

測(cè)定：吸取上述A、B兩管中的反應(yīng)液各5.0 mL，分別于兩個(gè)碘量瓶中，準(zhǔn)確加入碘標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0 mL，再加氫氧化鈉溶液15 mL，邊加邊搖勻，并于暗處放置15 min，取出。用水淋洗瓶蓋，加入硫酸溶液2 mL，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定藍(lán)紫色溶液，直至剛好無(wú)色為其終點(diǎn)，分別記錄空白和樣品消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積(VA、VB)。

紅曲米酶活力單位按下式計(jì)算：

X=(VA-VB)×cST×cG×(Vt/Vx)×(1/10)×n

式中：X為樣品的酶活力單位即1 g紅曲米在40℃、pH 4.6的條件下，1 h水解可溶性淀粉的產(chǎn)生1 mg葡萄糖為1個(gè)酶活力單位(U·g-1)；VA為滴定空白時(shí)，消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積(mL)；VB為滴定樣品時(shí)，消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積(mL)；cST為硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的準(zhǔn)確濃度(mol·L-1)；cG為葡萄糖的摩爾質(zhì)量， 90.05 g·mol-1；Vt為反應(yīng)液的總體積， 24.2 L；Vx為吸取反應(yīng)液的體積， 5 L；n為稀釋倍數(shù)。

1.4.2 DNS法

(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：準(zhǔn)確稱取105～110℃干燥后的葡萄糖50 mg，用蒸餾水溶解，定容至50 mL容量瓶中，配置成1 mg·mL-1標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別稀釋為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別吸取0.5 mL，分別于在25 mL 比色管中，加入1.5 mL DNS試劑混勻，在沸水浴中加熱5 min后取出迅速冷卻至室溫，加水10 mL。以試劑空白作參比，用1 cm比色皿在520 nm測(cè)定吸光度。以葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得線性回歸方程。

(2)糖化力測(cè)定：糖化酶酶解方法與碘量法的相同測(cè)定方法參考馬歌麗[10]、孫淑琴[12]，上述A、B兩管中的反應(yīng)液稀釋至0.5 mL，分別于在25 mL 比色管中，加入1.5 mL DNS試劑在沸水浴中加熱5 min后取出迅速冷卻至室溫，加水10 mL。以試劑空白作參比，用1 cm比色皿在520 nm測(cè)定吸光值，分別通過(guò)線性回歸方程求出葡萄糖濃度。

紅曲米酶活力單位按下式計(jì)算：

X= (cB-cA)×(Vt/VEX)×(VET/m)×n

式中：X為樣品的酶活力，即1 g紅曲米在40℃、pH 4.6的條件下，1 h水解可溶性淀粉的產(chǎn)生1 mg葡萄糖為1個(gè)酶活力單位(U·g-1)；cB為樣品管的葡萄糖質(zhì)量濃度 (mg·mL-1)；cA為樣品空白管的葡萄糖質(zhì)量濃度 (mg·mL-1)；Vt為反應(yīng)液的總體積，單位為毫升(28.2 mL)；VEX為吸取待測(cè)酶液的體積，為10 mL；VET為提取待測(cè)酶液的總體積，為25 mL；m為稱取紅曲米粉末重量 (g)；n為稀釋倍數(shù)。

1.4.3 菲林試劑法 方法參考馬耀宏[7]等，略作修改。吸取25 mL 12%可溶性淀粉溶液，置于50 mL容量瓶，于35℃水浴預(yù)熱10 min，加入5 mL酶提取液，搖勻，于35℃糖化1 h，迅速加入15 mL 0.1 mol·L-1NaOH，終止酶解反應(yīng)，冷卻至室溫，定容。

吸取斐林試劑甲、乙液各5 mL，加入適量的0.1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液(使滴定時(shí)消耗0.1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液在1 mL以內(nèi))，準(zhǔn)確加入5 mL上述酶解液，搖勻，于電爐上加熱至沸騰，立即用0.1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液滴定至藍(lán)色消失，操作在1 min內(nèi)完成，并同時(shí)做空白液滴定。

計(jì)算公式：

X=(V0-V)×C×(1/m)×105×n

式中：X為樣品的酶活力單位即1 g紅曲米在40℃、pH 4.6的條件下，1 h水解可溶性淀粉的產(chǎn)生1 mg葡萄糖為1個(gè)酶活力單位(U·g-1)；V0為滴定空白時(shí)，消耗0.1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液體積 (mL)；V為滴定樣品時(shí)，消耗0.1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液體積 (mL)；c為標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液質(zhì)量濃度 (g·mL-1)；m為紅曲重量，單位為(g)；n為稀釋倍數(shù)。

1.5 紅曲黃酒釀造驗(yàn)證試驗(yàn)

采用傳統(tǒng)發(fā)酵法，以糯米為原料，以5種紅曲米為糖化劑，糯米經(jīng)浸泡、蒸煮攤涼，以米飯∶水為1∶1落缸，按大米用量的10.0%接種紅曲米，控溫30℃發(fā)酵，發(fā)酵72 h后離心，檢測(cè)酒精度和出酒率。

酒精度：采用高效液相色譜法測(cè)定酒精度[13]。

分析：學(xué)生都能用勾股定理求出AB的長(zhǎng)是5，易知 A’(2，0)折疊吟AOB 交 y軸于點(diǎn)C，構(gòu)造吟OA’C是直角三角形，設(shè)OC=x，則AC=4-x，在Rt吟OA’C 中由勾股定理得 OC2+OA2=CA’2，即 x2+22=(4-x)2，得到x=1.5，即 C(0，1.5)，求直線 BC 的解析式，知道 B(-3，0)，C(0，1.5)，用待定系數(shù)法求得y=0.5x+1.5。

殘?zhí)?、總酸測(cè)定：參考GB/T 13662-2008 黃酒[14]中總糖、總酸的檢測(cè)。

出酒率(以成品酒15度計(jì))的測(cè)定：出酒率%=酒精度(%)×[出酒量(kg)/大米用量(kg)×100%

1.6 數(shù)據(jù)分析

采用DPS數(shù)據(jù)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 液固比對(duì)粗酶提取的影響

采用DPS數(shù)據(jù)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，不同液固比處理所得到的粗酶提取液酶活見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，固液比(m/g∶V/mL)分別為1∶100、1∶50、1∶25時(shí)，粗酶提取液酶活最高，三者無(wú)顯著差異(P>0.05)，原因是緩沖液提取酶的量達(dá)到最大量，為操作簡(jiǎn)便，選擇固液比為1∶25。

2.2 浸提溫度對(duì)粗酶提取的影響

采用DPS數(shù)據(jù)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，當(dāng)固液比m/g∶V/mL=1∶25時(shí)，不同浸提溫度處理所得到的粗酶提取液酶活見(jiàn)圖2。結(jié)果表明，提取溫度越低，酶活越低，原因可能是當(dāng)提取溫度升高，酶失活的比率逐漸上升，酶活降低；當(dāng)提取溫度為4℃時(shí)，酶活最高，與其他溫度提取的酶活相比，差異均達(dá)極顯著水平(P<0.01)。

2.3 浸提時(shí)間對(duì)粗酶提取的影響

采用DPS數(shù)據(jù)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，在固液比m/g∶V/mL=1∶25、浸提溫度4℃時(shí)，不同浸提時(shí)間處理所得到的粗酶提取液酶活見(jiàn)圖3。結(jié)果表明，不同的浸提時(shí)間對(duì)粗酶提取液酶活沒(méi)有顯著差異，為了操作簡(jiǎn)便，選擇混勻后立即過(guò)濾。

2.4 3種檢測(cè)方法比較

對(duì)11種不同產(chǎn)地、不同來(lái)源的紅曲米進(jìn)行初篩，選擇5種糖化力差異較大的紅曲米(B1、R12、R21、R32、R8)，分別采用了碘量法、DNS法、菲林試劑法3種檢測(cè)方法進(jìn)行了糖化力測(cè)定，從圖4可以看出，碘量法與DNS法檢測(cè)結(jié)果基本一致，5種紅曲米糖化力大小順序依次為B1、R12、R21、R32、R8，排序一致，兩種方法的測(cè)定結(jié)果無(wú)顯著差異；菲林試劑法檢測(cè)5種紅曲米糖化力大小順序依次為B1、R21、R32、R8、 R12，只有B1排序有相關(guān)性，其余4個(gè)樣品檢測(cè)結(jié)果均有一定的偏差，與張鳳英[6]等研究結(jié)果一致，同時(shí)菲林試劑法檢測(cè)值偏低。

3種檢測(cè)方法對(duì)時(shí)間、試劑、設(shè)備等要求見(jiàn)表1，菲林試劑法操作難度較難，誤差較大。

表1 3種檢測(cè)方法的比較

檢測(cè)方法可根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)需求進(jìn)行選擇。在樣品數(shù)量較少、設(shè)備條件有限的情況下，適宜選擇碘量法檢測(cè)紅曲米糖化力；在樣品數(shù)量較多，有分光光度計(jì)的條件下，可以選擇DNS法快速測(cè)定多個(gè)樣品，兩種方法的測(cè)定值具有可比性。

2.5 紅曲米糖化力驗(yàn)證試驗(yàn)

紅曲米糖化力的高低，直接反映其液化糖化大米淀粉產(chǎn)生可發(fā)酵糖的水平，最終關(guān)系到出酒率。從圖5可以看出，紅曲米糖化力的差異與以其為糖化劑的黃酒出酒率的差異是一致的，進(jìn)一步說(shuō)明了檢測(cè)數(shù)據(jù)是可信的。

3 討論與結(jié)論

紅曲的糖化力是反映紅曲質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。受制曲原料、加工工藝和生產(chǎn)條件的影響，不同產(chǎn)地、不同廠家甚至不同批次生產(chǎn)的酒曲，都存在較大差異。因此，針對(duì)紅曲建立一個(gè)有效的糖化力評(píng)價(jià)方法，對(duì)于穩(wěn)定酒曲質(zhì)量、制曲企業(yè)制訂行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、釀酒企業(yè)選擇使用紅曲，具有重要的指導(dǎo)意義。

DNS法的原理是糖化酶水解淀粉產(chǎn)生的葡萄糖與3,5-二硝基水楊酸(DNS)反應(yīng)生成的棕紅色3-氨基-5硝基-水楊酸，在520 nm波長(zhǎng)處的光吸收強(qiáng)度與還原糖含量呈正比，利用分光光度計(jì)快速簡(jiǎn)便的測(cè)定酒曲糖化力[9]。試驗(yàn)結(jié)果表明， DNS法與碘量法檢測(cè)結(jié)果基本一致，與以其為糖化劑的黃酒出酒率一致，可快速測(cè)定，且操作簡(jiǎn)便。碘量法與DNS法均為紅曲米糖化酶適宜的檢測(cè)方法，兩方法檢測(cè)數(shù)據(jù)具有可比性、數(shù)據(jù)可信。從時(shí)效性考慮，碘量法適宜少量樣品測(cè)定，DNS法適宜用于快速測(cè)定多個(gè)樣品。

斐林試劑法的原理是，利用糖化酶水解可溶性淀粉為葡萄糖，葡萄糖與斐林試劑反應(yīng)，將二價(jià)銅在堿性條件下還原成一價(jià)的銅，后者與黃血鹽生成不沉淀的絡(luò)合物.用次甲基藍(lán)為指示劑確定反應(yīng)終點(diǎn)[8]。斐林試劑法的影響因素很多，操作繁瑣、時(shí)間長(zhǎng)，試驗(yàn)結(jié)果表明，測(cè)定結(jié)果與碘量法、DNS法存在較大的差異。

[1]韓興林,王建耀,王廣峰,等. 清香型大曲糖化力的簡(jiǎn)單分析[J]. 釀酒科技,2009，(9)：68-70.

[2]倪莉,吳智廣,張?chǎng)? 福建紅曲中的紅曲霉的生理生化特性研究[J]. 福州大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2009， 37(6)：931-934.

[3]溫小英,廖勤儉,李揚(yáng)華.一種酒醅糖化力的測(cè)定方法 [J].釀酒科技，2013，(5):100-104.

[4]汪志君,夏艷秋,方維明.植酸對(duì)黃曲霉菌(Aspergillusflavus)糖化力的影響[J].中國(guó)釀造，2003，22(5):14-16.

[5]中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局,中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì). GB8267-2006 食品添加劑糖化酶制劑[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2006.

[6]胡衛(wèi)明,高永強(qiáng).新工藝黃酒麥曲的工藝及性能檢測(cè)[J].釀酒，2013,40(1):103-106.

[7]馬耀宏,孟慶軍,楊艷,等.大曲糖化力的快速測(cè)定方法[J].中國(guó)釀造,2014,33(3):128-131.

[8]張鳳英,吳芝岳,楊武英.測(cè)定小曲糖化力新方法的探討[J].釀酒科技，2006，(4):99-104.

[9]白利濤,張麗萍.糖化酶活力測(cè)定方法研究[J].釀酒科技，2012，(2):99-102.

[10]馬歌麗,魏泉增,張志剛.分光光度法測(cè)定大曲糖化酶活力探討[J].中國(guó)釀造.2008，27(17):69-71.

[11]許明明,呂旭聰,劉志彬,等.福建藥白曲中根霉的分離鑒定及菌株特性分析[J].中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2014,14(3):205-210.

[12]孫淑琴,邵冬梅.比色法快速測(cè)定糖化酶活力新方法[J].河北省科學(xué)院學(xué)報(bào)，1997，(2):35-39.

[13] 王成濤,張嬋,尹勝,等.兒茶酚對(duì)運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌抗氧化防御體系的影響[J]，中國(guó)食品學(xué)報(bào),2014,14(8):21-26.

[14]中國(guó)輕工業(yè)聯(lián)合會(huì). GB/T 13662-2008 黃酒[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2008.

(責(zé)任編輯：翁志輝)

Extraction Technology of Saccharifying Enzyme and Detection Method of Saccharification Ability of Qu of Fujian Rice Wine

LIN Xiao-jie1，2, LIANG Zhang-cheng1，2, HUANG Fei1，2,REN Xiang-yun1，2, LIN Xiao-zi1，2, HE Zhi-gang1，2*

(1.InstituteofAgriculturalEngineeringTechnology,FujianAcademyofAgriculturalSciences，F(xiàn)ujianAcademyofAgriculturalSciences,Fuzhou，F(xiàn)ujian350013，China；2.FujianKeyLaboratoryofAgriculturalProduct(Food)Processing,Fuzhou，F(xiàn)ujian350013,China)

Effects of different solid-to-liquid ratio, extraction temperature and extraction time on the saccharification ability of enzyme extraction of Qu of Fujian rice wine were studied; at the same time, iodometric method, DNS method and Fehling reagent method were compared; and the saccharification ability of Qu of Fujian rice wine were tested and verified. In conclusion, the optimal extraction conditions of saccharifying enzyme : the solid-to-liquid ratio (m/V) of 1 g ∶ 25 mL, the powder of Qu of Fujian rice wine solved in buffer solution and shaked immediately，detected the filtrate. Both methods method could be applied in the determination of saccharification ability in Hongqu glutinous rice wine, and there was no statistical difference. Iodometric method could be selected if it is small sample quantity; DNS method could be selected if it is big sample quantity. During Hongquglutinous rice winetest and verify, the result of detectionpaint a similar picture withthe wine yield.

Qu of Fujian rice wine; saccharifying enzyme; saccharification ability

2016-04-11初稿；2016-07-20修改稿

林曉婕(1982-)，女，碩士，主要從事農(nóng)產(chǎn)品加工及食品發(fā)酵研究

*通訊作者：何志剛(1964-),男,研究員,主要從事農(nóng)產(chǎn)品貯藏與加工研究(E-mail:njgzx@163.com)

福建省屬公益類科研院所基本科研專項(xiàng)(2014R1015-4，2014R1015-5，2016R1014-7)、福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院青年人才創(chuàng)新基金C類(2015QC-9)

TS 261.2

A

1008-0384(2016)08-892-05

林曉婕，梁璋成，黃 飛，等.紅曲米糖化酶提取工藝及其糖化力測(cè)定方法選優(yōu)[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2016，31(8)：892-896.

LIN X-J，LIANG Z-C，HUANG F，et al.Extraction Technology of Saccharifying Enzyme and Detection Method of Saccharification Ability of Qu of Fujian Rice Wine [J].FujianJournalofAgriculturalSciences，2016，31(8)：892-896.