丁喜玉

【摘要】 目的 研究分析新鮮冰凍血漿（FFP）輕度溶血對Ⅷ因子測定的影響， 為今后臨床血液檢測及新鮮冰凍血漿質(zhì)量控制提供參考。方法 制備新鮮血漿， 依次將0.01 g/L、0.10 g/L、0.50 g/L、1.00 g/L、2.00 g/L五種不同含量血紅蛋白（Hb）標(biāo)本進(jìn)行冰凍， 每種取樣備制15份， 將新鮮冰凍血漿放置于25℃常溫狀態(tài)解凍靜置， 分別在0、1、2、3、4 h不同時間節(jié)點內(nèi)進(jìn)行Ⅷ因子檢測， 對比Ⅷ因子濃度的變化情況。結(jié)果 在相同血紅蛋白含量血漿在冰凍不同時間內(nèi)Ⅷ因子含量無明顯改變（P>0.05）；相同冰凍時間段內(nèi)不同血紅蛋白含量血漿Ⅷ因子含量無明顯改變（P>0.05）。結(jié)論 當(dāng)新鮮冰凍血漿中血紅蛋白指標(biāo)<2 g/L， 且25℃室溫冰凍溶解環(huán)境中放置時間<4 h， 則溶血不會對冰凍血漿Ⅷ因子產(chǎn)生明顯影響。

【關(guān)鍵詞】 新鮮冰凍血漿；輕度溶血；Ⅷ因子；檢測影響

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.27.190

《全血及成分血質(zhì)量要求GB 18469-2012》對于臨床血液檢測質(zhì)控中嚴(yán)格規(guī)定， 無論是全血或去白細(xì)胞懸浮紅細(xì)胞的檢測中均要求在運輸存儲待檢前溶血率需控制在紅細(xì)胞總數(shù)0.8%以下；不過該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對于新鮮冰凍血漿的質(zhì)量控制要求中卻未記錄溶血率水平標(biāo)準(zhǔn)[1-3]。為進(jìn)一步探討溶血是否會影響Ⅷ因子在新鮮冰凍血漿內(nèi)的濃度， 本文通過0.01 g/L、0.10 g/L、0.50 g/L、1.00 g/L、2.00 g/L五種不同含量Hb的新鮮血漿標(biāo)本15份進(jìn)行不同時間段內(nèi)研究， 檢測Ⅷ因子濃度的變化情況， 現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 依據(jù)《全血及成分血質(zhì)量要求GB 18469-2012》制備新鮮冰凍血漿， 將明確檢測符合該要求冰凍血漿內(nèi)Ⅷ因子濃度質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)， 且血紅蛋白指標(biāo)<10 mg/L的血液樣本15份， 并在每份冰凍血漿留存5 ml作為備用樣本， 取5 ml血樣行枸櫞酸鈉抗凝血。

1. 2 儀器與試劑 選擇希森美康醫(yī)用電子有限公司生產(chǎn)的sysmex-CA510全自動血凝分析儀以及sysmex-XS-1000i全自動血液分析儀。凝血因子凝固法檢測試劑盒（MDC HEMOSTA-SIS， TECO MEDICAL Instruments Production+Trading GM-BH，批號11237812）；凝血因子標(biāo)準(zhǔn)品（MDC HEMOSTA-SIS， TECO MEDICAL Instruments Production+Trading GM-BH，批號047B-C08019）；APTT測定試劑盒（上海太陽生物技術(shù)有限公司， 批號112170）；血漿游離血紅蛋白試劑盒（北京瑞爾達(dá)生物科技有限公司， 批號140421）。

1. 3 方法 取5 ml冰凍血漿樣本置于試管內(nèi)， 先行3000 r/min離心15 min， 棄血漿后將余下血細(xì)胞添加5 ml無菌蒸餾水， 一起置入-30℃冰箱中反復(fù)凍融3次， 確保紅細(xì)胞破裂。采取希森美康醫(yī)用電子有限公司sysmex-XS-1000i全自動血液分析儀檢測Hb指標(biāo)含量， 可選擇添加無菌蒸餾水配伍調(diào)整血紅蛋白濃度， 控制在60 g/L即可， 隨后再分別稀釋成Hb的含量為30 g/L、15 g/L、3 g/L的標(biāo)本。

從每個血袋導(dǎo)管留取的FFP各吸580 μl于5支試管中， 再分別加入無菌蒸餾水和Hb， 含量（g/L）為3、15、30、60。標(biāo)本各20 μl， 則每支待測試管中FFP的Hb含量（g/L）分別為0.01、0.10、0.50、1.00、2.00， 將Hb含量不同的5支待測試管置于25℃常溫狀態(tài)解凍靜置， 并在0、1、2、3、4 h測其Ⅷ因子的含量。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 在相同血紅蛋白含量血漿在冰凍不同時間內(nèi)Ⅷ因子含量變化比較 在新鮮冰凍血漿血紅蛋白同一指標(biāo)濃度情況下， 在0、1 h、2 h、3 h、4 h不同時間節(jié)點內(nèi)進(jìn)行Ⅷ因子檢測， 相同血紅蛋白含量血漿在冰凍不同時間內(nèi)Ⅷ因子含量無明顯改變， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2. 2 相同冰凍時間段內(nèi)不同血紅蛋白含量血漿Ⅷ因子含量變化比較 通過對相同冰凍時間段內(nèi)不同血紅蛋白含量血漿進(jìn)行Ⅷ因子檢測分析， 相同冰凍時間段內(nèi)不同血紅蛋白含量血漿Ⅷ因子含量無明顯改變， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

3 討論

在《全血及成分血質(zhì)量要求GB 18469-2012》中嚴(yán)格制定了新鮮冰凍血漿內(nèi)Ⅷ因子濃度必須達(dá)到>0.7 IU/ml的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)， 并對新鮮冰凍血漿的性質(zhì)有相應(yīng)要求， 無明顯色澤， 無異常蛋白析出或伴有氣泡， 液體呈黃色；在《全血及成分血質(zhì)量要求GB 18469-2012》中雖對血漿Ⅷ因子濃度及性狀有著一定要求[4]， 但對于不同血紅蛋白Hb含量有無影響Ⅷ因子卻缺乏相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。而在實際血液檢測中， 普遍采取的質(zhì)控方式多選擇將含有紅細(xì)胞或伴有一定程度溶血現(xiàn)象的冰凍血漿進(jìn)行剔除[5]， 這對部分血漿量較少或難以持續(xù)采血者來講有著較大影響。對此本文通過對冰凍血漿各類血紅蛋白指標(biāo)水平及25℃解凍放置時間同時間節(jié)點進(jìn)行Ⅷ因子含量檢測分析。

綜上所述， 當(dāng)新鮮冰凍血漿中血紅蛋白指標(biāo)<2 g/L， 且25℃室溫冰凍溶解環(huán)境中放置時間<4 h， 則溶血不會對冰凍血漿Ⅷ因子產(chǎn)生明顯影響。

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[收稿日期：2016-05-16]