馮 翔，江 念,陳耀兵,*,鄭小江*

(1.長江大學 農(nóng)學院，湖北 荊州 434000；2.湖北民族學院 生物科學與技術(shù)學院，湖北 恩施 445000)

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防治黃瓜細菌性角斑病藥劑篩選

馮 翔1，江 念2,陳耀兵1,2*,鄭小江2*

(1.長江大學 農(nóng)學院，湖北 荊州 434000；2.湖北民族學院 生物科學與技術(shù)學院，湖北 恩施 445000)

采用抑菌圈法對市場上常見的9種殺細菌劑進行室內(nèi)毒力測定，并進行田間防效試驗，以期篩選出有效藥劑.試驗結(jié)果表明：6種化學藥劑中，5%噻霉酮水劑和0.3%四霉素水劑對黃瓜細菌性角斑病的抑制效果較好,其他4種藥劑則效果較差.3 種生物藥劑中，10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑對黃瓜細菌性角斑病的抑制效果較好，其他2種藥劑則效果較差.田間試驗中，10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑1 500倍液和20%春雷霉素水劑42 g/hm2的防效較好，其防效分別為82.74%和72.38%.0.3%四霉素水劑和33.5%喹啉銅懸浮劑則效果較差.所以，防治黃瓜細菌性角斑病推薦使用10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑.

殺菌劑；黃瓜細菌性角斑?。灰志Ψ?/p>

黃瓜細菌性角斑病在全世界爆發(fā)，造成了巨大的經(jīng)濟損失.而目前農(nóng)藥市場上防治細菌病害的殺菌劑較多，選擇隨意性大，所以，篩選高效、環(huán)保、生態(tài)友好的殺細菌劑十分必要.冬季氣溫低，光照時間短，黃瓜生長又需要較高的溫度，在冬季日光溫室種植黃瓜時，為了保持日光溫室的溫度，其放風時間相對較短，日光溫室中的濕度增大，黃瓜細菌性角斑病的發(fā)生危害也較重.黃瓜細菌性角斑病一旦發(fā)生危害，可造成黃瓜葉片上產(chǎn)生水浸狀的斑點，直接影響葉片的光和面積，當病害危害嚴重時，可造成整片葉片的枯死.因此，如何防治好黃瓜細菌性角斑病是保證黃瓜高產(chǎn)的重要措施之一[1-3].黃瓜細菌性角斑病為丁香假單胞桿菌黃瓜角斑病致病變種，屬薄壁菌門假單胞菌屬.該菌屬好氣性，不耐酸性環(huán)境， 生長適溫24～28℃[4].防治黃瓜細菌性角斑病藥劑篩選病害流行規(guī)律：病原細菌在種子內(nèi)外越冬，或隨病殘體遺落在土壤中越冬，病土和帶病種子成為翌年病害的初侵染來源，適溫(24～28℃)高濕的天氣有利于感??；品種間抗病性有差異.溫度22～30℃，相對濕度70%以上的環(huán)境條件，易造成該病害發(fā)生和流行[5-6].

黃瓜細菌性角斑病是繼黃瓜霜霉病、枯萎病和白粉病之后，又一個對黃瓜生產(chǎn)危害性很大的病害.該病在保護地及露地生產(chǎn)中均有發(fā)生,且以露地危害最重.此病在華北、東北及華中地區(qū)發(fā)生較多，造成嚴重減產(chǎn)[7-8].近年來隨著黃瓜種植面積的不斷擴大，江漢地區(qū)病勢逐年上升，減產(chǎn)達60%以上，有些地區(qū)達80%以上，只在早期有所收獲.目前在黃瓜霜霉病、枯萎病、內(nèi)生長霉菌和白粉病的抗病育種分別已取得了可喜的成果,而在黃瓜細菌性角斑病的抗病育種方面發(fā)展較慢，在之前的研究中，有農(nóng)業(yè)研究者對黃瓜角斑病做出過化學防治，但是所篩選的藥劑效果已經(jīng)達不到現(xiàn)在的生物防治和低毒的要求，而且關(guān)于現(xiàn)在的新型藥劑防治方面報道也較少[9-13].本文對黃瓜細菌性角斑病分別采用無公害的生物制劑和低毒的化學藥劑進行室內(nèi)毒力測定并進行室外防效實驗，目的是為了篩選出防治黃瓜細菌性角斑病的有效藥劑.

表1 9種供試殺菌劑

表2 9種殺菌劑的不同質(zhì)量濃度

1 材料與方法

1.1 供試菌種

黃瓜細菌性角斑病病菌(Bacterial angular leaf spot of Cucumber)，自湖北省荊州市荊州區(qū)李埠鎮(zhèn)白荷村采集黃瓜細菌性角斑病葉片，經(jīng)過常規(guī)組織分離法分離，按照柯赫氏法則進行驗證，分離后轉(zhuǎn)接到LP培養(yǎng)基上置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆?

1.2 供試藥劑

9種供試殺菌劑見表1.

1.3 試驗方法

1.3.1 室內(nèi)毒力測定 試驗采用抑菌圈法.采用干熱法滅菌玻璃器皿(165℃恒溫2 h).

制作LB 培養(yǎng)基.1 L燒杯里倒入800 mL的無菌水，酵母提取物5 g，蛋白胨10 g，NaCl 10 g，混合搖勻，定容至1 L，用NaoH，調(diào)節(jié)pH至7.4，然后平均分裝到5個燒杯內(nèi)，在每個燒杯里加入少量瓊脂，將瓶口用棉花和報紙密封，濕熱滅菌(121℃，20 min).先按照試驗設(shè)計配置單個藥劑的最高濃度，然后成倍稀釋藥劑，每種藥劑每個濃度取3mL，每種藥劑共5個濃度，并設(shè)蒸餾水為空白對照.殺菌劑的不同質(zhì)量濃度見表2.

統(tǒng)計數(shù)據(jù)，根據(jù)不同濃度的藥劑處理對菌落的生長抑制結(jié)果，用DPS數(shù)據(jù)分析處理軟件對表3進行一元回歸統(tǒng)計分析，以濃度的對數(shù)值為自變量x，以抑菌率的幾率值為y值，得出表4的毒力回歸方程，并求出EC50和各自的相關(guān)系數(shù).

1.3.2 田間藥效試驗 試驗藥劑：根據(jù)室內(nèi)毒力測試結(jié)果選取10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑1 000倍液、10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑3 000倍液、0.3%四霉素水劑4.5 g/hm2、20%春雷霉素水劑42 g/hm2、20%春雷霉素水劑63 g/hm2、33.5%喹啉銅懸浮劑300 g/hm2、33.5%喹啉銅懸浮劑420 g/hm2，進行田間防效試驗，使用清水作為空白對照.

實驗對象：黃瓜細菌性角斑病

作物及品種：超優(yōu)1號黃瓜

作物栽培及環(huán)境條件：試驗在李埠鎮(zhèn)李埠村進行.試驗地面積為1 000 m2，試驗田系常年蔬菜種植基地.土壤質(zhì)地為粘土，pH值呈中性、土壤肥力中等.按常規(guī)方法進行田間管理.

試驗共設(shè)5個處理，每個處理4次重復，共20個小區(qū).試驗小區(qū)采用隨機區(qū)組排列，每個小區(qū)面積25 m2.2015年7月12日第1次用藥，第2次施藥7 月18日，共用藥2次.采用3WBD-16型背負式電動噴霧器在微風情況下噴霧，噴霧均勻周到，噴霧容量450 kg/hm2.試驗過程中不使用其他藥劑.末次藥后10 d調(diào)查試驗結(jié)果，每小區(qū)隨機取5 點調(diào)查，每點調(diào)查2株全部葉片，按葉片上病斑占整個葉面積的百分率分級.計算病葉率、病情指數(shù)及防治效果，數(shù)據(jù)采用Duncan新復極差法進行顯著性比較.

分級標準為：

0 級——無病斑；

1 級——病斑面積占整個葉面積的5%以下；

3 級——病斑面積占整個葉面積的6%～10%；

5 級——病斑面積占整個葉面積的11%～20%；

7 級——病斑面積占整個葉面積的21%～50%；

9 級——病斑面積占整個葉面積的50%以上；

病情指數(shù)= ∑(病葉數(shù)×相對級數(shù))/(調(diào)查總?cè)~數(shù)×總級數(shù))；

防治效果(%)= (對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/對照病情指數(shù).

表3 9種殺菌劑對黃瓜細菌性角斑病病菌的生長抑制效果

2 結(jié)果與分析

2.1 9 種殺菌劑對黃瓜細菌性角斑病病菌的抑制作用

從表3可知，9 種殺菌劑在適當?shù)臐舛忍荻认聦S瓜角斑病病菌有一定的抑制作用.其中，當濃度僅為4億個/L的時候，10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑的抑菌率已經(jīng)達到79.12%；20%春雷霉素水劑的抑菌率最低，當濃度為4 000 mg/L時為45.83%.9種殺菌劑對黃瓜細菌性角斑病病菌的抑制效果見表3.

2.2 9 種供試藥劑對黃瓜細菌性角斑病病菌的毒力

從表4可知：6 種化學藥劑中，5%噻霉酮水劑和0.3%四霉素水劑對黃瓜細菌性角斑病的抑制效果較好，抑制中濃度EC50分別為8.56 mg/L和10.38 mg/L；其他4 種藥劑則效果較差，20%乙蒜素乳油、8%辛菌胺醋酸鹽水劑、33.5%喹啉銅懸浮劑和20%春雷霉素水劑的抑制中濃度EC50分別為55.20 mg/L、799.50 mg/L、2 583.91 mg/L和4741.43 mg/L.3種生物藥劑中，10 億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑對黃瓜細菌性角斑病的抑制效果較好，抑制中濃度為3.12億個/L，其他2種藥劑則效果較差，25億芽孢/克堅強芽孢桿菌可濕性粉劑和100億芽孢/克解淀粉芽孢桿菌可濕性粉劑的抑制中濃度EC50分別為304.25億個/L和984.27億個/L.

2.3 田間防效試驗

由表5可見，10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑1 500倍液、20%春雷霉素水劑63 g/hm2對黃瓜角斑病具有非常好的效果，其防效分別達到83%和72.38%，相對于其他藥劑差異極顯著(P=0.01)，防治效果顯著.0.3%四霉素水劑和33.5%喹啉銅懸浮劑的防治效果略低，在實際情況允許的情況下可以加大劑量.0.3%四霉素水劑、10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑、33.5%喹啉銅懸浮劑和20%春雷霉素粒劑在試驗劑量范圍內(nèi)對黃瓜生長安全.

表4 9種殺菌劑對黃瓜細菌性角斑病病菌的毒力回歸方程

表5 殺菌劑第2次噴藥10 d后對黃瓜細菌性角斑病的防治效果

注：字母不同表明有顯著性差異.含有相同之母表示之間差異不明.

3 結(jié)論與討論

室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，6種化學藥劑中，5%噻霉酮水劑和0.3%四霉素水劑對黃瓜細菌性角斑病的抑制效果較好，抑制中濃度EC50分別為8.56 mg/L和10.38 mg/L；其他4種藥劑則效果較差，20%乙蒜素乳油、8%辛菌胺醋酸鹽水劑、33.5%喹啉銅懸浮劑和20%春雷霉素水劑的抑制中濃度EC50分別為55.20、799.50、2 583.91 mg/L和4 741.43 mg/L.3 種生物藥劑中，10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑對黃瓜細菌性角斑病的抑制效果較好,抑制中濃度為3.12億個/L，其他2種藥劑則效果較差,抑制中濃度為304.25億個/L和984.27億個/L.在田間藥效試驗結(jié)果中，10 億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑1500倍液和20%春雷霉素水劑42 g/hm2的防效較好，其防效分別為82.74%和72.38%.0.3%四霉素水劑和33.5%喹啉銅懸浮劑則效果較差.出于高效且無公害考慮，從田間試驗和室內(nèi)毒力測定相結(jié)合可以推測出，防治黃瓜細菌性角斑病推薦使用10億芽孢/克多粘芽孢桿菌可濕性粉劑1 500倍液效果較佳.20%春雷霉素水劑在室內(nèi)毒力測定中效果一般，而在田間防效中卻效果較好，原因可能是：春雷霉素對土壤微生物數(shù)量的影響對土壤中的細菌、真菌和放線菌產(chǎn)生刺激作用，對土壤呼吸作用產(chǎn)生刺激效應以及對土壤酶活性的影響，對土壤中脲酶活性表現(xiàn)出顯著的刺激效應.從而有預防、治療、生長調(diào)劑功能.因此，建議在黃瓜細菌性角斑病發(fā)生前期使用，如果黃瓜細菌性角斑病已經(jīng)發(fā)生，建議增加劑量.

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責任編輯：高 山

Electing Pesticide about Prevention and Treatment of Bacterial Angular Leaf Spot of Cucumber

FENG Xiang1,JIANG Nian2,CHEN Yaobing1.2*,ZHENG Xiaojiang2*

(1. College of Agriculture,Yangtze University，Jingzhou 434000，China;2.School of Biological Science and Technology，Hubei University for Nationalities，Enshi 445000，China)

In this paper,the inhibition zone method was used to measure the toxicity of 9 kinds of fungicides in the market,and a field control test was conducted to screen the effective fungicides.The results showed that: in the six kinds of chemical agents,5% thiamethoxam mildew agent and 0.3% aqueous solution of tetramycin have better effect on the bacterial angular leaf spot of cucumber effect,the other 4 kinds of drugs are less effective.And in the 3 kinds the wettable powder of one billion bacillus / gram of bacillus subtilis has better inhibitory effect on the cucumber bacterial angular leaf spot disease,but the effect of the other 2 kinds of drugs is poor.In the field experiment,one billion spores / g bacillus polymyxa wet powder 1 500 times fluid and 20% kasugamycin 42 g/hm2have better control effect, whose effect was 82.74% and 72.38% respectively.And the 0.3% four drug agent and 33.5% suspension of coppe have a less effect.Therefore,one billion bacillus / gram of bacillus subtilis is recommended in the prevention and treatment of bacterial angular leaf spot of cucumber

fungicides;bacterial angular leaf spot of cucumber;inhibition zone method

2016-06-21.

湖北省自然科學基金創(chuàng)新群體項目(2009CDA115).

馮翔(1992- )，男，碩士生，主要從事蔬菜作物病蟲害的研究;*

*共同通信作者:鄭小江(1958- )，男，教授，主要從事野生植物資源保護與利用的研究.

1008-8423(2016)03-0337-04

10.13501/j.cnki.42-1569/n.2016.09.024

S435.6

A