張 慧

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HPLC法測定安樂片中阿魏酸的含量

張 慧

目的 建立安樂片中阿魏酸的含量測定方法。方法 采用高效液相色譜法，色譜條件：乙腈-1%醋酸(14:86)為流動相；流速：1.0 ml/min，檢測波長：320nm。結果 阿魏酸進樣量在0.03648～0.32832μg范圍內，線性關系良好，r=0.9998；回收率在95.51～99.04%之間，RSD為1.61%。結論 該方法穩(wěn)定，結果準確。

高效液相色譜法；安樂片；阿魏酸

安樂片為中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑第二冊收載品種(書頁號：Z2-104；標準編號：WS3-B-0274-90)[1]。安樂片是由柴胡、當歸、川芎、茯苓、鉤藤、何首烏藤、白術(麩炒)、甘草等八味中藥材加工制成，具有疏肝解郁、定驚安神的作用。用于精神抑郁、驚恐失眠、胸悶不適、納少神疲。當歸、川芎為方中主藥，具有較強的協同作用。阿魏酸是當歸和川芎共有的有效成分之一，它是一種有機酸，可用高效液相色譜法測定其總量。經方法學考察，本方法的線性、精密度、穩(wěn)定性、重復性、回收率試驗均符合規(guī)定，故確立本制劑的定量方法為高效液相色譜法測定阿魏酸的含量。

1 儀器與所用試劑

1.1 儀器 SHIMADZU-10Avp 液相色譜儀，N2000 工作站。

1.2 試劑 阿魏酸對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號0773-9910)；安樂片由四川琦云藥業(yè)有限責任公司生產；乙腈為色譜純；其它試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 測定波長的確立 經繪制阿魏酸紫外吸收圖譜，阿魏酸在320nm處有最大吸收[2]，故確立320nm為本品中阿魏酸含量測定的波長。

2.2 流動相篩選 對比了乙腈-0.085% 磷酸溶液(17：83)[3]和乙腈-1%醋酸溶液(15：85)[4]對本品中阿魏酸分離的影響，乙腈-1%醋酸溶液(14：86)對阿魏酸分離的效果好于乙腈-0.085% 磷酸溶液(17：83)，因此確定乙腈-1%醋酸(14:86)為本實驗中阿魏酸含量測定的流動相。

2.3 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：乙腈-1%醋酸(14:86)；流速：1.0 ml/min；檢測波長：320 nm。

2.4 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品18.24 mg，置10 ml棕色量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 ml，置棕色100 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每1 ml含18.24 μg的溶液。

2.5 供試品溶液的制備 取本品20片，除去包衣，研細，取約2 g，精密稱定，精密加入1%甲酸甲醇溶液25 ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，再稱定重量，用1%甲酸甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得[5]。

2.6 線性范圍考查 分別精密吸取對照品2μl、6μl、10μl、14μl、18 μl溶液，注入液相色譜儀中，測定色譜峰面積，以阿魏酸對照品進樣量為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程為：y=2229986.29x+1899.10,r=0.9998。阿魏酸對照品進樣量在0.03648～0.32832μg范圍內線性關系良好。測定結果見表1。

表1 阿魏酸對照品線性范圍考察結果

2.7 精密度試驗考查 精密吸取對照品溶液10μl，連續(xù)進樣6次，測定色譜峰面積，阿魏酸對照品溶液精密度試驗符合規(guī)定。測定結果見表2。

2.8 穩(wěn)定性試驗考查 精密吸取供試品液10 μl，每間隔1小時進樣1次，測定色譜峰面積，阿魏酸色譜峰峰面積積分值基本一致,RSD為1.13%。說明供試品在4小時內具有良好的穩(wěn)定性。測定結果見表3。

表2 精密度試驗結果

表3 穩(wěn)定性試驗結果

2.9 重復性試驗考查 取本品2 g，精密稱定，共取6份，分別按供試品溶液制備項下方法操作，測定色譜峰面積，計算含量，阿魏酸含量重復性試驗符合規(guī)定。測定結果見表4。

表4 重復性試驗結果

2.10 回收率試驗考察 取本品1 g，精密稱定，共取6份，精密加入阿魏酸對照品溶液(0.274 mg/ml)1 ml，按供試品溶液制備項下方法操作，測定色譜峰面積，計算，阿魏酸回收率在95.51～99.04%之間，RSD為1.61%，符合規(guī)定。測定結果見表5。

表5 回收率試驗結果

3 討論

本品采用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量，方法穩(wěn)定，結果準確，可作為該制劑的質量控制方法。

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會. 中藥成方制劑[S].中華人民共和國衛(wèi)生部，1990:104.

[2] 張玉愛，吳澤榕，鄭起平，等.HPLC測定養(yǎng)血當歸軟膠囊中阿魏酸的含量[J].中成藥，2006，28(4)：599-600.

[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部) [M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:124.

[4] 謝先吉，王臨潤，吳文娟.通經口服液中阿魏酸含量測定方法的研究[J].藥物分析雜志，2005，25(8)：992-993.

[5] 容蓉，袁久榮，王學志.HPLC測定四物湯及其配伍組方中阿魏酸的煎出量[J]. 中國藥學雜志，2000，11，35(11)：767-768.

Content Determination of Ferulic Acid in Anle Tablet by HPLC

ZHANG Hui

(Department of Pharmacy, Shenyang Second Hospital of Traditional Chinese Medicine, Liaoning, Shenyang 110101, China)

Objective To develop a method for content determination of ferulic acid in Anle tablet. Method Using HPLC method, the mobile phase was a mixture of acetonitrile-1% acetic acid (14:86). The flow rate was 1.0ml/min with the detection wavelength at 320nm. Result The injection volume of ferulic acid was in the range of 0.03648 ～ 0.32832 μg. The linear relationship was good, r=0.9998. The recovery was between 95.51～99.04%. RSD was 1.61%. Conclusion The method was stable, and the result was accurate.

High performance liquid chromatography; Anle tablet; Ferulic acid

遼寧省沈陽市第二中醫(yī)醫(yī)院藥劑科(沈陽 110101)

10.3969/j.issn.1003-8914.2016.06.020

1003-8914(2016)-06-0796-02

?秀琴

2015-08-03)