古賢君，王 潔，黃 鵬，黃美英

(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，廣西 百色 533000)

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慢性腎衰竭患者CRP、IL-6及MMP-9水平與頸動脈粥樣硬化的關(guān)系

古賢君，王 潔，黃 鵬，黃美英

(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，廣西 百色 533000)

目的 探討慢性腎衰竭患者C反應(yīng)蛋白(CRP)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)及基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)與頸動脈粥樣硬化的關(guān)系。方法 選取46例慢性腎衰竭非透析患者作為研究組，另選取50例同期行常規(guī)體檢的健康志愿者作為對照組，分別采用速率散射免疫比濁法、酶聯(lián)免疫法和明膠酶譜分析法檢測2組血清CRP、IL-6和MMP-9水平，并采用頸動脈超聲對內(nèi)膜-中層厚度(IMT)進行檢測，依據(jù)檢查結(jié)果將研究組患者分為內(nèi)膜正常組和內(nèi)膜增厚組，比較2個亞組血清CRP、IL-6和MMP-9水平，并分析上述因子分別和IMT的相關(guān)性。結(jié)果 研究組血清CRP、IL-6和MMP-9水平及IMT均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組，且內(nèi)膜增厚組血清CRP、IL-6和MMP-9水平均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于內(nèi)膜正常組，上述數(shù)據(jù)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)；研究組中血清CRP、IL-6和MMP-9水平與IMT均存在明顯正向相關(guān)性(r=0.698，0.523，0.407，P均<0.05)。結(jié)論 慢性腎衰竭患者頸動脈IMT增厚明顯且存在明顯粥樣硬化，推測和血清CRP、IL-6和MMP-9水平異常升高有關(guān)。

慢性腎功能衰竭；C反應(yīng)蛋白；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；白細(xì)胞介素-6；動脈粥樣硬化

頸動脈粥樣硬化是慢性腎衰竭患者常見并發(fā)癥，給患者生命健康帶來嚴(yán)重威脅。據(jù)臨床研究資料報道，當(dāng)前我國慢性腎臟疾病發(fā)病率為0.2%～0.3%，慢性腎衰竭占有較大比重，終末期患者年發(fā)病率約為100～130/百萬，并呈現(xiàn)出逐年上升趨勢[1]。慢性腎衰竭患者微炎癥狀態(tài)和頸動脈粥樣硬化發(fā)生和斑塊形成存在一定關(guān)聯(lián)，同時還可加重腎功能損害，影響整體預(yù)后成效[2]。有研究資料顯示，慢性腎衰竭患者血清C反應(yīng)蛋白(CRP)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平異常升高是頸動脈粥樣硬化發(fā)生的重要危險因素，但是關(guān)于3種血清因子和頸動脈粥樣硬化的臨床關(guān)系和作用機制仍尚未完全明確[3]。鑒于此，本研究將慢性腎衰竭非透析患者和健康志愿者血清CRP、IL-6和MMP-9水平及頸動脈超聲檢查結(jié)果進行對比分析，旨在為此類患者頸動脈粥樣硬化發(fā)生機制研究奠定基礎(chǔ)。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取我院腎病科于2014年2月—2016年2月收治的46例慢性腎衰竭非透析患者作為研究組，另選取50例同期行常規(guī)體檢的健康志愿者作為對照組。研究組患者符合《腎臟病學(xué)》[4]中慢性腎衰竭相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，均未行透析治療，且近1個月內(nèi)未給予影響血清CRP、IL-6和MMP-9水平干預(yù)；對照組為健康志愿者；所有入選者均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并各類急慢性感染，或免疫反應(yīng)性疾病者；②合并惡性腫瘤，嚴(yán)重貧血，嚴(yán)重肝、肺、心功能不全，或出凝血性疾病者；③存在固醇類藥物治療史，或合并有急性心腦血管病者；④拒絕配合檢查者。研究組中男30例，女16例，年齡45～72(59.83±6.71)歲，參照《當(dāng)代內(nèi)科學(xué)》[5]臨床分期：CKD 2期14例，CKD 3期20例，CKD 4期8例。對照組中男35例，女15例，年齡43～70(58.31±6.56)歲。

1.2 方法

1.2.1 血清CRP、IL-6和MMP-9水平檢測方法 所有受試者于納入研究后次日同一時間段空腹抽取5 mL外周靜脈血于生化抗凝管中，震蕩后保存于-4 ℃冰箱中，并送至實驗室進行檢測。首先給予離心分離處理，臺式離心機參數(shù)設(shè)置：轉(zhuǎn)速3 000 r/min，時間15 min。取上清液保存于-20 ℃恒溫冰箱中保存，并于24 h內(nèi)完成檢測，保存過程中注意避免反復(fù)凍融。采用全自動生化分析儀(日本日立，7600型)、酶標(biāo)儀(美國Bio-rad，680型)及試劑盒(南京建成生物研究所)對血清CRP、IL-6和MMP-9水平分別采用速率散射免疫比濁法、酶聯(lián)免疫法和明膠酶譜分析法檢測，操作過程中應(yīng)嚴(yán)格遵照使用說明書，并在無菌環(huán)境下完成。為減小誤差，可重復(fù)測量3次，求取平均值。

1.2.2 頸動脈超聲檢查方法 所有受試者于納入研究后次日行頸動脈超聲檢查，采用超聲診斷儀(荷蘭飛利浦，IU22型)、配套高頻線陣探頭(L12-5型)和凸陣探頭(C5-2型)進行檢查。具體操作：囑受試者仰臥并將頸部充分暴露使頭部向檢查對側(cè)偏移，沿胸鎖乳突肌外緣自下而上開始掃描，掃描方式為長短軸切面結(jié)合模式，聲束和血流間夾角≤60°，對頸總動脈起始段、中段、分叉部以及顱外段進行探查，對動脈斑塊數(shù)量、大小、形狀、表面形態(tài)以及聲影特征進行詳細(xì)觀察，掃描參數(shù)：線陣探頭頻率5～12 MHz，凸陣探頭頻率2～65 MHz。測定IMT數(shù)值，取雙側(cè)IMT平均值作為最終結(jié)果。依據(jù)頸動脈超聲IMT檢查結(jié)果，將研究組患者分為內(nèi)膜正常組25例和內(nèi)膜增厚組21例，其中前者IMT≤1 mm，后者IMT>1 mm。

1.3 觀察指標(biāo) 對比研究組和對照組血清CRP、IL-6和MMP-9水平、IMT等；對比研究組中內(nèi)膜正常組和內(nèi)膜增厚組血清CRP、IL-6和MMP-9水平、IMT等；分析慢性腎衰竭患者血清CRP、IL-6和MMP-9水平與IMT相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1 對照組和研究組血清CRP、IL-6、MMP-9水平及IMT比較 研究組血清CRP、IL-6和MMP-9水平及IMT均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對照組(P均<0.05)。見表1。

表1 2組血清CRP、IL-6、MMP-9水平及IMT比較

2.2 內(nèi)膜正常組和內(nèi)膜增厚組血清CRP、IL-6、MMP-9水平及IMT比較 研究組46例患者中頸動脈超聲檢查結(jié)果顯示共有25例IMT≤1.0 mm者(即內(nèi)膜正常組)，共有21例IMT>1.0 mm者(即內(nèi)膜增厚組)。內(nèi)膜增厚組血清CRP、IL-6和MMP-9水平均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于內(nèi)膜正常組(P均<0.05)。見表2。

2.3 研究組血清CRP、IL-6和MMP-9水平與IMT的相關(guān)性 研究組中IMT和血清CRP、IL-6和MMP-9水平均存在明顯正向相關(guān)性(r=0.698,0.407，0.523，P<0.05)。見圖1～3。

3 討 論

表2 內(nèi)膜正常組和內(nèi)膜增厚組血清CRP、IL-6、MMP-9水平及IMT比較

圖1 研究組血清CRP和IMT相關(guān)性分析圖

圖2 研究組血清IL-6和IMT相關(guān)性分析圖

圖3 研究組血清MMP-9和IMT相關(guān)性分析圖

慢性腎衰竭隨著病情發(fā)展可導(dǎo)致多種并發(fā)癥，其中以心腦血管病對其預(yù)后和生活質(zhì)量影響最為嚴(yán)重。隨著頸動脈粥樣硬化逐漸加重、斑塊形成，將會導(dǎo)致缺血性腦血管病，嚴(yán)重者甚至形成腦卒中，危及生命。因此，如何阻斷慢性腎衰竭患者頸動脈粥樣硬化進程已成為當(dāng)前研究的熱點和重點課題。目前慢性腎衰竭發(fā)生頸動脈粥樣硬化的作用機制尚未完全明確，僅有既往研究證實炎癥反應(yīng)、細(xì)胞外基質(zhì)降解和重塑在頸動脈粥樣硬化形成和發(fā)展過程中起著重要參與作用[6]。慢性腎衰竭患者血清CRP、IL-6和MMP-9水平由于腎臟結(jié)構(gòu)和功能損傷異常升高，并且隨著病情加重升高趨勢更為明顯。而血清CRP和IL-6均可通過不同途徑加重血管炎癥反應(yīng)，加之MMP-9對動脈血管上皮細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)的降解作用使頸動脈血管損傷逐漸加重，進而導(dǎo)致粥樣硬化發(fā)生和斑塊形成[7]。而此種病理生理改變現(xiàn)象則會使得心腦血管并發(fā)癥發(fā)生風(fēng)險明顯升高，另一方面又會加重腎臟損傷程度，影響預(yù)后。

血清CRP是一種急性時相反應(yīng)蛋白，在慢性腎衰竭患者頸動脈粥樣硬化過程中既具有直接致病作用，也可間接誘導(dǎo)血管損傷加重，是心血管動脈粥樣硬化性并發(fā)癥的獨立危險因素。正常狀態(tài)下，該因子水平交易，但是在慢性腎衰竭患者中機體損傷會誘導(dǎo)并加重炎癥反應(yīng)，使得血清CRP水平異常升高。該因子又會作用于頸動脈、冠狀動脈等重要血管，引發(fā)損傷[8]。另一方面，慢性腎衰竭患者機體內(nèi)毒素排除障礙、病原菌入侵風(fēng)險增加等均會導(dǎo)致炎癥因子水平異常升高。除CRP外，血清IL-6升高程度也較為明顯，且在頸動脈粥樣硬化過程中也具有重要推動作用。IL-6是促炎癥因子釋放中心，慢性腎臟損傷是持續(xù)性微炎癥反應(yīng)存在的基礎(chǔ)，也是頸動脈粥樣硬化損害持續(xù)存在、免疫炎癥反應(yīng)逐漸加重的前提條件[9]。劉小菁等[10]研究表明，慢性腎衰竭晚期透析患者若血清CRP>11.5 mg/L，IL-6>200 pg/mL，則多病死于28個月內(nèi)，且多因感染死亡，部分存活病例也被發(fā)現(xiàn)存在較為嚴(yán)重的頸動脈粥樣硬化病變，且多并發(fā)心腦血管病。另有研究表明[11]，血清CRP和IL-6可通過不同作用途徑對頸動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷，同時誘導(dǎo)凝血功能發(fā)生異常，均可導(dǎo)致頸動脈粥樣硬化。本研究中，慢性腎衰竭患者中血清CRP和IL-6水平和IMT均存在明顯正向相關(guān)性(r=0.698，0.407)，提示可將三者作為預(yù)后輔助評估指標(biāo)，且對于血清CRP和IL-6異常升高者應(yīng)及時給予控制，以免發(fā)生粥樣硬化性心腦血管并發(fā)癥。

MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中重要的一員，主要由結(jié)締組織細(xì)胞分泌，在全身各種細(xì)胞外基質(zhì)的降解過程中均積極參與。該因子具有廣泛的生物學(xué)活性，且作用底物多種多樣，尤以彈性蛋白、明膠蛋白、黏結(jié)蛋白等作用效果更為明顯。在正常生理狀態(tài)下，MMP-9可通過對細(xì)胞外基質(zhì)降解和重構(gòu)的調(diào)節(jié)作用改善細(xì)胞黏著狀態(tài)，對細(xì)胞外基質(zhì)任何成分均可自由切斷[12]。但是在慢性腎衰竭患者中，機體臟器損傷和病理反應(yīng)均會導(dǎo)致MMP-9水平異常升高，此時該因子對血管基底膜降解作用呈現(xiàn)特異性特征，對局部的膠原組織降解作用顯著，同時參與血管平滑肌細(xì)胞的遷移，誘導(dǎo)其功能發(fā)生改變[13]。故而在慢性腎衰竭患者頸動脈血管損傷和粥樣硬化發(fā)生過程中，MMP-9起著至關(guān)重要的作用。此外，MMP-9可在血清CRP、IL-6和TNF-α等多種促炎癥因子作用和刺激下被異常激活，使得其表達水平明顯升高[14]。國外相關(guān)臨床研究報道，通過對慢性腎衰竭患者和正常健康志愿者血清MMP-9及頸動脈粥樣硬化程度和狀態(tài)進行比較，發(fā)現(xiàn)前者MMP-9、IMT、斑塊形成率均較后者異常升高，且MMP-9和IMT呈現(xiàn)強烈正向相關(guān)性[15]。本研究結(jié)果顯示，研究組血清MMP-9及IMT較對照組顯著升高，內(nèi)膜正常組和內(nèi)膜增厚組數(shù)據(jù)也存在顯著差異，且IMT和MMP-9水平相關(guān)性明確，提示血清MMP-9異常升高在慢性腎衰竭患者頸動脈粥樣硬化過程中可能起著重要參與作用。

綜上所述，慢性腎衰竭患者血清CRP、IL-6和MMP-9水平均較正常健康人群顯著升高，且前者頸動脈超聲檢查IMT也明顯高于后者，此類患者中血清CRP、IL-6和MMP-9水平和IMT均存在明顯正相關(guān)性，推測頸動脈粥樣硬化的發(fā)生和其血清CRP、IL-6和MMP-9水平異常升高存在一定關(guān)聯(lián)，可以此為突破點，控制此類患者血清CRP、IL-6和MMP-9水平，降低心血管并發(fā)癥風(fēng)險，改善此類患者臨床預(yù)后。

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王潔，E-mail:yyfywj@126.com

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