徐建平

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團庫爾勒第二師畜牧獸醫(yī)工作站841023）

高致病型藍耳病快速檢測技術(shù)的應(yīng)用

徐建平

（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團庫爾勒第二師畜牧獸醫(yī)工作站841023）

1 高致病型藍耳病快速檢測卡簡介

1.1 檢測卡的原理

檢測卡利用抗體快速金標檢測卡法 （簡稱金標法）檢測抗體效價。金標法是在酶聯(lián)免疫吸附法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種固相標記免疫測定新技術(shù)。其檢測原理是以微孔濾膜為載體，包被已知抗原，加入待檢標本后，經(jīng)濾膜的毛細管作用，標本中抗體與膠體金結(jié)合的抗原相結(jié)合，再通過與膜上包被的抗原結(jié)合顯色而達到檢測目的。金標法的試劑為試紙條形式，即為金標試紙條。判定標準：藍耳抗體陽性≥1：40；藍耳抗體陰性＜1：40。

1.2 特點

操作簡便、特異性好、快捷迅速、易于判斷。

1.3 檢測卡使用說明

（1）檢測卡在夏天、冬天都可使用，但為加快檢測速度，建議使用4000轉(zhuǎn)的簡易離心機快速析出血清，使整個檢測過程在5～10min完成。

（2）說明：只用于防疫的監(jiān)督檢查、檢疫的監(jiān)督檢查，免疫自查，不作為免疫抗體結(jié)果的最終結(jié)論。

2 藍耳病檢測卡檢測母源抗體

（1）試劑：所用疫苗：豬藍耳疫苗 （NVDC-JXA1株）吉林和元生物工程股份有限公司生產(chǎn)，批號：20131213；疫苗使用方法藍耳1～2頭份。

（2）采用檢測卡 （金標法）在農(nóng)牧團場，選取免疫效價合格的母豬所產(chǎn)的仔豬為試驗對象。隨機抽檢在21日齡斷奶的6窩仔豬，每窩仔豬抽檢采血4～6頭，共31頭仔豬。以剛出生沒有吃上初乳為0日齡，第2天為1日齡，以此類推?？梢钥闯鲇仔笤谖闯猿跞榍?，體內(nèi)基本沒有抗體，吃過初乳后，抗體迅速上升，隨著日齡的增加，抗體效價呈明顯的線性下降之勢。

（3）仔豬藍耳母源抗體合格率，在0日齡為零，在25日齡達到最高，到40日齡是降到合格以下，所以在40日齡就可以作為豬藍耳首免日齡。母源抗體檢測結(jié)果見圖1。

3 藍耳病檢測卡檢測免疫效價

（1）在農(nóng)牧團場豬場，采用檢測卡對仔豬進行藍耳的免疫，采用檢測卡查看首免、二免、三免測定抗體效價。

（2）單獨注射藍耳疫苗，每次注射間隔15d，檢測52頭仔豬，免疫15d后采血樣。免疫合格率，在首免時效果不理想，二免效果較好，三免最好。但采用spss軟件分析第2次和第3次差異也不顯著，免疫效價檢測結(jié)果見圖2。

（3）結(jié)果。注射一次疫苗效果較差，免疫合格只在20～30%左右。2次免疫效果可以達到合格水平，3次免疫比2次效果好，但差異不顯著。故一種疫苗至少免疫2次。

4 討論

檢測卡具有使用簡單、快捷、準確、易于操作、夏天、冬天都可使用的特性，且在動物防疫工作中的免疫自查、檢疫、監(jiān)督工作上都可使用，其應(yīng)用前景廣闊，值得推廣應(yīng)用。

圖1 母源抗體檢測結(jié)果

圖2 免疫效價檢測結(jié)果

新疆建設(shè)兵團第二師科技項目 （2013NYGG1）。