王軍 周迎春 陳曦 王倩 何長生 劉華 沈艷 占松鶴*

（1，安徽省動物疫病預防與控制中心 230091；2，安徽省畜禽防治技術服務中心 230091）

安徽省2015年新城疫集中監(jiān)測與分析

王軍1，2周迎春1陳曦1王倩1何長生1劉華1沈艷1占松鶴1*

（1，安徽省動物疫病預防與控制中心 230091；2，安徽省畜禽防治技術服務中心 230091）

2015年，隨機從安徽省16個地市、2個直管縣采集雞血清7052份、雞棉拭子樣品9833份，應用血凝和血凝抑制試驗檢測新城疫免疫抗體；應用新城疫病毒熒光RT-PCR檢測新城疫病原。結果顯示，新城疫免疫抗體平均合格率為94.80%，其中上半年的合格率為96.30%、下半年的合格率為93.74%；新城疫病原學陽性率為1.02%，其中上半年的陽性率為0.31%、下半年的陽性率為1.73%。說明安徽省雖然新城疫免疫效果良好，但是存在雞只帶毒情況，應引起重視。

新城疫；免疫抗體；監(jiān)測；分析；2015年；安徽省

新城疫（Newcastle Disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）強毒株引起的、以感染禽類為主的一種急性、熱性、敗血性和高度接觸性傳染病[1]，可感染大多數(shù)種類的鳥類，對于易感的家禽具有高度感染性和致死性，以呼吸困難、嚴重下痢、黏膜和漿膜出血、神經(jīng)紊亂為特征[2]，具有很高的發(fā)病率和死亡率，是危害養(yǎng)禽業(yè)的一種主要傳染病，與高致病性禽流感并列為世界公認的最重要的兩個禽類疫病。新城疫不僅可對家禽造成嚴重危害，對國際貿易也有嚴重影響[3,4]。世界動物衛(wèi)生組織 （OIE）將新城疫列為法定報告的動物疫病，我國農(nóng)業(yè)部將其列為一類動物疫病?！秶抑虚L期動物疫病防治規(guī)劃 （2012-2020）》將新城疫列為優(yōu)先防治和重點防范的動物疫病[5]。據(jù)農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局 《獸醫(yī)公報》公布的數(shù)據(jù)顯示[6]，自2005年5月以來，我國新城疫發(fā)生的頻率、數(shù)量和規(guī)?？傮w在減少，但我國每年仍然至少有一半以上的省市區(qū)有該病發(fā)生。眾多臨床病例表明，新城疫在我國家禽群體中仍呈常在的地方流行，仍然是養(yǎng)禽業(yè)必須關注的重點疫病[7]。為全面掌握安徽省新城疫免疫效果及雞只帶毒情況，2015年在安徽省范圍內進行了新城疫集中監(jiān)測工作，從安徽省16個地市、2個直管縣采集雞血清7052份、雞棉拭子樣品9833份，進行了新城疫免疫抗體及病原學的檢測，以便科學研判安徽省新城疫防控形勢，為防控決策提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗器材

單道、8道、12道移液器若干，90°96孔V型微量反應板若干，100ml、500ml量筒，微量振蕩器、KingFisher Flex全自動核酸提取儀、MIKRO-200R高速冷凍離心機、ABI StepOne Plus實時熒光定量PCR儀。

1.2 待檢樣品

來自安徽省16個地市、2個直管縣的雞血清及咽喉/泄殖腔棉拭子樣品共計16885份，其中：雞血清7052份；咽喉/泄殖腔棉拭子樣品9833份。

1.3 檢測試劑

新城疫血凝抑制試驗抗原 （批號：20150403）、陽性血清 （批號：20150403）、新城疫熒光RT-PCR試劑盒 （批號：20150609），均由哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司生產(chǎn)。

1.4 抽樣方法

分上、下半年2次集中監(jiān)測。抽樣范圍覆蓋安徽省16個地市、2個直管縣，涉及57個種雞場、153個商品雞規(guī)模養(yǎng)殖場、56個村散養(yǎng)戶、107個家禽交易市場/農(nóng)貿市場等共計373個采樣場 （點、戶）。樣品采集：每個場群 （自然村）抽樣數(shù)一般不少于30份，樣品包括血清和對應咽喉/泄殖腔雙份棉拭子。雞翅靜脈采血，每份約2ml，自然凝固析出血清，離心分離后備用；咽喉/泄殖腔雙份棉拭子樣品要保存在PBS或生理鹽水中。

1.5 檢測方法與判定標準

1.5.1 方法

參照2015年國家動物疫病監(jiān)測與流行病學調查計劃指定的方法[8]，依據(jù)GB/T16550-2008和試劑盒說明書進行。

（1）血清學檢測方法。采用血凝 （HA）與血凝抑制試驗（HI），檢測新城疫免疫抗體。

（2）病原學檢測方法。采用熒光RT-PCR，檢測新城疫病毒。

1.5.2 判定

（1）HI：抗體效價≥25判定為合格。存欄禽群免疫抗體合格率≥70%判定為合格。

（2）熒光RT-PCR：結果為陽性的即判定為新城疫病原學陽性。

2 結果

2015年新城疫集中監(jiān)測共檢測雞血清7052份，合格6685份，平均免疫抗體合格率94.80%；檢測咽喉/泄殖腔棉拭子樣品9833份，陽性100份，陽性率1.02%。檢測結果見表1。

2.1 血清學檢測結果

2015年共檢測雞血清7052份，其中：種雞血清630份，合格616份，免疫抗體合格率97.78%；規(guī)模場商品雞血清3192份，合格3043份，免疫抗體合格率95.33%；散養(yǎng)雞血清1133份，合格1058份，免疫抗體合格率93.38%；交易市場雞血清2097份，合格1968份，免疫抗體合格率93.85%。結果見表2。

由表2可以看出，無論上半年還是下半年，種雞、規(guī)模場商品雞、散養(yǎng)雞、交易市場雞的免疫抗體合格率均在90%以上，遠遠超過農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的合格標準。

所檢雞血清樣品來自373個采樣場 （點、戶），其中344個場 （點、戶）的免疫抗體合格率達70%以上，群體免疫合格率為92.23%。其中，種雞場、商品雞場、散養(yǎng)戶、交易市場的合格率分別為：100% （57/57）、95.42% （146/153）、87.50% （49/56）、86.92% （93/107）。

表1 2015年新城疫集中監(jiān)測血清學及病原學檢測結果

表2 2015年新城疫集中監(jiān)測免疫抗體檢測結果

表3 2015年新城疫集中監(jiān)測病原學檢測結果 單位：個、%、份

上述結果表明，安徽省新城疫免疫效果良好，具有較高的保護水平。

2.2 病原學檢測結果

2015年共監(jiān)測373個采樣場 （點、戶）的雞咽喉/泄殖腔棉拭子樣品9833份，在1個商品雞場、2個村散養(yǎng)戶和7個家禽交易市場的100份樣品中檢出新城疫病毒，個體陽性率為1.02% （100/9883）； 群體陽性率為2.68% （10/373）。結果見表3。

由表3知，安徽省家禽交易市場/農(nóng)貿市場的雞只帶毒率相對較高，存在感染新城疫的風險。

3 討論

（1）目前，雞新城疫尚無有效治療藥物，預防接種是防控該病的關鍵。由于新城疫是一種具有較長歷史的傳染病，養(yǎng)殖場/戶一直都十分重視且主動實施新城疫疫苗的免疫接種工作，監(jiān)測結果中新城疫個體免疫合格率為94.80%，群體免疫合格率為92.23%便可得到印證。結果表明，安徽省新城疫集中免疫工作扎實，免疫措施到位。

（2）從病原學檢測結果看，安徽省新城疫存在雞只帶毒情況，雖然未發(fā)現(xiàn)臨床病例，但是隱性帶毒的現(xiàn)象還是存在發(fā)病風險。應加強相關陽性場點的監(jiān)測、檢疫工作，定期開展流行病學調查，密切關注這些場點的疫病動態(tài)。對檢出的NDV陽性雞 （帶新城疫病毒雞），及時采取隔離、消毒、撲殺等綜合措施，并用疫苗作緊急預防接種。最大限度地降低環(huán)境中新城疫病毒對禽群的潛在威脅，有效控制新城疫病毒的傳播和新城疫疫情的發(fā)生。對于家禽交易市場/農(nóng)貿市場，因禽的品種、來源復雜、免疫情況不明、衛(wèi)生條件差等問題，更容易引起疫病的發(fā)生，因此要加倍重視。

（3）根據(jù)監(jiān)測結果，種雞場的新城疫免疫抗體合格率最高，病原學檢測未檢出陽性個體，表明防控效果較好，這可能與種雞飼養(yǎng)周期長，免疫次數(shù)多，養(yǎng)殖戶對種雞的免疫接種及飼養(yǎng)管理重視程度較高有關。商品雞規(guī)模養(yǎng)殖場、村散養(yǎng)戶可從中得到啟示，平時要加強飼養(yǎng)管理、注重強化免疫、定期進行免疫監(jiān)測，以便在新城疫防控方面取得較好效果。

（4）做好新城疫集中監(jiān)測工作，不僅可以隨時掌握雞群的免疫狀態(tài)，制定科學合理的免疫程序；還可以及時發(fā)現(xiàn)并隨時淘汰NDV陽性雞。加強監(jiān)測是現(xiàn)階段降低新城疫流行的重要手段。有研究表明，新城疫病毒的宿主范圍已經(jīng)明顯擴大，不僅能感染雞，也能感染鴨、鵝發(fā)病，迄今能自然或人工感染的禽類已超過250多種[9]。目前國內多個省份均有水禽新城疫發(fā)生流行的相關報道，并呈擴大流行趨勢，造成很大經(jīng)濟損失[7]。因此，今后在開展監(jiān)測工作時要加強對水禽新城疫的監(jiān)測，力爭做到監(jiān)測范圍更大，覆蓋面更廣。

[1]王志亮,劉華雷.新城疫[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社,2012.

[2]谷臣君,劉興盛,范安武,等.新城疫的研究進展[J].中國畜禽種業(yè),2012,8(2)：139-140.

[3]劉華雷,王志亮.新城疫的流行歷史與現(xiàn)狀[J].中國動物檢疫,2015,32(6)：1-4.

[4]李謂娟.廈門市同安區(qū)規(guī)模養(yǎng)雞場新城疫調查[J].福建畜牧獸醫(yī),2015,37(5)：5-6.

[5]楊濤,韋欣捷,陳瓊,等.廈門市規(guī)模禽場新城疫群流行率橫斷面研究估計[J].中國動物檢疫,2014,31(11)：26-29.

[6]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局.獸醫(yī)公報報[EB/OL].[2005-01-2014-06].http：//www.agri.gov.cn/.

[7]丁壯,尹仁福,薛聰,等.新城疫流行病學新特點及鵝新城疫防控策略[J].中國獸醫(yī)學報,2015,35(1)：159-168.

[8]農(nóng)業(yè)部.關于印發(fā)《2015年國家動物疫病監(jiān)測與流行病學調查計劃》的通知[Z].農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2015〕10 號.北京：農(nóng)業(yè)部,2015-04-01.

[9]劉秀梵,胡順林.新城疫病毒的進化及其新型疫苗的研制[J].中國獸藥雜志,2010,41(1)：12-18.

王軍 （1983-），男，安徽省合肥市人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事動物疫病防控工作。

*通訊作者：占松鶴 （1970-），男，安徽省合肥市人，博士，主要從事動物疫病防控工作。