陳雯，胡元會，師帥，石晶晶，王彥云

（中國中醫(yī)科學院廣安門醫(yī)院，北京100053）

芪珀生脈顆粒對心氣虛小鼠心功能的影響*

陳雯，胡元會，師帥，石晶晶，王彥云

（中國中醫(yī)科學院廣安門醫(yī)院，北京100053）

[目的]應用高頻超聲心動圖評價芪珀生脈顆粒對心氣虛小鼠心功能的影響。[方法]采用控食、強迫游泳和大劑量心得安復合因素造模法建立小鼠心氣虛模型，隨機分為正常對照組、模型組、陽性藥對照組、芪珀生脈大、中、小劑量組，給藥14 d后，測定舒張末期和收縮末期左室內徑（LVIDd、LVIDs）；舒張末期和收縮末期左室后壁厚度（LVPWd、LVPWs）；舒張末期和收縮末期室間隔厚度（IVSd、IVSs）；舒張末期和收縮末期左室容積（LVEDV、LVESV）；左室射血分數（EF）、左室短軸縮短率（FS）等指標，評價各組心功能變化。[結果]與正常對照組比，模型組小鼠的心功能明顯下降，陽性藥對照組、芪珀生脈大、中劑量組的心功能相關指標與模型組相比有明顯改善（P＜0.05或P＜0.01）。[結論]芪珀生脈顆粒能降低心氣虛小鼠LVIDs和LVESV，增加LVPWs和IVSs，抑制心氣虛小鼠左心室結構改變，同時升高EF，FS和每搏輸出量（SV），改善小鼠心功能。

芪珀生脈顆粒；心氣虛；心功能

心氣虛證為心血管疾病的常見證型之一，臨床可見心悸、氣短、神疲、活動后加重、面色淡白、自汗、舌質淡和脈虛或弱等癥狀，是許多心血管疾病的基本病理改變基礎。芪珀生脈顆粒處方來源于臨床經驗方，用于心氣虛證的治療，療效顯著。為驗證、探討其作用機制，課題組復制了小鼠心氣虛證模型，應用超聲心動圖評價芪珀生脈顆粒對心氣虛小鼠心功能的干預作用，為臨床用藥提供科學依據。

1　材料

1.1實驗動物昆明種小鼠，SPF級，雌雄各半，體質量20-22 g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，合格證號：（SCXK京2012-0001）。

1.2實驗藥品及儀器芪珀生脈棕褐色浸膏由本院制劑中心提供；鹽酸普萘洛爾片即心得安片（批號：B150801）山西云鵬制藥有限公司生產；補心氣口服液（批號：150603）湖北福人金身藥業(yè)有限公司；高分辨小動物超聲成像系統(tǒng)（Vevo 770，加拿大Visual Sonics生產）。

2　方法

2.1小鼠心氣虛證模型的建立參照文獻[1-2]心氣虛證造模方法。實驗全程造模小鼠連續(xù)控食，按基礎進食量（即成齡小鼠靜息狀態(tài)下日采食量，每只小鼠每日喂精飼料75 g/kg）進食24 d。每日在30℃水溫的游泳缸中強迫負重（小鼠自身體質量的5%）游泳至力竭。實驗20 d后，小鼠每日灌服心得安溶液5 mL/kg（即24 mg/kg體質量），連續(xù)4 d，造模結束。

2.2分組與給藥昆明種小鼠96只，雌、雄各半。雌、雄鼠分別采用隨機數字表法進行分組，雌、雄鼠各分為6組，每組8只。模型對照組（模型組），補心氣口服液陽性藥對照組（陽性對照組），芪珀生脈小劑量組，芪珀生脈中劑量組，芪珀生脈大劑量組和正常對照組（正常組）。

芪珀生脈濃縮浸膏成人用量每天20 g浸膏。根據成人臨床劑量實驗小鼠各組給藥劑量如下：小劑量組（5倍）1.67g（/kg·d）；中劑量組（10倍）3.33g（/kg·d）；大劑量組（20倍）6.67 g（/kg·d）；補心氣組（10倍）0.05 mL（/kg·d），各組小鼠于造模第11天，負重游泳前1 h灌胃給藥，連續(xù)給藥14 d，模型組、正常組灌服等劑量生理鹽水。正常組小鼠實驗全過程自由飲食，不負重游泳，不灌服心得安。

2.3心功能測定根據高分辨小動物超聲成像系統(tǒng)的操作要求，異氟烷與氧氣混合氣對小鼠進行氣體吸入麻醉，將4個電極與小鼠四肢末端相連并用膠布固定，運用RMV707B型高頻超聲探頭對小鼠進行超聲心動圖檢查，在取得滿意的胸骨旁左心室長軸二維圖像后，測量乳頭肌水平左心室流出道寬度和心率；在短軸水平取得二維圖像后，在乳頭肌水平將M型取樣線垂直于室間隔與左心室后壁獲得M型超聲心動圖，測定：1）舒張末期和收縮末期左室內徑（LVIDd、LVIDs）。2）舒張末期和收縮末期左室后壁厚度（LVPWd、LVPWs）。3）舒張末期和收縮末期室間隔厚度（IVSd、IVSs）。4）舒張末期和收縮末期左室容積（LVEDV、LVESV）。5）左室射血分數（EF）、左室短軸縮短率（FS）、每搏排血量（SV）、心率（HR）等由軟件自動計算得出，每組原始數據取連續(xù)3個心動周期的平均值[3－4]。

2.4統(tǒng)計學分析數據采用SPSS18.0軟件統(tǒng)計分析，實驗結果以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。由于雌、雄鼠生理指標差異較大，分別統(tǒng)計。

3　結果

結果表明，與正常對照組相比，心氣虛模型組小鼠LVIDs、LVESV明顯增加（P＜0.01），LVPWs、IVSs減小（P＜0.01），EF、FS、SV、HR明顯降低（P＜0.01），提示心氣虛造模使小鼠心率下降，左心室收縮末期的結構明顯變化，左室收縮功能減退，心臟泵血機能明顯下降，符合臨床心氣虛證心功能改變特征[5]，與文獻報道心氣虛證動物模型結果一致[6－7]。

與模型組相比，雌、雄性小鼠芪珀生脈大劑量組超聲心動圖各指標均有顯著改善，結構方面，可對抗心氣虛小鼠LVIDs和LVESV的擴張（P＜0.05），可抑制IVSs變?。≒＜0.01），其中雄性小鼠大劑量組還可抑制LVPWs變薄（P＜0.01）；收縮功能方面，雌、雄性小鼠芪珀生脈大劑量組可升高心氣虛小鼠EF、FS、SV（P＜0.05，P＜0.01），改善左心泵血功能。雌、雄性小鼠芪珀生脈中劑量組也可明顯提高心氣虛小鼠EF、FS（P＜0.05），但對心氣虛小鼠左心室結構方面影響較小。同時，陽性對照藥補心氣口服液組也可從左心室結構和功能方面提高心氣虛小鼠心功能，與模型組比較差異顯著（P＜0.05，P＜0.01）。結果見表1、表2。

4　討論

心血管疾病是全球范圍內造成死亡的最主要原因，患病率持續(xù)上升，中國心血管病患者已達2.9億，成為中國所有疾病發(fā)病率和病死率的第一位。在心系疾病中，心氣虛證為常見證型[8－9]，因此，對心氣虛證研究是中醫(yī)防治心血管疾病的關鍵。近年研究認為心功能不全與心氣虛證密切相關[10－12]，王碩仁[13]將103例冠心病患者分為心氣虛血瘀證與非心氣虛血瘀證兩組，多普勒超聲心動圖檢測發(fā)現心氣虛證表現出左室舒張和收縮功能的減弱，研究結果表明，左室收縮功能評價對心氣虛診斷有高特異性（88%），因此心功能異?？勺鳛樵\斷心氣虛證的重要依據。

表1　雄鼠各組心臟超聲相關指標比較（±s）Tab.1　Echocardiographic indexes of male rats in each group（±s）

表1　雄鼠各組心臟超聲相關指標比較（±s）Tab.1　Echocardiographic indexes of male rats in each group（±s）

注：與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別動物數IVSs（mm）LVPWs（mm）LVIDs（mm）LVESV（μL）EF（%）FS（%）SV（μL）HR（次/分）正常組81.48±0.19**1.55±0.23**2.04±0.37**14.12±6.02**78.25±5.22**46.51±5.06**48.72±10.55**430±33.81**模型組80.86±0.070.82±0.103.15±0.4941.77±15.1142.14±6.9221.70±4.2431.21±6.08162±11.63陽性對照組81.08±0.09**0.99±0.17*3.07±0.2635.63±6.4749.12±2.57**25.95±3.01*35.34±3.45181±39.32芪珀生脈大劑量組81.02±0.11**1.02±0.20**2.79±0.37*30.17±9.31*54.50±7.16**30.11±4.57**38.08±4.49*185±35.66芪珀生脈中劑量組80.93±0.090.88±0.133.01±0.1935.49±5.7148.20±3.17*25.81±4.25*33.18±5.53154±37.75芪珀生脈小劑量組80.90±0.090.85±0.082.97±0.2938.73±6.8045.75±3.8823.36±2.2533.62±6.16177±23.54

表2　雌鼠各組心臟超聲相關指標比較（±s）Tab.2　Echocardiographic indexes of female rats in each group（±s）

表2　雌鼠各組心臟超聲相關指標比較（±s）Tab.2　Echocardiographic indexes of female rats in each group（±s）

注：與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

組別動物數IVSs（mm）LVPWs（mm）LVIDs（mm）LVESV（μL）EF（%）FS（%）SV（μL）HR（次/分）正常組81.17±0.11**1.31±0.35**2.01±0.36**13.56±6.21**72.16±7.94**40.76±6.35**33.66±6.50**449±60.37*模型組80.73±0.070.73±0.053.04±0.5535.08±12.7641.15±9.6519.88±5.4815.87±4.84182±60.26陽性對照組80.84±0.07*0.87±0.112.57±0.34*25.57±7.14*50.43±1.80*25.62±1.94*25.57±7.80*216±36.36芪珀生脈大劑量組80.86±0.08**0.90±0.182.54±0.49*25.48±10.40*54.19±9.60**27.15±7.11**25.94±10.72*236±51.89芪珀生脈中劑量組80.91±0.11**0.90±0.082.71±0.3127.86±8.0548.99±8.66*25.22±5.74*23.35±6.06226±63.58芪珀生脈小劑量組80.82±0.090.83±0.102.91±0.5830.37±9.6740.26±5.5219.37±2.9920.74±17.28217±45.44

從實驗結果可以看出，經過復合因素造模24 d，雌雄小鼠體質量明顯下降，雄鼠正常組體質量（39.96± 3.62）g，模型組（17.65±0.91）g；雌鼠正常組體質量（27.30±2.91）g，模型組（14.81±0.78）g，由數據可知雌雄小鼠模型組體質量與正常組差異非常顯著（P＜0.01）。模型組小鼠可見精神萎靡、形體瘦弱、毛發(fā)枯槁、鼻尾顏色淡青等心氣虛癥狀；反映心臟收縮功能的指標均呈現明顯降低的趨勢，表明心臟的收縮功能受到抑制，提示復合因素造?？擅黠@降低小鼠的心功能，心功能損傷可能是造成心氣虛證的重要機制。

芪珀生脈顆粒以黃芪、北沙參、琥珀等藥組方，治療心氣虛之心悸，氣短，乏力臨床療效顯著。本實驗結果，由于雌、雄鼠體質量差異較大，雌性小鼠更加瘦弱，可見心臟超聲中心臟結構相關指標如IVSs、LVPWs、LVIDs和LVESV，雌鼠數值偏低，心臟SV也較雄鼠偏小，因此實驗數據雌、雄小鼠分別統(tǒng)計。結果表明，不論雌、雄鼠，芪珀生脈大、中劑量組均可升高心氣虛小鼠EF、FS，改善左心泵血功能，大劑量組還可提高心臟SV；心臟結構方面，不論雌、雄鼠，芪珀生脈大劑量組可對抗心氣虛小鼠LVIDs和LVESV，可抑制IVSs變薄，雄鼠大劑量組還可抑制VPWs變薄，說明芪珀生脈顆?？梢砸种菩臍馓撟C引起的心室結構的改變，對心肌有良好的保護作用。HR方面，實驗各組雌性小鼠心率均高于雄鼠，應與體質量，心氣虛程度，麻藥吸入量等有關。此外，本課題組研究發(fā)現芪珀生脈顆粒還可降低心氣虛小鼠心肌超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量，降低血清腫瘤壞死因子－α（TNF－α）含量，研究結果另文發(fā)表，因此推測芪珀生脈顆?？寡?、抗氧化作用是其保護心肌，改善心氣虛證小鼠心功能的可能機制。

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（本文編輯：高杉，滕曉東）

Effect of Qipo Shengmai granules on cardiac function in mice models of heart Qi deficiency syndrome

CHEN Wen,HU Yuan-hui,SHI Shuai,SHI Jing-jing,WANG Yan-yun
（Guang’anmen Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100053,China）

[Objective]Applied with echocardiography to observe the heart function change of heart Qi deficiency mice and evaluate the effect of Qipo Shengmai granules.[Methods]The model of heart Qi deficiency in mice was established by the method of controlling food, forced swimming and given large dose of propranolol.Kunming mice were randomly divided into normal control group,model group, positive control group and Qipo Shengmai granules high/medium/low dose group.After 14 days of administration,the changes of cardiac function refers to LVIDs,LVIDd,LVPWd,LVPWs,IVSd,IVSs,LVEDV,LVESV,EF,FS,in mice were determined.[Results]Compared with the model group and positive control group,the cardiac function of model group was significantly decreased.Compared with the positive control group,Qipo Shengmai granules high/medium dose group heart function improved significantly(P＜0.05 or P＜0.01). [Conclusion]Qipo Shengmai granules improves cardiac function in heart Qi deficiency mice.

Qipo Shengmai granule;heart Qi deficiency;heart function

R541

A

1672-1519（2016）11-0686-03

北京市科委“十病十藥”研發(fā)專項G20工程支撐保障（Z151100003815012）。

陳雯（1983-），女，碩士，主管藥師，從事中藥藥理研究。

胡元會，E-mail:gamwendy@163.com。

（2016-06-05）

10.11656/j.issn.1672－1519.2016.11.14