熊玉玲，夏小榮，朱玉林，李長(zhǎng)春，王亞亭

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兒童感染MRCNS的藥敏分析及SCCmec基因分型研究

熊玉玲，夏小榮，朱玉林，李長(zhǎng)春，王亞亭

目的 了解安徽地區(qū)兒童感染耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的耐藥現(xiàn)狀和葡萄球菌盒式染色體(SCCmec)基因型分布及各基因型的耐藥特點(diǎn)。方法 對(duì)安徽地區(qū)近6年臨床分離的兒童感染凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)進(jìn)行表型篩選，并利用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增mecA的方法收集MRCNS菌株。采用標(biāo)準(zhǔn)瓊脂倍比稀釋法測(cè)定MRCNS 16種抗菌藥物的最低抑菌濃度(MIC)值，同時(shí)利用PCR對(duì)MRCNS進(jìn)行SCCmec基因分型。結(jié)果 經(jīng)表型篩選及mecA基因檢測(cè)雙重方法共收集MRCNS 186株，包括耐甲氧西林表皮葡萄球菌、耐甲氧西林溶血葡萄球菌、耐甲氧西林人葡萄球菌及少數(shù)其他類型MRCNS，分別為45.7%(85/186)、24.7%(46/186)、18.8%(35/186)及10.8%(20/186)。耐藥分析顯示MRCNS對(duì)青霉素、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢曲松、亞胺培南、美羅培南耐藥率達(dá)100%，紅霉素和阿奇霉素的耐藥率大多在90%以上，對(duì)環(huán)丙沙星、克林霉素耐藥率為80%左右，對(duì)慶大霉素、左氧氟沙星的耐藥率為40%左右，對(duì)利福平的耐藥率為20%左右，對(duì)氯霉素的耐藥率為10%左右，對(duì)替考拉寧、萬(wàn)古霉素的耐藥率分別為2.2%(4/186)、0.5%(1/186)。186株MRCNS的SCCmec分型共有Ⅰ～Ⅴ 5種型別，以Ⅲ型為主，Ⅳ型檢出Ⅳa、Ⅳc、Ⅳd 3種亞型，并有較多的混合型存在。各基因型對(duì)多種抗菌藥物呈不同程度的耐藥。結(jié)論 安徽地區(qū)臨床分離的兒童MRCNS對(duì)多種常用抗菌藥物不敏感，具有多重耐藥性，其中出現(xiàn)萬(wàn)古霉素表型耐藥菌株，應(yīng)予警惕。不同類型的MRCNS所攜帶的SCCmec型別不同，SCCmecⅢ型為主要流行菌株。SCCmec基因型與耐藥譜有著密切的關(guān)系。

兒童；耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌；耐藥性；聚合酶鏈反應(yīng)；SCCmec基因型

凝固酶陰性葡萄球菌(coagulase negativeStaphylococcus, CNS)屬于革蘭陽(yáng)性球菌的重要一員，因不能產(chǎn)生血漿凝固酶和溶血素等物質(zhì)一直被認(rèn)為是皮膚黏膜的正常菌群或者機(jī)會(huì)致病菌。近年來，隨著分子生物學(xué)材料領(lǐng)域的迅速發(fā)展，許多侵入性診療技術(shù)以及新的高效廣譜抗菌藥物、激素、免疫抑制劑在兒科臨床中的廣泛應(yīng)用，由CNS造成的感染日趨嚴(yán)重，成為醫(yī)院感染的重要病原菌[1-2]。國(guó)內(nèi)外資料[3]顯示CNS是兒科感染最常見的病原菌，尤其是新生兒、早產(chǎn)兒、低出生體重兒敗血癥的常見病原菌，其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(methicillin resistant coagulase negativeStaphylococcus, MRCNS)占主導(dǎo)地位。兒童MRCNS的檢出率和多重耐藥性呈逐年增高趨勢(shì)，已成為兒科感染和臨床治療的重要問題。葡萄球菌盒染色體mec(Staphylococcalchromosomal cassettemec,SCCmec)是攜帶mecA基因的新型移動(dòng)基因元件，主要由攜帶mecA基因的mec基因復(fù)合體、編碼位點(diǎn)特異性重組酶的盒式染色體重組酶基因復(fù)合物以及功能未知的可變區(qū)域構(gòu)成，具有自發(fā)剔除、重組的特性，是葡萄球菌耐藥性產(chǎn)生、耐藥譜擴(kuò)大的根本原因[4]。該研究對(duì)安徽地區(qū)近6年兒童感染MRCNS菌株進(jìn)行SCCmec基因分型研究，為了解菌株來源、流行趨勢(shì)和臨床合理選用抗菌藥物以及制定MRCNS 感染的防治措施提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源及鑒定 收集安徽省細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)中心38所醫(yī)院近6年住院患兒的各種臨床送檢血液標(biāo)本無重復(fù)分離的MRCNS共186株。全部菌株已由Microscan WalkAway-40全自動(dòng)微生物分析儀(美國(guó)DADE公司)自動(dòng)鑒定系統(tǒng)初步鑒定，經(jīng)表型篩選后由聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)擴(kuò)增甲氧西林耐藥基因mecA而確定為MRCNS。質(zhì)控菌株ATCC43300、ATCC25923和ATCC29213由安徽省細(xì)菌耐藥監(jiān)控中心保存。

1.1.2 主要試劑和儀器

1.1.2.1 試劑 dNTP Mixture、Taq Buffer、DL 600 DNA Marker、DL 2 000 DNA Marker、6×Loading Buffer、瓊脂糖、PCR反應(yīng)引物均購(gòu)自上海生工生物工程公司；溴化乙錠干粉、溶葡萄球菌素(SIGMA)購(gòu)自大連寶生物公司；Mueller-Hinton(M-H)培養(yǎng)基、瓊脂粉均購(gòu)自英國(guó)Oxiod 公司。

1.1.2.2 抗菌藥物 用于MIC測(cè)定的抗菌藥物：苯唑西林、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢曲松、慶大霉素、氯霉素、克林霉素、紅霉素、阿奇霉素、青霉素、亞胺培南、美羅培南、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、萬(wàn)古霉素、替考拉寧、利福平共17種，均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，均在有效期內(nèi)使用。

1.1.2.3 儀器 多點(diǎn)接種儀(英國(guó) AQS Manufacturing公司)；電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海精宏公司)；32R低溫離心機(jī)(德國(guó)Hettich公司)；電子天平(上海名橋精密科學(xué)儀器公司)；凝膠成像系統(tǒng)(上海天能科技有限公司)；PCR 儀器(德國(guó)Biometra公司)；電泳儀加電泳槽(北京六一儀器廠)；超低溫冰箱(日本三洋制冷設(shè)備公司)；純水機(jī)(美國(guó)Labconco公司)；移液器(德國(guó)Eppendorf公司)；一次性玻璃試管、PCR管、EP 管、一次性細(xì)菌培養(yǎng)皿(上海生工生物工程技術(shù)有限公司)。

1.1.3 PCR引物 參照文獻(xiàn)[5]報(bào)道設(shè)計(jì)PCR引物序列，并在Pubmed上進(jìn)行BLAST基因序列比對(duì)，委托上海生工生物工程技術(shù)有限公司合成，見表1。

表1 SCCmec引物序列

1.2 方法

1.2.1 表型篩選MRCNS 參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2013推薦的表型篩選耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcusaureus, MRSA)的方法，用標(biāo)準(zhǔn)瓊脂倍比稀釋法進(jìn)行苯唑西林最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentration, MIC)值的測(cè)定及結(jié)果判讀，若苯唑西林MIC值≥0.5 μg/ml,則初篩該菌株為MRCNS，對(duì)初篩的MRCNS再進(jìn)行mecA基因檢測(cè)，兩種檢測(cè)方法均為陽(yáng)性者確定為MRCNS菌株。

1.2.2 DNA模板的提取 將平板上的經(jīng)16～18 h過夜培養(yǎng)的新鮮MRCNS(經(jīng)表型篩選后)單個(gè)菌落，加入200 μl滅菌去離子水和適量葡萄球菌溶菌素，混勻，100 ℃煮沸10～15 min后，4 ℃、10 000 r/min離心10 min，吸取上清液作為PCR擴(kuò)增反應(yīng)模板，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 PCR法鑒定MRCNS PCR反應(yīng)在0.5 ml薄壁管中進(jìn)行，總反應(yīng)體積為25 μl：10 mmol/L dNTP 0.5 μl，10 pmol/L上下游引物(表1)各1 μl，10×PCR buffer 2.5 μl，模板DNA 1 μl，TaqDNA聚合酶0.5 U(5 U/μl)，25 mmol/L MgCl21.5 μl，最后滅菌去離子水補(bǔ)齊至25 μl。擴(kuò)增條件：95 ℃預(yù)變性5 min，然后進(jìn)入PCR循環(huán)：95 ℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，30個(gè)循環(huán)，72 ℃延伸5 min；每次用標(biāo)準(zhǔn)株ATCC43300作陽(yáng)性對(duì)照。將5 μl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物和1 μl 6×Loading Buffer混勻后，加在1%瓊脂糖凝膠(含0.5 μg/ml溴化乙錠和1×TAE)上，電泳電壓為120 V，電流為80 mA、30 min，凝膠成像分析系統(tǒng)攝像，保存結(jié)果。對(duì)于147 bp處有明亮條帶者判定為MRCNS，陰性菌株重復(fù)試驗(yàn)1次。

1.2.4 MRCNS藥敏試驗(yàn) 采用標(biāo)準(zhǔn)瓊脂倍比稀釋法對(duì)MRCNS進(jìn)行MIC值的測(cè)定和結(jié)果判讀。以ATCC29213、ATCC25923為質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)株，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)各種抗菌藥物藥敏結(jié)果均在CLSI2013規(guī)定的范圍內(nèi)。

1.2.5 MRCNS的SCCmec基因分型 對(duì)明確為MRCNS的菌株進(jìn)行SCCmec基因分型，反應(yīng)體系及反應(yīng)條件同1.2.3，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)電泳后，凝膠成像分析系統(tǒng)攝像，分析并保存結(jié)果。對(duì)陰性菌株重復(fù)試驗(yàn)1次。

1.2.6 擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)序和分析 PCR產(chǎn)物委托上海生工生物工程技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序，所得測(cè)序結(jié)果在Pubmed中進(jìn)行BLAST基因序列比對(duì)。

2 結(jié)果

2.1 MRCNS種類分布及檢出率 186株MRCNS經(jīng)表型篩選及PCR檢測(cè)mecA均為陽(yáng)性，其中包括耐甲氧西林表皮葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcusepidermidis,MRSE)85株、耐甲氧西林溶血葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcushaemolyticus,MRSH)46株、耐甲氧西林人葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcushominis, MRSHo)35株、耐甲氧西林木糖葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcusxylosus, MRSX)6株、耐甲氧西林松鼠葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcussciuri, MRSSc)4株、耐甲氧西林模仿葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcussimulans, MRSSi)4株、耐甲氧西林華納葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcuswarneri, MRSW)3株、耐甲氧西林腐生葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcussaprophyticus, MRSSa)1株、耐甲氧西林耳葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcusauricularis, MRAS)1株、耐甲氧西林頭狀葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcuscapitis, MRSCa)1株，MRCNS分類構(gòu)成比見表2。

2.2 MRCNS耐藥性分析 MRCNS對(duì)16種常見抗菌藥物耐藥率見表3。1株攜帶mecA基因的萬(wàn)古霉素表型耐藥菌株，其對(duì)除利福平、左氧氟沙星的多種抗菌藥物耐藥。

2.3 MRCNS的SCCmec基因分型 186株MRCNS的mecA基因均為陽(yáng)性，共檢出Ⅰ～Ⅴ 5種型別，Ⅳ型檢出Ⅳa、Ⅳc、Ⅳd 3種亞型，電泳結(jié)果見圖1。不同類型的MRCNS所攜帶的SCCmec型別檢出結(jié)果見表4。

表2 MRCNS分類構(gòu)成比

圖1 mecA與SCCmec基因擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果

M：Marker；1：ATCC29213；2：ATCC43300；3～4：mecA；5～6：SCCmecⅠ；7～8：SCCmecⅡ；9～10：SCCmecⅢ；11～12：SCCmecⅣa；13～14：SCCmecⅣc；15～16：SCCmecⅣd；17～18：SCCmecV

2.4 MRCNS不同SCCmec型別的耐藥率 所有型別對(duì)青霉素、頭孢噻肟、頭孢哌酮、頭孢曲松、美羅培南、亞胺培南、阿奇霉素、紅霉素、克林霉素及環(huán)丙沙星的耐藥率均很高；除個(gè)別III型和混合型外，所有型別對(duì)替考拉寧和萬(wàn)古霉素敏感；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、混合型及未分型對(duì)利福平、左氧氟沙星、慶大霉素均有不同程度的耐藥，且耐藥率高于Ⅳ、Ⅴ型；Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ未發(fā)現(xiàn)氯霉素耐藥菌株，見表5。

表3 148株兒童MRCNS對(duì)16種抗生素的耐藥率[n(%)]

表4 SCCmec基因分布結(jié)果[n(%)]

表5 MRCNS不同SCCmec基因型的耐藥率[n(%)]

3 討論

近年來，我國(guó)兒童MRCNS的多數(shù)資料集中在75%左右[2，6]。兒童MRCNS的檢出率和多重耐藥性呈逐年增高趨勢(shì)，因其毒力低、侵襲力弱、患兒感染后癥狀不典型等特點(diǎn)，給臨床診斷和治療帶來一定困難。MRCNS不僅對(duì)于所有耐酶青霉素如甲氧西林、苯唑西林、氯唑西林耐藥，而且對(duì)包括各類廣譜青霉素和頭孢類(如頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢美唑、頭孢哌酮等)、氨基糖苷類(如鏈霉素、慶大霉素等)、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類、碳青霉烯類(如亞胺培南、美羅培南等)、利福平均具有不同程度的耐藥[7]。MRCNS的耐藥性來源，一方面是固有耐藥性，這是由染色體介導(dǎo)的；另一方面是獲得耐藥性，這與質(zhì)粒產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶有關(guān)，細(xì)菌之間傳遞耐藥基因，很多靠質(zhì)粒來完成，即在葡萄球菌菌屬之間通過質(zhì)粒傳遞耐藥基因，使耐藥基因擴(kuò)大而產(chǎn)生耐藥；此外，生物膜的形成和主動(dòng)外排系統(tǒng)與MRCNS的耐藥性有密切關(guān)系[8-9]。本研究分離的兒童MRCNS菌株同樣對(duì)多種抗菌藥物耐藥。如MRCNS對(duì)青霉素、頭孢噻肟、頭孢哌酮、頭孢曲松、阿奇霉素、紅霉素、克林霉素、美羅培南、亞胺培南的耐藥性均很高，達(dá)90%～100%，一定程度上反應(yīng)了β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物、三代頭孢類抗菌藥物、大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物、林可霉素類抗菌藥物及碳青霉烯類抗菌藥物在臨床的廣泛應(yīng)用；相對(duì)而言，對(duì)左氧氟沙星、慶大霉素、氯霉素及利福平的耐藥性較低，可能與其對(duì)兒童生長(zhǎng)發(fā)育有較多的不良反應(yīng)有關(guān)；例如，左氧氟沙星易引起鈣流失，長(zhǎng)期使用會(huì)導(dǎo)致兒童軟骨病發(fā)生；慶大霉素會(huì)影響兒童腦神經(jīng)發(fā)育，導(dǎo)致聽力下降；長(zhǎng)期大劑量地使用氯霉素會(huì)對(duì)兒童骨髓造血系統(tǒng)產(chǎn)生抑制；利福平對(duì)兒童的肝功能有嚴(yán)重?fù)p害。也可能與單獨(dú)使用這些抗菌藥物易產(chǎn)生耐藥等因素有關(guān)，所以這些藥較少應(yīng)用于兒科臨床治療。糖肽類抗菌藥物如替考拉寧、萬(wàn)古霉素作為MRCNS治療的最后防線，本研究顯示其表型耐藥菌株，考慮可能是因兒童特殊的生理特點(diǎn)及對(duì)多種抗菌藥物的不良反應(yīng)，限制很多藥物的使用，而萬(wàn)古霉素有效的臨床應(yīng)用先例，使其在兒科領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，給兒童MRCNS的治療帶來潛在的威脅。因此，為控制兒童MRCNS多重耐藥率升高，對(duì)考慮敗血癥的患兒，臨床醫(yī)師宜早期進(jìn)行血培養(yǎng)及加大抗菌藥物使用前微生物標(biāo)本的送檢率，并依據(jù)藥敏結(jié)果合理選用有效抗菌藥物，以減少耐藥菌株的產(chǎn)生和提高療效。

SCCmec是一種攜帶mecA基因的新型移動(dòng)基因元件。在不同的MRCNS菌株中，因外源性耐藥基因的轉(zhuǎn)移、嫁接，以及不同SCCmec之間耐藥基因的交換，造成SCCmec染色體基因序列突變、插入或缺失，使得mec基因簇、重組酶基因簇及可變區(qū)域出現(xiàn)結(jié)構(gòu)上的差異，這種結(jié)構(gòu)上差異性是SCCmec分型的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。目前國(guó)外采用分子生物學(xué)技術(shù)將SCCmec基因分成Ⅰ～Ⅷ 8種類型，每一型又包含不同亞型，如Ⅳ型包括Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc、Ⅳd 4個(gè)亞型[10-11]。SCCmec可自主從染色體上切除，以適當(dāng)方式重組于受體葡萄球菌染色體上，使其獲得耐藥性；SCCmec使耐藥基因在菌株間水平傳播，從而導(dǎo)致耐藥譜擴(kuò)大和新的SCCmec型別的產(chǎn)生。SCCmec的基因型與MRCNS流行背景有關(guān)，不同地區(qū)和遺傳背景的克隆株攜帶SCCmec可能不同[12-14]。本研究的186株MRCNS可擴(kuò)增Ⅰ～Ⅴ 5種SCCmec基因型，Ⅳ型可擴(kuò)增出Ⅳa、Ⅳc、Ⅳd。安徽地區(qū)兒童MRCNS的SCCmec基因分型以Ⅲ型為主要流行株，占50.5%(94/186)，同國(guó)內(nèi)其他地區(qū)報(bào)道[15-16]結(jié)果一致；其次為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ彼此之間或與其他各型混合，占19.4%(36/186)；剩余的Ⅰ、Ⅱ、Ⅳa、Ⅳc、Ⅳd及Ⅴ各型所占比例較少，分別為4.3%(8/186)、3.8%(7/186)、3.8%(7/186)、0.5%(1/186)、1.1%(2/186)及2.2%(4/186)。但有14.5%(27/186)未能分型，可能由于SCCmec移動(dòng)模塊的變異率非常高，自身不斷地發(fā)生突變、插入或缺失，造成了擴(kuò)增引物區(qū)序列的變化，從而PCR檢測(cè)的方法失?。灰部赡苡衅渌退帣C(jī)制或者新的耐藥基因的出現(xiàn)，尚不在本研究范圍。

SCCmec基因型與耐藥譜有著密切的關(guān)系，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型由于基因序列較長(zhǎng)，內(nèi)含耐藥基因的質(zhì)?；蜣D(zhuǎn)座子，呈多重耐藥性，常常表現(xiàn)對(duì)β-內(nèi)酰胺類、碳青霉烯類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類及氟喹諾酮類等抗菌藥物耐藥；而Ⅳ、Ⅴ型除含mecA基因外，很少含有其他的耐藥基因，對(duì)非β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥率大多低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型，這種耐藥程度上的差異可以為臨床治療MRCNS提供依據(jù)。

綜上所述，安徽地區(qū)近6年臨床分離的兒童MRCNS具有多重耐藥的特征，并存在萬(wàn)古霉素表型耐藥菌株，兒科醫(yī)師應(yīng)提高感染患兒抗菌藥物使用前微生物標(biāo)本的送檢率，盡可能根據(jù)藥敏結(jié)果，合理選用有效抗菌藥物。SCCmecⅢ型為主要流行株。因此，SCCmec基因型別的確定，對(duì)制定兒童MRCNS感染預(yù)防和控制措施有重要意義。

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Xiong Yuling, Xia Xiaorong, Zhu Yulin,et al

(DeptofPaediatrics,TheFirstAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei230022)

Objective To learn the drug resistance of methicillin resistant coagulase negativeStaphylococcus(MRCNS) and to investigate the distribution and antimicrobial resisitance of different MRCNSSCCmecgenotyping from children in Anhui. Methods Resistance phenotype screening and Polymerase Chain Reaction(PCR)mecAgene detection were conducted in clinical strains of coagulase negativeStaphylococcus, in order to collect MRCNS in recent six years from children in Anhui. Minimal inhibitory concentrations of 16 antibiotics were determined by agar dilution method, thenSCCmectypes were determined by PCR methods. Results A total of 186 MRCNS were detected by resistance phenotype screening and PCRmecAgene detection methods.There were 45.7%(85/186) methicillin resistantStaphylococcusepidermidis, 24.7%(46/186) methicillin resistantStaphylococcushaemolyticus, 18.8%(35/186) methicillin resistantStaphylococcushominis, 10.7%(20/186) other types of MRCNS. Drug resistance analysis showed the resisitance rates to penicillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, imipenem, and meropenem were 100%, to erythromycin and azithromycin were about 90%, to ciprofloxacin and clindamycin were about 80%, to gentamicin and levofloxacin were about 40%, to rifampincin was about 20%, to chloramphenicol, teicoplanin and vancomycin were 10%, 2.2% and 0.5%. Ⅰ to ⅤSCCmecgenotypes were detected in 186 MRCNS, the major type wasSCCmectype Ⅲ. Three subtypes of Ⅳ genotype were identified, including Ⅳa, Ⅳc and Ⅳd, the second type was hybrid type. Each genotype showed varying degrees of resistance to several antibiotics. Conclusion Clinical strains of children infected MRCNS isolated from Anhui have multiple resistances to commonly used antibiotics. It should be on alert that vancomycin phenotypic drug resistant strain appears. Different types of MRCNS carry different types ofSCCmec,SCCmecⅢ genotype is the major epidemic isolates.SCCmecgenotype and drug resistance spectrum have a close relationship.

children; methicillin resistant coagulase negativeStaphylococci; drug resistance; polymerase chain reaction;Staphylococcalcassette chromosomemec

時(shí)間：2016-8-10 11:04:48

http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160810.1104.008.html

2016-05-30接收

安徽省自然科學(xué)基金(編號(hào)：1408085QH157)

安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科，合肥 230022

熊玉玲，女，碩士研究生；

王亞亭，男，教授，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail:wangyating1348@126.com

R 446.5

A

1000-1492(2016)10-1430-06

10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.10.008