李再興，高 妍，鐘為章，李貴霞，劉 春，郭嘉運，王勇軍，楊永會

(1. 河北科技大學環(huán)境科學與工程學院，河北石家莊 050018；2. 河北省污染防治生物技術實驗室，河北石家莊 050018；3.河北衡水第一中學，河北衡水 053000；4.華北制藥集團有限責任公司環(huán)境保護研究所，河北石家莊 050015)

?

超聲/堿預處理對青霉素菌渣厭氧消化的影響研究

李再興1,2，高 妍1,2，鐘為章1，2，李貴霞1，2，劉 春1，2，郭嘉運3，王勇軍4，楊永會4

(1. 河北科技大學環(huán)境科學與工程學院，河北石家莊 050018；2. 河北省污染防治生物技術實驗室，河北石家莊 050018；3.河北衡水第一中學，河北衡水 053000；4.華北制藥集團有限責任公司環(huán)境保護研究所，河北石家莊 050015)

為了提高菌渣厭氧消化生產沼氣的效率，最終實現菌渣的資源化和減量化，采用超聲/堿預處理方法處理青霉素菌渣，考察了pH值、超聲聲能密度、含水率和反應時間對預處理效果的影響，并通過生化產甲烷潛力(BMP)試驗考察了菌渣的可生化性。正交試驗結果表明：超聲/堿預處理可強化菌渣破壁效果，促進胞內有機物溶出，其最佳預處理條件：pH值為10，聲能密度為2.0 W/mL，含水率為97%，反應時間為5 min，COD溶出率最高能達到84.69%，是單獨超聲預處理的2.08倍。BMP試驗表明，預處理各因素對菌渣沼氣產率的影響程度為含水率>聲能密度>反應時間>pH值。按照甲烷產率確定最佳預處理條件：pH值為9,聲能密度為0.5 W/mL,含水率為96%,反應時間為30 min，其甲烷產率最高可達335 mL/g，是未處理菌渣甲烷產率的2.2倍。

三廢處理與綜合利用；青霉素菌渣；超聲/堿預處理；厭氧消化；生化產甲烷潛力

抗生素菌渣作為一種特殊的危險廢物，其安全、合理、有效地處理處置已成為目前制藥行業(yè)亟待解決的難題[1-5]?？股鼐?干基)中有機質含量高達90%以上，可作為生物質能源被開發(fā)利用[6-10]，其中采用厭氧消化技術是實現菌渣減量化、資源化的有效途徑之一[11]。但是由于抗生素菌渣中的菌絲體具有剛性的細胞壁[12]，胞內有機質釋放困難，難以被快速降解。為此，需采取物理、化學等手段對菌渣中的菌絲體進行破壁預處理，以提高菌渣中有機質的利用率和沼氣產率[13]。研究表明采用超聲/堿預處理方法對污泥、秸稈等生物質進行預處理[14-17]，可增加胞內有機質的溶出率，有利于提高產氣量，進而提高厭氧消化效率。李再興等[13]采用堿熱聯(lián)合等工藝對鏈霉素菌渣進行預處理，結果表明菌渣中的溶解性化學需氧量(SCOD)提高了66.39%，甲烷產量提高了14.21%。鐘為章等[11]利用堿熱聯(lián)合法預處理鏈霉素菌渣，結果證明預處理能夠有效地提高沼氣產量，揮發(fā)性固體(VS)去除率達到64%左右?？股鼐c污泥構成類似，可參考相應的處理方法進行預處理。采用正交試驗對青霉素菌渣進行超聲/堿預處理試驗研究，考察不同預處理時間、pH值、聲能密度和菌渣含水率等條件下菌渣的破胞效果，并進行生物化學產甲烷潛能試驗(BMP)對不同處理條件下菌渣的可生化性進行評價，從而確定最佳的預處理工藝條件，為開展抗生素菌渣厭氧消化處理提供技術參考。

1 材料與方法

1.1 試驗裝置

圖1 BMP試驗裝置示意圖Fig.1 Schematic diagram of device of BMP test

1)超聲波破碎裝置

超聲波破碎裝置采用寧波新芝生物科技股份有限公司生產的超聲波細胞粉碎機，型號為JY98-ⅢN，最大功率為1 200 W，工作頻率的范圍為20～25 kHz。

2)BMP試驗裝置

BMP試驗裝置如圖1所示。厭氧消化瓶采用150 mL錐形瓶，接種70 mL厭氧污泥，加入一定量的菌渣后，將其置于35 ℃恒溫水浴箱中，產生的沼氣通過導氣管進入排水集氣系統(tǒng)計量。

1.2 試驗菌渣和接種污泥

1)試驗菌渣

試驗用青霉素菌渣取自華北制藥集團青霉素生產車間，其主要理化性質見表1。

2)接種污泥

接種污泥取自某淀粉廠廢水處理站的厭氧顆粒污泥，顆粒較大成灰黑色或灰褐色，具有良好的沉降性能，污泥的最大比產甲烷速率為240 mL/(g·d)。

1.3 試驗方法

1)單獨超聲預處理

取一定量的菌渣，加水調配至不同的含水率，進行超聲預處理試驗，反應一定時間后取樣分析。

2)超聲/堿預處理

本試驗擬采用正交試驗法，開展超聲/堿預處理試驗研究。正交試驗因素、水平見表2，試驗條件見表3。取一定量的菌渣，加水調配至不同的含水率，再用5 mol/L NaOH溶液調節(jié)其pH值，然后進行超聲處理，反應一定時間后取樣分析。

表1 青霉素菌渣主要理化性質

注：TS菌渣為菌渣的總固體；VS菌渣為菌渣的揮發(fā)性固體；SS菌渣為菌渣的懸浮固體；VSS菌渣為菌渣的揮發(fā)性懸浮固體；SCOD菌渣為菌渣的溶解性化學需氧量；TCOD菌渣為菌渣的總化學需氧量。

表2 正交試驗的因素和水平

表3 正交試驗表

3)BMP試驗

將一定量預處理后的菌渣與70 mL的接種污泥充分混合，然后置于150 mL的錐形瓶中，定容到100 mL，并以0.5 L/min的流速通入N2以排除空氣中的氧氣，最后用橡膠塞密封并置于35 ℃的恒溫水浴中振蕩發(fā)酵20天，另取70 mL接種污泥(作為空白)和未處理的菌渣(作為對照)分別單獨進行厭氧消化。

1.4 分析方法

pH值采用酸度計法測定，TS，VS，SS，VSS和含水率采用稱重法測定，COD采用重鉻酸鉀法測定，其中溶解性化學需氧量(SCOD)的測定方法：先通過轉速為10 000 r/min的離心機離心10 min，再用0.45 μm的濾紙過濾，然后取污泥上清液，用重鉻酸鉀法測定樣品。上述指標均按照《水和廢水分析檢測方法》(第4版)[18]進行測定。沼氣產量由排水集氣系統(tǒng)計量；沼氣成分采用GC7900型氣相色譜儀測定。

2 結果與討論

2.1 單獨超聲預處理試驗

超聲預處理產生的強大的空化作用，以及大量微氣泡的瞬間爆破力，能夠破壞胞外聚合酶和細胞壁結構，使青霉素菌渣固相COD向液相中轉化，通過液相中COD的變化衡量超聲預處理效果，本研究旨在重點考察超聲預處理對菌渣COD溶出率的影響。COD溶出率表示預處理時青霉素菌渣中有機物從固相向液相的轉化程度，COD溶出率=(SCOD后-SCOD前)/TCOD×100%[19-20]。不同聲能密度下的超聲預處理對青霉素菌渣(含水率96%)預處理過程中COD溶出率的影響如圖2所示。

由圖2可知，在不同聲能密度下，COD溶出率均隨時間增加不斷升高，當超聲時間超過30 min時，COD溶出率升高緩慢。在相同處理時間下，聲能密度在0.5～2.0 W/mL范圍內，隨聲能密度的增加COD溶出率升高，最高可達40.69%；當聲能密度達到2.5 W/mL時，COD溶出率下降到34.44%?？赡苁且驗樵谝欢暷苊芏确秶鷥?，聲能密度增加，超聲預處理產生的機械剪切力越強，對菌渣細胞壁的破壞作用越明顯，有利于COD向液相溶出。綜合考慮，確定菌渣含水率為96%時，最優(yōu)聲能密度為2.0 W/mL，超聲時間為30 min，該條件下COD溶出率為40.69%。

2.2 菌渣超聲/堿預處理試驗

青霉素菌渣超聲/堿預處理試驗結果見圖3。

由圖3可知，1#對照組(原樣pH值、未超聲處理、含水率為96%、反應時間為5 min)的COD溶出率最低，為24.78%；12#試驗組(pH值為10，聲能密度為2.0 W/mL，含水率為97%，反應時間為5 min)的COD溶出率最高，能達到84.69%，是單獨超聲預處理(菌渣含水率為96%，聲能密度為2.0 W/mL，反應時間為30 min)的COD溶出率40.69%的2.08倍。其主要原因是通過超聲與堿的協(xié)同作用，強化了菌渣中菌絲體的破壁效果，使胞內有機物能快速釋放到液相中，使菌渣COD溶出率提高，為提高菌渣厭氧處理效率奠定了基礎。

圖2 不同聲能密度下COD溶出率隨時間的變化Fig.2 Variation of the COD dissolution rate at different ultrasonic pretreatment time and sound energy density

圖3 菌渣超聲/堿預處理后COD溶出率Fig.3 COD dissolution rate under different ultrasonic/alkaline pretreatment conditions

2.3 超聲/堿預處理后菌渣BMP試驗

取超聲/堿預處理后的菌渣開展BMP試驗研究，考察不同超聲/堿預處理條件下的青霉素菌渣厭氧消化沼氣產率，見圖4。

圖4 超聲/堿預處理后菌渣沼氣產率Fig.4 Biogas yield under different ultrasonic/alkali pretreatment conditions

由圖4可知，經過超聲/堿預處理的累計產氣量明顯高于未處理對照組的產氣量，且產氣速率較快。其中6#試驗組(pH值為9，聲能密度為0.5 W/mL，含水率為96%，反應時間為30 min)的沼氣產率高達481.2 mL/g，相較于1#對照組，沼氣產率提高了68.18%。CLARK等[21]研究表明污泥超聲預處理后厭氧消化沼氣產量可以提高61%，ONYECHE等[22]將經超聲預處理后的污泥進行厭氧消化可使產氣量提高23%；同時本試驗采用超聲/堿預處理后菌渣沼氣產率高于董永博[23]對未預處理青霉素菌渣厭氧消化的沼氣產率337.33 mL/g。這說明超聲預處理對于污泥和抗生素菌渣具有較好的破胞效果，可以加速胞內有機物釋放，有利于提高厭氧消化產氣率。

由于沼氣中有效成分為甲烷，本試驗以甲烷產率為指標對超聲/堿預處理正交試驗結果進行統(tǒng)計分析，結果見表4。

表4 正交試驗結果

由表4可知，超聲/堿預處理對青霉素菌渣厭氧消化甲烷產率的影響程度差異不大，其影響因素依次為含水率>聲能密度>反應時間>pH值。由于超聲波作用需要較高的含水率(一般含水率在95%以上)，才能夠在液體表面產生大量的空化氣泡和較大的剪切力，進而破壞細胞壁，使內含物溶出，因此含水率的影響程度較其他因素大。依據甲烷產率確定本試驗的最佳條件：pH值為9，聲能密度為0.5 W/mL，含水率為96%，反應時間為30 min，其甲烷產率最高可達335 mL/g，是未處理菌渣甲烷產率152 mL/g的2.2倍。

3 結 論

1)青霉素菌渣超聲/堿聯(lián)合預處理試驗表明，最佳預處理條件：pH值為10，聲能密度為2.0 W/mL，含水率為97%，反應時間為5 min，COD溶出率最高可達84.69%，是單獨超聲預處理(菌渣含水率為96%，聲能密度為2.0 W/mL，反應時間為30 min)COD溶出率40.69%的2.08倍。

2)經過超聲/堿聯(lián)合預處理后的菌渣的BMP試驗表明，預處理中各因素對甲烷產率的影響程度大小為含水率>聲能密度>反應時間>pH值，按照甲烷產率確定最佳預處理條件：pH值為9、聲能密度為0.5 W/mL、含水率為96%、反應時間為30 min，其甲烷產率最高可達335 mL/g，是未處理菌渣甲烷產率152 mL/g的2.2倍。

[1] 工業(yè)和信息化部．中國醫(yī)藥統(tǒng)計年報(2013年)：綜合冊[M]．北京：中國醫(yī)藥出版社，2014．

[2] 周檥．國家危險固體廢物名錄[M]．北京：中國環(huán)境科學出版社，2008．

[3] WHITE J E, CATALLO W J, LEGENDRE B L. Biomass pyrolysis kinetics: A comparative critical review with relevant agricultural residue case studies[J]. Journal of Analytical and Applied Pyrolysis, 2011, 91(4): 1-31.

[4] 周保華，高勤，王洪華，等．青霉素、土霉素菌渣研究利用現狀及特性分析[J]．河北工業(yè)科技，2011，28(5)：291-294．

ZHOU Baohua, GAO Qin, WANG Honghua, et al. Research and utilization of penicillin bacterial residue and oxytetracycline bacterial residue and analysis of the characteristics[J]. Hebei Journal of Industrial Science and Technology, 2011, 28(5): 291-294.

[5] 趙衛(wèi)鳳，鮑曉磊，張媛，等．河北省發(fā)酵類抗生素菌渣處置現狀及存在的問題[J]．安徽農業(yè)科學，2013，41(31)：12417-12421．

ZHAO Weifeng, BAO Xiaolei, ZHANG Yuan, et al. Investigation on status of antibiotics fermentation residues and existing problems in Hebei[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2013, 41(31): 12417-12421.

[6] 李再興，田寶闊，左劍惡，等．抗生素菌渣處理處置技術進展[J]．環(huán)境工程，2012，30(2)：72-75．

LI Zaixing，TIAN Baokuo，ZUO Jian’e，et al．Progress in treatment and disposal technology of antibiotic bacterial residues[J]. Environmental Engineering, 2012, 30(2): 72-75.

[7] 貢麗鵬，郭斌，任愛玲，等．抗生素菌渣理化特性[J]．河北科技大學學報，2012，33(2)：190-196．

GONG Lipeng, GUO Bin, REN Ailing, et al. Physical and chemical properties of antibiotics bacterial residue[J]. Journal of Hebei University of Science and Technology, 2012, 33(2): 190-196.

[8] 任曉瓊，趙風清，胡倩倩，等．利用青霉素廢菌絲體制備脫硫石膏緩凝劑的研究[J]．環(huán)境科學與技術，2014，37(2)：134-137．

REN Xiaoqiong, ZHAO Fengqing, HU Qianqian, et al. Preparation of gypsum retarder from waste penicillin mycelium[J]. Environmental Science & Technology, 2014, 37(2): 134-137.

[9] 陳昆，郭斌，貢麗鵬，等．土霉素菌渣熱解液的理化特性及成分分析[J]．河北科技大學學報，2013，34(6)：565-571．

CHEN Kun, GUO Bin, GONG Lipeng, et al. Analysis on physicochemical properties and composition of terramycin mushroom residue pyrolysis liquid[J]. Journal of Hebei University of Science and Technology, 2013, 34(6): 565-571.

[11]ZHONG Weizhang, LI Zaixing, YANG Jingliang, et al. Effect of thermal-alkaline pretreatment on the anaerobic digestion of streptomycin bacterial residues for methane production[J]. Bioresoure Technology, 2013, 151: 436-440.

[12]韓慶，蘇海佳．廢菌渣高值化研究中細胞破壁工藝的比較[J]．環(huán)境科學與技術，2011，34(5)：144-147．

HAN Qing, SU Haijia. Comparison of cell wall broken in the research of high value utilization of mycelium residue[J].Environmental Science & Technology, 2011, 34(5): 144-147.

[13]LI Zaixing, ZUO Jian’e, TIAN Baokuo, et al. Thermal-alkaline pretreatment on the decomposition of the streptomycin bacterial residue[J]. Biotechnology & Biotechnological Equipment, 2012, 26(3): 2971-2975.

[14]LEE K, CHANTRASAKDAKUL P, KIM D, et al. Ultrasound pretreatment of filamentous algal biomass for enhanced biogas production[J]. Waste Management, 2013, 34(6): 1035-1040.

[15]薛向東，金奇庭，朱文芳，等．污泥超聲破解效應及厭氧消化性能研究[J]．生態(tài)環(huán)境，2006，15(1)：50-53．

XUE Xiangdong, JIN Qiting, ZHU Wenfang, et al. The effect of ultrasound and anaerobic digestion performance on sludge[J]. Ecology and Environment, 2006, 15(1): 50-53.

[16]趙慶良，苗禮娟，胡凱，等．超聲堿預處理剩余污泥的中溫厭氧消化效果[J]．中國給水排水，2009，25(15)：25-27．

ZHAO Qingliang, MIAO Lijuan, HU Kai. Mesophilic anaerobic digestion of excess sludge after ultrasonic and alkaline pretreatment[J]. China Water & Wastewater, 2009, 25(15): 25-27.

[17]張婷．超聲波與稀堿法聯(lián)合預處理對秸稈厭氧發(fā)酵產沼氣的影響[D]．武漢：湖北工業(yè)大學，2009．

ZHANG Ting. Effect of Ultrasound and Alkali Co-pretreatment on Biogas Production in Stalk Anaerobic Fermentation[D]. Wuhan：Hubei University of Technology, 2009.

[18]國家環(huán)境保護總局．水和廢水檢測分析方法 [M].4版.北京：中國環(huán)境科學出版社，2002．

[19]尹軍，臧立新，于海俠，等．超聲與堿預處理低有機質剩余污泥特性分析[J]．環(huán)境工程學報，2009，3(1)：179-182．

YIN Jun, ZANG Lixin, YU Haixia, et al. Characteristics of waste activated sludge with low VSS content by ultrasonic and alkaline pretreatment[J]. Chinese Journal of Environmental Engineering, 2009, 3(1): 179-182.

[20]由美雁，謝里陽，朱彤，等．超聲波破解剩余污泥的試驗研究[J]．化學工程，2013，41(4)：6-10．

YOU Meiyan, XIE Liyang, ZHU Tong, et al. Experimental study on excess sludge disintegration by ultrasonic treatment[J]. Chemical Engineering, 2013,41(4):6-10.

[21]CLARK P, NUJJOO I. Ultrasonic sludge pretreatment for enhanced sludge digestion[J]. Water and Environment Journal, 2000, 14(1): 66-71.

[23]董永博．青霉素菌渣厭氧發(fā)酵制取沼氣工藝研究[D]．哈爾濱：哈爾濱工業(yè)大學，2014．

DONG Yongbo. Process Study for Anaerobic Digestion of Penicillin Bacterial Residue for Biogas Production[J].Harbin：Harbin Institute of Technology, 2014.

Effect study of ultrasonic/alkaline pretreatment on anaerobic digestion of penicillin bacterial residue

LI Zaixing1,2, GAO Yan1,2, ZHONG Weizhang1,2, LI Guixia1,2, LIU Chun1,2,GUO Jiayun3, WANG Yongjun4, YANG Yonghui4

(1.School of Environmental Science and Engineering, Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang, Hebei 050018, China; 2.Pollution Prevention Biotechnology Laboratory of Hebei Province, Shijiazhuang, Hebei 050018, China; 3. Hengshui No.1 High School, Hengshui, Hebei 053000, China; 4. Environmental Protection Institute, NCPC, Shijiazhuang, Hebei 050015, China)

In order to improve the efficiency of anaerobic digestion for biogas production and achieve the resource recovery and decrement of antibiotic bacterial residue, ultrasonic/alkaline pretreatment is used to treat penicillin bacterial residues (PBR), the influence of pH value, ultrasonic sound energy density, moisture content and reaction time on pretreatment effect are investigated, and the biodegradability of PBR is evaluated by biochemical methane potential (BMP) test. The orthogonal experiment result shows that ultrasonic/alkaline pretreatment can enhance the residue cell wall broken effect, and promote intracellular organic matter dissolution. The optimum pretreatment conditions are pH of 10, ultrasonic sound energy density of 2.0 W/mL, moisture content of 97%, and pretreatment time of 5 min. In this case, the highest COD dissolution rate can reach 84.69%, which is 2.08 times higher than that by the ultrasonic pretreatment only. The BMP test results show that the impact of the pretreatment factors is as follows: moisture content > ultrasonic sound energy density > reaction time > pH value. The optimum pretreatment conditions according to methane productivity are pH of 9, ultrasonic sound energy density of 0.5 W/mL, moisture content of 96%, and reaction time of 30 min. In this case, the methane yield rate can reached 335 mL/g, which is 2.2 times higher than that from the untreated bacteria residue.

wastes disposal and comprehensive utilization; penicillin bacterial residue; ultrasonic/alkaline pretreatment; anaerobic digestion; biochemical methane potential

1008-1542(2016)03-0302-07

10.7535/hbkd.2016yx03014

2015-03-08；

2015-05-11；責任編輯：王海云

國家自然科學基金(51478160)；河北省重大技術創(chuàng)新項目(12276703Z)

李再興(1973—)，男，四川安岳人，教授，博士，主要從事水污染防治及污水資源化技術方面的研究。

E-mail:li_zaixing@163.com

X703

A

李再興，高 妍，鐘為章，等.超聲/堿預處理對青霉素菌渣厭氧消化的影響研究[J].河北科技大學學報,2016,37(3):302-308.

LI Zaixing, GAO Yan, ZHONG Weizhang, et al.Effect study of ultrasonic/alkaline pretreatment on anaerobic digestion of penicillin bacterial residue[J].Journal of Hebei University of Science and Technology,2016,37(3):302-308.