黨連生 陳 寧 徐 燕

(包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 包頭 014010)

?

T淋巴細(xì)胞檢測(cè)在老年肺炎患者中的臨床意義

黨連生 陳 寧 徐 燕

(包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 包頭 014010)

目的 探討T淋巴細(xì)胞亞群在老年性肺炎中的臨床意義。方法 選取老年肺炎患者50例、青年肺炎患者28例和健康體檢老年人54例、健康青年人35例為研究對(duì)象，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組研究對(duì)象體內(nèi)T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量。結(jié)果 老年肺炎組患者與老年對(duì)照組比較及青年肺炎組患者與青年對(duì)照組比較，CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞及CD4+/CD8+比值均有顯著差異(P<0.05)；其中青年肺炎組與老年對(duì)照組CD3+T淋巴細(xì)胞比較差異顯著(P<0.05)；但CD8+T淋巴細(xì)胞在老年組與青年組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；CD4+/CD8+比值在老年肺炎組和老年對(duì)照組中均表現(xiàn)為隨年齡增加而下降趨勢(shì)。結(jié)論 老年人患肺炎可能與免疫功能下降有關(guān)。

T淋巴細(xì)胞亞群;肺炎

免疫功能的衰老受遺傳及環(huán)境等多重因素的影響，從胸腺至淋巴細(xì)胞的遷移、成熟與免疫老化的特征性改變是T淋巴細(xì)胞亞群組成的變化，是老年人群免疫應(yīng)答功能減弱的重要原因。隨著年齡的增加，肺內(nèi)感染引起的發(fā)病率和死亡率上升，已成為危害老年人健康的主要原因〔1〕。老年肺炎的臨床表現(xiàn)不典型，并發(fā)癥多，預(yù)后差，因此熟悉掌握其臨床特點(diǎn)，早期發(fā)現(xiàn)、及時(shí)治療，對(duì)于積極防治肺炎保護(hù)老年人健康有著重要的意義。究其原因可能與隨年齡增長(zhǎng)免疫系統(tǒng)保護(hù)能力下降有關(guān)〔2〕。本文探討免疫功能在老年肺炎發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年2～12月來我院住院的肺炎患者78例為研究組，選擇89例來本院門診健康體檢者作為對(duì)照組。診斷依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)所制定的標(biāo)準(zhǔn)。老年肺炎組50例，老年對(duì)照組54例，青年肺炎組28例，青年對(duì)照組35例。均需排除應(yīng)用免疫抑制劑、腫瘤、意識(shí)障礙、嚴(yán)重肝腎功能不全、慢性阻塞性肺病(COPD)患者。研究方案通過本院臨床倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有入選的患者均知情同意。

1.2 標(biāo)本采集 所有病例均空腹，真空靜脈采血(由 BD 公司提供)，抽取靜脈血2 ml，3.8% 乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝，標(biāo)本必須在 4 h內(nèi)檢查完畢。

1.3 檢測(cè)儀器及試劑 儀器:美國(guó) Beckman Coulter XL4-MCL 型流式細(xì)胞儀。試劑:均由 Beckman Coulter 公司提供。

1.4 檢測(cè)方法 采用三色流式細(xì)胞術(shù)、SSC/FSC 淋巴細(xì)胞分析總 T 細(xì)胞(CD3+)、T4細(xì)胞(CD3+CD4+)、T8 細(xì)胞(CD3+CD8+)及CD4+/CD8+比值，具體操作方法參見文獻(xiàn)〔3〕。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件行t檢驗(yàn)及相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 各組T細(xì)胞亞群比較 老年肺炎組患者CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞及CD4+/CD8+比值與老年對(duì)照組差異顯著(P<0.05)；青年肺炎組與青年對(duì)照組比較CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞也明顯下降(P<0.05)；其中青年肺炎組與老年對(duì)照組CD3+T淋巴細(xì)胞比較差異顯著(P<0.05)；但CD8+T淋巴細(xì)胞在老年組與青年組組間比較無明顯差異(P>0.05)。見表1。

2.2 年齡與 CD4+/CD8+比值的相關(guān)性 老年肺炎組和老年對(duì)照組年齡與 CD4+/CD8+比值呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.437、r=-0.287，P<0.05)。

表1 各組T細(xì)胞亞群比較

與青年對(duì)照組比較:1)P<0.05；與老年對(duì)照組比較:2)P<0.05 ；與青年肺炎組比較:3)P<0.05

3 討 論

T淋巴細(xì)胞是體內(nèi)重要的免疫細(xì)胞,在胸腺中發(fā)育成熟后進(jìn)入外周血，其介導(dǎo)的細(xì)胞免疫在機(jī)體免疫方面起著核心作用。T淋巴細(xì)胞亞群中CD3+是所有T細(xì)胞的表面標(biāo)志,是機(jī)體細(xì)胞免疫的基礎(chǔ)；CD4+是輔助T細(xì)胞(Th)和效應(yīng)T細(xì)胞的表面標(biāo)志。Th細(xì)胞根據(jù)產(chǎn)生的細(xì)胞因子和生物學(xué)功能不同,將其分為 Th1和Th2細(xì)胞。激活后的 Th1細(xì)胞分泌 γ干擾素(IFN)-γ、白細(xì)胞介素2(IL)-2、腫瘤壞死因子-α等細(xì)胞因子,介導(dǎo)強(qiáng)烈的細(xì)胞免疫應(yīng)答、遲發(fā)性超敏反應(yīng)和器官特異性自身免疫性疾病,在宿主抗胞內(nèi)病毒感染中起重要作用。激活后的Th2細(xì)胞還可分泌許多白介素因子，這些因子均可介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答、參與抗感染免疫、抗自身免疫性疾病、抗腫瘤等多種疾病的病理過程〔4〕。CD8+抗原是細(xì)胞毒T細(xì)胞(Tc)和抑制T細(xì)胞 (Ts)的表面標(biāo)志 ；CD8+T 淋巴細(xì)胞中的 Ts 細(xì)胞的主要功能是通過分泌抑制因子來抑制免疫應(yīng)答的活化階段，其靶細(xì)胞是 B 細(xì)胞和抗原特異性 Th 細(xì)胞；Tc細(xì)胞的主要功能是參與抗腫瘤免疫、抗病毒免疫、移植排斥反應(yīng)有關(guān)。

機(jī)體中各個(gè)T 細(xì)胞亞群網(wǎng)的相互作用維持著機(jī)體正常的免疫功能，當(dāng)不同淋巴細(xì)胞亞群網(wǎng)的數(shù)量和功能發(fā)生異常時(shí)，就可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂〔5〕。CD4+/CD8+反映宿主T淋巴細(xì)胞亞群的紊亂狀態(tài),且在一定程度上可間接了解機(jī)體細(xì)胞免疫功能情況〔5〕。老年人免疫功能減退主要是細(xì)胞免疫功能減退，外周血 T 淋巴細(xì)胞數(shù)量減少，其增殖能力減低，表型及亞群的比例改變，CD4+/CD8+比值下降，單個(gè)細(xì)胞上 CD4+或 CD8+密度減少，T 細(xì)胞接受抗原刺激時(shí)免疫應(yīng)答能力減弱，產(chǎn)生IL-2 及表達(dá)膜 IL-2 受體的能力、產(chǎn)生其他細(xì)胞因子及發(fā)揮免疫效應(yīng)的能力都明顯降低〔6〕。本研究發(fā)現(xiàn)老年肺炎組與老年對(duì)照組及青年肺炎組與青年對(duì)照組結(jié)果比較表現(xiàn)，T 淋巴細(xì)胞和CD4+T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的均明顯降低、CD4+/CD8+比值明顯下降，說明患病組人群存在明顯的細(xì)胞免疫功能紊亂，CD4+T細(xì)胞下降明顯，可能因?yàn)?CD4+T細(xì)胞不僅參與細(xì)胞免疫，還參與體液免疫的介導(dǎo)，因消耗量大而下降明顯。CD8+T細(xì)胞計(jì)數(shù)在青年與老年組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與CD8+T細(xì)胞有免疫記憶功能及其具有較強(qiáng)的增殖能力有關(guān)〔7,8〕,并且已有研究結(jié)果表明CD4+T細(xì)胞在感染過程中對(duì)記憶CD8+T細(xì)胞的分化和形成起著十分關(guān)鍵的輔助作用〔9〕。在青年肺炎組與老年對(duì)照組組間T淋巴細(xì)胞總數(shù)比較發(fā)現(xiàn)，即使青年人患病其淋巴細(xì)胞數(shù)也較健康老年人高，可能與隨著增齡細(xì)胞老化而凋亡有關(guān)，同時(shí)也說明了老年人免疫功能衰退，產(chǎn)生免疫應(yīng)答能力的下降。老年肺炎組與老年對(duì)照組及青年對(duì)照組比較發(fā)現(xiàn)，CD4+/CD8+比值明顯偏離正常值，其下降幅度可反映老年人免疫功能失調(diào)的程度〔10,11〕。本研究觀察到無論肺炎組和對(duì)照組均有隨著年齡增長(zhǎng)而出現(xiàn)CD4+/CD8+比值下降的趨勢(shì)。但肺炎組與對(duì)照組相比 CD4+/CD8+比值下降更加明顯。

目前分析老年人之所以易患肺炎,可能原因還有以下幾種〔12〕：隨年齡的增長(zhǎng)呼吸系統(tǒng)趨于老化，支氣管壁上皮萎縮、杯狀細(xì)胞增生、纖毛運(yùn)動(dòng)減弱，咳嗽反射差，肺組織彈性減退等導(dǎo)致呼吸道清除功能降低，易于引起呼吸道感染，加之口腔衛(wèi)生不良或原有咽喉、口腔內(nèi)的慢性病灶，病原體易在上呼吸道定植，并且繁殖，發(fā)生支氣管-肺部吸入性感染。老年人胸腺退化，由于T淋巴細(xì)胞減少，表現(xiàn)為細(xì)胞免疫功能下降，以及抗體產(chǎn)生能力下降，B細(xì)胞功能亦呈減少傾向，若用激素、抗癌藥物等免疫抑制劑，則更易使寄生于上呼吸道或外來之細(xì)菌繁殖，老年人IgA減少，又是易致呼吸道病毒感染的因素；老年人?；悸院粑兰膊』蛉砺约膊?如糖尿病、腦血管病、慢性腎臟病、貧血、營(yíng)養(yǎng)不良、長(zhǎng)期臥床或腫瘤等)，易于并發(fā)肺炎； 喉、咽腔黏膜萎縮，感覺減退所引起的吞咽障礙，使食物容易嗆入下呼吸道，引起細(xì)菌感染。最新實(shí)驗(yàn)研究表明〔13〕，對(duì)大鼠體內(nèi)細(xì)胞因子和肺組織病理切片的分析后發(fā)現(xiàn)年老的大鼠易患肺部炎癥。免疫印跡的表明，老年人類和老年大鼠在他們的肺部與青年對(duì)照組比較增加了抑癌基因P16蛋白 和Rb蛋白這些衰老標(biāo)志物的水平。細(xì)菌黏附宿主蛋白角蛋白10(K10),層黏連蛋白受體(LR)和血小板活化因子受體(PAFR)也在衰老細(xì)胞中相應(yīng)增加。這些結(jié)果均表明，細(xì)胞衰老有利于細(xì)菌黏附到肺部細(xì)胞，并提供額外的分子機(jī)制，為老年人患肺炎的發(fā)生率增加了機(jī)會(huì)。

綜上所述，T 淋巴細(xì)胞亞群參與了老年肺炎的病理過程，在其發(fā)生、發(fā)展中起著十分重要的作用。因此，監(jiān)測(cè)肺炎患者外周血 T 淋巴細(xì)胞亞群，可對(duì)其療效做出評(píng)估并為增強(qiáng)免疫力提供理論依據(jù)，設(shè)法提高老年人的免疫功能，對(duì)提高老年人的抗感染能力將會(huì)起一定的作用。

1 Laut K,Benfield T.Lung infections are frequent in elderly persons〔J〕.Ugeskr Laeger，2013;175(47):2864-7.

2 Dorrington MG,Bowdish DM.Immunosenescence and vaccinations in the elderly〔J〕.Front Immunol，2013；28(4):171.

3 吳麗娟.臨床流式細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)〔M〕.北京:人民軍醫(yī)出版社，2010:1，78-88，119-22，124-7.

4 Korn T,Bettelli E,Oukka M,etal.IL-17 and Th17 cells 〔J〕 Ann Rev Immunol,2009;27(4):485-517.

5 Kim JE,Bauer S,La KS,etal.CD4+/CD8+T lymphocytes imbalance in children with severe 2009 pandemic influenza〔J〕.A Korean J Pediatr，2011;54(5):207-11.

6 Pawdec G，Barnett Y，F(xiàn)orsey R，etal.T cells and aging〔J〕.J Front Bio-sci，2002;7(5):1056-83.

7 Church SE,Jensen SM,Antony PA,etal.Tumor-specific CD4+T cells maintain effector and memory tumor-specific CD8+T cells〔J〕.Eur J Immunol，2014;44(1):69-79.

8 Sun J,Braciale TJ.Role of T cell immunity in recovery from influenza virus infection〔J〕.J Curr Opin Virol，2013;3(4):425-9.

9 Sun JC,Bevan MJ.Defective CD8 T cell memory following acute infection without CD4 T cell help〔J〕.Science,2003;300(5617):339-42.

10 Kim JE,Bauer S,La KS,etal.CD4+/CD8+T lymphocytes imbalance in children with severe 2009 pandemic influenza A (H1N1) pneumonia〔J〕.Korean J Pediatr，2011;54(5):207-11.

11 Read AJ,Erickson S,Harmsen AG,etal.Role of CD4+and CD8+T cells in clearance of primary pulmonary infection with Coxiella burnetii〔J〕.Infect Immun，2010;78(7):3019-26.

12 董碧蓉.老年肺炎現(xiàn)代診治與預(yù)防策略〔J〕.中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志，2011;31(1)：22-4.

13 Shivshankar P,Boyd AR,Le Saux CJ,etal.Cellular senescence increases expression of bacterial ligands in the lungs and is positively correlated with increased susceptibility to pneumococcal pneumonia 〔J〕 Aging Cell,2011;10(5):798-806.

〔2015-02-05修回〕

(編輯 苑云杰)

黨連生(1965-)，男，主任醫(yī)師，教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事老年病診治研究。

R592

A

1005-9202(2016)19-4822-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.068