劉麗　楊書豪　王玉金

[摘 要] 沙丁胺醇藥物是一種人工合成的β腎上腺素能受體激動(dòng)劑（又稱β受體興奮劑）。因其具有營養(yǎng)再分配作用，在食品安全、體育運(yùn)動(dòng)等方面存在藥物濫用問題，從而引起藥物殘留，進(jìn)而對人體健康造成嚴(yán)重危害?；趯ι扯“反妓幬餁埩魴z測的需要，其檢測方法就顯得至關(guān)重要。本文回顧了近三十多年沙丁胺醇藥物殘留檢測方法的研究使用情況，并根據(jù)不同檢測方法分為光譜法、色譜法、質(zhì)譜法、色-質(zhì)聯(lián)用法、免疫分析法、生物傳感器及其他分析法共七種類型進(jìn)行敘述說明，以期對研究沙丁胺醇及新型或其他β興奮劑的相關(guān)部門及研究人員有所借鑒。

[關(guān)鍵詞] 沙丁胺醇； 藥物殘留；檢測

中圖分類號(hào)：R965.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-5200（2016）05-001-04

DOI：10.11876/mimt201605001

沙丁胺醇（salbutamol， Sal）是一種β腎上腺素能受體激動(dòng)劑（也稱β興奮劑），因其具有營養(yǎng)再分配作用，可以提高肉類動(dòng)物瘦肉產(chǎn)率（俗稱 “瘦肉精”），且能提高動(dòng)物生長速度、減少飼料使用；運(yùn)動(dòng)員使用能夠增強(qiáng)肌肉，提高運(yùn)動(dòng)成績；可作為一種類雌激素，被用于水生動(dòng)物飼養(yǎng)中。食品中此類藥物的不合理使用和濫用，可能危害環(huán)境及人類健康[1]。長期或過量食用沙丁胺醇藥物會(huì)引起心腦血管等嚴(yán)重不良反應(yīng)，甚至致死。雖然世界各國采取措施控制濫用，但實(shí)際情況仍不容樂觀。因此，沙丁胺醇藥物殘留的檢測具有重要意義。

沙丁胺醇藥物殘留檢測方法的研究也受到研究人員關(guān)注。本文對國內(nèi)外沙丁胺醇藥殘檢測方法研究工作做了回顧歸納整理，資料來源從20世紀(jì)80年代至2010年，將檢測方法分為七種類型：包括光譜法、色譜法、質(zhì)譜法、色-質(zhì)聯(lián)用法、免疫分析法、生物傳感器和其他分析法。

1 光譜法

利用光譜學(xué)的原理和實(shí)驗(yàn)方法以確定物質(zhì)結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分的分析方法稱為光譜法。

Zhou等[2]用攜帶三聚氰胺的金納米粒子比色法檢測豬飼料中沙丁胺醇等β興奮劑，金納米顆粒通過氫鍵作用聚合，通過紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行判讀。Izquierdo等[3]采用表面增強(qiáng)拉曼光譜法對金屬表面痕量濃度沙丁胺醇等進(jìn)行分析，并用等離子共振光譜對藥物對金屬納米粒子吸附情況進(jìn)行研究。Yang等[4]用高分辨率太赫茲光譜對沙丁胺醇等藥殘進(jìn)行鑒別。

2 色譜法

色譜法是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配，以流動(dòng)相對固定相中混合物進(jìn)行洗脫，混合物中不同物質(zhì)以不同速度沿固定相移動(dòng)，最終達(dá)到分離的方法。

2.1 高效液相色譜法（ HPLC）

HPLC具有分離好、靈敏等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用于各學(xué)科中。Yan等[5]采用分子印跡固相萃取-HPLC-紫外法分析火腿腸中沙丁胺醇藥殘，去氧腎上腺素作為分子印跡固相萃取虛擬模板。Rezazadeh等[6]采用液膜萃取-HPLC-紫外法檢測水樣中沙丁胺醇等，對有機(jī)相液膜組成優(yōu)化，對提取時(shí)間、電壓、樣品溶液pH等分析條件進(jìn)行了研究。Hutchings 等[7]用HPLC-熒光檢測法對血漿中沙丁胺醇進(jìn)行分析。Zhang等[8]用石墨電極電化學(xué)-HPLC檢測人血漿和尿液中沙丁胺醇。樣品通過固相硅膠柱提取，洗脫液由電極陣列檢測。另外，Plavsi? F[9]采用“高效”徑向流色譜法半定量分析了尿液中沙丁胺醇、特布他林。

2.2 毛細(xì)管電泳法（CE）

CE又稱為高效毛細(xì)管電泳法（HPCE），是目前研究最多的新型色譜法，80年代中后期得到飛速發(fā)展。Sirichai等[10]用CE-紫外法對沙丁胺醇藥殘做了分析。王偉宇[11]用CE-安培法分析豬飼料、豬尿和豬肝中沙丁胺醇等。Nguyen等[12]用一種非接觸電導(dǎo)半自動(dòng)便攜式毛細(xì)管電泳儀檢測藥物和豬飼料中沙丁胺醇等。

3 質(zhì)譜法

質(zhì)譜法用電場和磁場將運(yùn)動(dòng)離子按質(zhì)荷比分離后進(jìn)行檢測，是純物質(zhì)鑒定最有力的工具之一。He等[13]用場放大樣品堆積技術(shù)結(jié)合毛細(xì)管-電噴霧電離-質(zhì)譜法對人尿中沙丁胺醇等進(jìn)行在線檢測。Jones等[14]采用超臨界流體色譜-紫外-大氣壓化學(xué)電離-質(zhì)譜法對沙丁胺醇等進(jìn)行分析。

4 色-質(zhì)聯(lián)用法

色-質(zhì)聯(lián)用法包括氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）和高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（HPLC-MS）兩種。這兩種手段綜合了色譜法高分離能力與質(zhì)譜法強(qiáng)鑒別能力，成為分析復(fù)雜多組分微量有機(jī)化合物的高效分析手段。

4.1 GC-MS

王建平等[15]建立了免疫親和色譜-GC-MS，豬肝中沙丁胺醇等經(jīng)稀鹽酸提取后通過免疫親和色譜柱純化。Montrade等[16]用毛細(xì)管GC-MS-電離法對沙丁胺醇等進(jìn)行檢測，牛組織樣品先超聲、酶解，再經(jīng)液液萃取-固相萃取，然后對其三甲基硅烷基衍生物進(jìn)行分析，并用正化學(xué)電離質(zhì)譜及高分辨率質(zhì)譜進(jìn)行進(jìn)一步分析。

4.2 HPLC-MS

Gros 等[17]用固相萃取-HPLC-串聯(lián)離子阱質(zhì)譜檢測地表水和廢水中沙丁胺醇等73種藥殘，自動(dòng)數(shù)據(jù)庫分析。González等[18]用同位素稀釋LC-ESI-MS/MS檢測人和牛尿中沙丁胺醇等。方法基于13C-標(biāo)記的復(fù)合多元線性分析，定量限均低于ng/g水平，可有效用于β興奮劑超痕量分析。Mi等[19]用自動(dòng)在線固相萃取-HPLC-MS檢測豬肉、香腸、奶粉中沙丁胺醇等。Sun等[20]用超高效液相色譜（UPLC）-MS檢測動(dòng)物食品中沙丁胺醇等。樣品經(jīng)酶解，高氯酸萃取，乙酸乙酯和甲基叔丁基醚液液萃取后，MCX柱固相萃取；經(jīng)Waters Acquity UPLC系統(tǒng)、乙腈和水混合流動(dòng)相梯度洗脫。羅柏華[21]對養(yǎng)殖水中沙丁胺醇等環(huán)境激素進(jìn)行全自動(dòng)固相萃取-UPLC-MS分析。Agneta等[22]通過UPLC-四級(jí)桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜法和傅立葉變換離子回旋共振質(zhì)譜法兩種質(zhì)譜法對運(yùn)動(dòng)員和志愿者尿液中沙丁胺醇等β興奮劑及其他激素代謝物差異進(jìn)行檢測，多元統(tǒng)計(jì)分析技術(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，主成分分析法和偏最小二乘回歸法鑒別 m/z 值， Mass TRIX處理所選變量。

5 免疫分析法

免疫分析法是利用抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)來檢測藥物等物質(zhì)的分析法，主要類型有：放射免疫分析法（RIA）、酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）、膠體金免疫層析法（GICA）、熒光免疫分析法（IFA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）等。

Loo等[23]、Collins 等[24]用RIA做了血漿、尿、肝臟中的沙丁胺醇檢測。王保玲等[25]建立沙丁胺醇直接競爭ELISA快速檢測法。張靜[26]對沙丁胺醇GICA技術(shù)及試紙進(jìn)行了詳細(xì)研究和論述。Xu等[27]采用添加了Ru（phen）3（2+） 的二氧化硅納米粒子的IFA定量法檢測豬尿中沙丁胺醇等β興奮劑。Pou等[28]樣品中沙丁胺醇等通過免疫親和色譜提取后進(jìn)行CLIA檢測。

6 生物傳感器

生物傳感器是基于分子水平、多學(xué)科互相滲透的快速微量新興分析方法。

齊玉冰等[29]以單壁碳納米管為電極材料，應(yīng)用分子印跡技術(shù)，以鄰苯二胺為功能單體、沙丁胺醇為模板，采用電化學(xué)聚合法制備了一種新型快速檢測沙丁胺醇的分子印跡傳感器，運(yùn)用電化學(xué)法去除模板。Alizadeh等[30]使用Cu2+介導(dǎo)的沙丁胺醇分子印跡聚合物納米粒子、石墨粉和正二十烷修飾碳糊電極對沙丁胺醇進(jìn)行檢測。Huang等[31]研究了分子印跡光致抗蝕劑作為識(shí)別元素的新型多陣列傳感器，可用于體外或體內(nèi)活性物質(zhì)的痕量檢測。Tang J等[32]用 R-藻紅蛋白作為熒光探針固化在蛋殼膜表面的熒光傳感器法檢測尿液中沙丁胺醇。Zuo等[33]用熒光Cy3 標(biāo)記-半抗原微陣列芯片間接競爭熒光免疫技術(shù)對沙丁胺醇等β興奮劑進(jìn)行檢測。Wang等[34]用銀鈀合金納米粒子-電化學(xué)生物傳感器檢測豬肉中沙丁胺醇等，石墨烯氧化物作為電極材料，銀鈀合金納米粒子用于標(biāo)記沙丁胺醇等抗體。Yan等[35]開發(fā)了一種等離子體共振-無標(biāo)記光學(xué)生物免疫傳感器進(jìn)行沙丁胺醇檢測，具有良好靈敏度和選擇性。

7 其他分析法

Lei等[36]用DNA 標(biāo)記探針免疫PCR檢測沙丁胺醇，檢測限21fg/mL，是檢測小分子物質(zhì)的新型方法。Ganjali等[37]的連續(xù)循環(huán)伏安法結(jié)合流動(dòng)注射分析系統(tǒng)可用于檢測生物樣品中超痕量沙丁胺醇。

8 小結(jié)

本文檢測方法包括分光光度法等經(jīng)典檢測法，也包括GICA、IFA、CLIA等快速檢測法，有GC-MS、HPLC-MS等確證檢測法，還有CE、生物傳感器等新型檢測法。沙丁胺醇檢測限光譜法達(dá)到1×10-11mol/L[3]，色譜法達(dá)到0.02-0.5ug/mL[39-40]，色質(zhì)聯(lián)用達(dá)到0.1 ug/mL[19]，免疫分析法達(dá)到0.049 ng/mL[25]。另外，對于苯乙醇胺A等新型“瘦肉精”[38]，國內(nèi)相關(guān)檢測方法及檢測產(chǎn)品較少甚至欠缺，可借鑒上述檢測方法進(jìn)行其他或新型β興奮劑藥殘檢測方法的研究，以彌補(bǔ)這方面的檢測空白。

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