劉永亮 高艷明 李建設(shè) 等

摘要：通過(guò)設(shè)施連作高強(qiáng)度種植與開(kāi)放和半開(kāi)放式的大田和陽(yáng)畦種植模式相比較，探究設(shè)施土壤連作模式下，土壤養(yǎng)分、重金屬、微量元素以及微生物區(qū)系組成變化，明確連作模式對(duì)土壤細(xì)菌和真菌群落多樣性以及土壤中細(xì)菌真菌優(yōu)勢(shì)菌群的影響。結(jié)果表明，連作高強(qiáng)度種植條件下土壤中各種離子含量發(fā)生了很大的變化，其中溫室鈉離子和氯離子含量與大田和陽(yáng)畦地相比有所降低，而鉀離子、鈣離子和碳酸氫根離子含量相比大田和陽(yáng)畦地增高。溫室連年高強(qiáng)度的種植使土壤微生物數(shù)量明顯高于大田和陽(yáng)畦地土壤中微生物的數(shù)量，連年種植對(duì)土壤微生物影響也比較明顯，降低了細(xì)菌群落多樣性而提高了真菌群落多樣性，溫室高強(qiáng)度的種植降低了土壤蛋白酶、脲酶和蔗糖酶活性，提高了土壤脫氫酶的活性。溫室高強(qiáng)度的種植導(dǎo)致土壤養(yǎng)分的大量積累，尤其是磷素的積累更為嚴(yán)重；對(duì)土壤中重金屬含量的影響也比較明顯，其中對(duì)鉻和汞的含量影響最大。同時(shí)，溫室土壤中有效銅和有效鋅含量高出陽(yáng)畦地和大田10倍以上。因此，設(shè)施種植要減少連作，合理的輪作使設(shè)施土壤長(zhǎng)期有效的發(fā)展。

關(guān)鍵字：高強(qiáng)度種植；設(shè)施土壤；土壤化學(xué)特征；微生物特征；酶活性

中圖分類號(hào)：S606.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）04-0838-06

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.04.007

Effect of High-intensity Growing Conditions Year after Year on

Soil Properties in Ningxia

LIU Yong-liang，GAO Yan-ming，LI Jian-she，ZHANG Xue-yan

（Agriculture College Ningxia University， Yinchuan 750021， China）

Abstract： Compared the planting pattern of high strength continuous cropping in facilities with open and semi open planting in field and cold frame，researched composition change of soil nutrients， heavy metals， trace elements and microbial flora under the continuous cropping pattern of facilities，confirmed the influence of continuous cropping pattern on soil bacterial and fungal community diversity as well as the dominant bacteria in soil. The results showed that， even at high intensity for planting soil conditions， great changes occurred in the various ion content， including greenhouse sodium ions and chloride ion content compared with the field and cold frame to be reduced， the content of potassium ions， calcium ions and carbonate hydrogen ion increased that compared to the field and cold frame and higher. Microbial number in soil after high-intensity continuous cropping in greenhouse was significantly higher than the number of field and cold frame soil microorganisms. The high strength of the greenhouse decreased the activity of protease， urease and invertase， and increased the activity of dehydrogenase in soil. The high intensity of the planting of greenhouse caused a lot of soil nutrient accumulation， especially the accumulation of phosphorus was more serious. The contents of heavy metals in soil， especially the contents of Cr and Hg， were significantly affected. Meanwhile， the effective copper and zinc content in greenhouse soil was over ten times more than the content in cold frame and field. Therefore， it was effective to reduce the continuous cropping and rotation， and to make the facility soil long-term and effective.

Key words： high strength planting； soil chemistry trait； soil index；microbial trait； enzymatic activity

設(shè)施溫室栽培是通過(guò)改變自然環(huán)境，使作物獲得適宜的生長(zhǎng)條件，可以擺脫不利于作物生長(zhǎng)的自然環(huán)境條件和有限的土地資源，進(jìn)行周年生產(chǎn)，從而大大的提高了作物的產(chǎn)量和土地利用率。設(shè)施栽培條件下，由于覆蓋使土壤缺少自然雨水的淋洗，并且土壤溫度、濕度、土壤通氣狀態(tài)以及肥水的管理等因素都與露地大田有著較大的差別，加之長(zhǎng)年的連作及高強(qiáng)度種植，導(dǎo)致土壤的養(yǎng)分失衡、土壤板結(jié)、土壤鹽堿化、微生物數(shù)量和群落的多樣性發(fā)生變化等，嚴(yán)重影響到作物的正常生長(zhǎng)發(fā)育及產(chǎn)量的形成。研究表明，隨著設(shè)施栽培年限的增加，設(shè)施菜地土壤次生鹽漬化現(xiàn)象不斷出現(xiàn)并日益加重，嚴(yán)重影響了蔬菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，阻礙蔬菜生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展[1，2]。由于設(shè)施栽培產(chǎn)量及價(jià)格高，經(jīng)濟(jì)效益好，農(nóng)民為了提高產(chǎn)量，往往大量施用肥料，其用量遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于露地栽培的用肥量，達(dá)到露地栽培的4～5倍，有的達(dá)到10倍以上，養(yǎng)分量大大超出了作物生長(zhǎng)的需求量，沒(méi)有被植物吸收的營(yíng)養(yǎng)元素，多以可溶性鹽的形式在土壤中不斷積累[3]。當(dāng)積累到一定程度時(shí)，造成土壤養(yǎng)分失衡，進(jìn)而影響作物的正常生長(zhǎng)。呂福堂等[4]報(bào)道，聊城市日光溫室施肥量為大田的5～10倍，個(gè)別甚至達(dá)到20多倍。大量施肥導(dǎo)致土壤中部分養(yǎng)分的積累，是造成土壤鹽漬化的重要因素之一。設(shè)施栽培土壤次生鹽漬化的鹽分組成主要以 NO3-、SO42-、Ca2+為主，其次還有陰離子，主要包括Cl-、CO32-；另外，陽(yáng)離子主要包括Mg2+、K+（Na+）。而土壤鹽分集中在地表及耕作層是設(shè)施土壤次生鹽漬化最明顯的特征。在土壤微生物和土壤酶活性方面，吳鳳芝等[5]的研究結(jié)果表明，連作土壤微生物群落多樣性指數(shù)、豐富度及其均勻度指數(shù)均隨著黃瓜種植年限的增加而降低，黃瓜產(chǎn)量顯著下降。隨著連作年限的增加，土壤主要養(yǎng)分含量有增加的趨勢(shì)，土壤脲酶活性、中性磷酸酶、酸性磷酸酶活性也有增加的趨勢(shì)，土壤化學(xué)性狀變差，出現(xiàn)了鹽類積累[6，7]。

寧夏蓮湖農(nóng)場(chǎng)設(shè)施溫室長(zhǎng)年種植番茄，連作10年以上溫室比較常見(jiàn)，目前連作溫室番茄病蟲(chóng)害嚴(yán)重、坐果率低、植株生長(zhǎng)不良、產(chǎn)量低。因此，本研究通過(guò)番茄設(shè)施連年高強(qiáng)度種植條件下的溫室土壤與溫室前陽(yáng)畦地和大田土壤進(jìn)行土壤質(zhì)量參數(shù)相比較，進(jìn)一步探究番茄連年高強(qiáng)度種植對(duì)土壤特性的影響。旨在為綜合評(píng)價(jià)設(shè)施連作高強(qiáng)度種植條件下對(duì)土壤微生物、土壤酶活性、土壤養(yǎng)分、土壤離子、土壤微量元素的含量以及土壤重金屬含量的影響，同時(shí)進(jìn)一步說(shuō)明設(shè)施栽培條件下土壤質(zhì)量的演變，為寧夏設(shè)施番茄種植提供理論基礎(chǔ)，同時(shí)為豐富與發(fā)展連作障礙和設(shè)施高強(qiáng)度種植理論提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2013年5月1日采樣，試驗(yàn)地點(diǎn)為寧夏回族自治區(qū)青銅峽市蓮湖農(nóng)場(chǎng)，試驗(yàn)設(shè)計(jì)為3個(gè)處理，重復(fù)3次。處理A為連續(xù)種植10年番茄的日光溫室棚（一年兩茬），以下簡(jiǎn)稱溫室；處理B為鄰近溫室的陽(yáng)畦地（2009 — 2012年種植玉米），下稱陽(yáng)畦地；處理C為鄰近溫室的大田（2008 — 2012年種植水稻），以下簡(jiǎn)稱大田。

1.2 測(cè)定指標(biāo)及方法

用5點(diǎn)混合取樣法進(jìn)行土壤樣品的采集，分別測(cè)定不同土層深度和不同處理土壤微生物數(shù)量、土壤酶活性、土壤養(yǎng)分、土壤離子、土壤重金屬和微量元素含量。采集0～30 cm土層土壤，混勻、過(guò)孔徑2.5 mm篩，4 ℃保存，用于土壤微生物數(shù)量的測(cè)定；分別采集0～20、20～40 cm土層土壤，混勻后風(fēng)干保存、過(guò)篩，用于土壤酶活性、土壤離子、土壤養(yǎng)分以及土壤重金屬和微量元素含量的測(cè)定。

微生物數(shù)量的測(cè)定采用平板稀釋計(jì)數(shù)法，細(xì)菌培養(yǎng)采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，真菌采用馬丁孟加拉紅培養(yǎng)基，放線菌采用淀粉硝酸鉀培養(yǎng)基（高氏一號(hào)），土壤酶活性測(cè)定均參照關(guān)松蔭等[8]的試驗(yàn)方法。土壤離子測(cè)定方法參照鮑士旦[9]的試驗(yàn)方法；土壤速效鉀含量采用醋酸銨-火焰光度計(jì)法測(cè)定、土壤全鉀含量采用NaOH熔融-火焰光度計(jì)法測(cè)定、土壤速效磷含量采用碳酸氫鈉法測(cè)定、土壤全磷含量采用硫酸-高氯酸消煮法測(cè)定、土壤堿解氮含量采用堿解擴(kuò)散法測(cè)定、土壤全氮含量采用重鉻酸鉀-硫酸消化法測(cè)定、土壤有機(jī)質(zhì)含量采用重鉻酸鉀容量法測(cè)定。土壤微量元素的測(cè)定均參照鮑士旦[9]的試驗(yàn)方法。As、Hg含量采用氫化物發(fā)生原子熒光光譜儀測(cè)定，Cd、Pb用石墨爐原子吸收光譜儀測(cè)定，Cr用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀測(cè)定[9]。

土壤中總DNA的提取是采用深圳市安必勝科技有限公司提供的強(qiáng)力土壤DNA提取試劑盒。提取的DNA在-85 ℃冰箱冷凍保存。樣品檢測(cè)分別采用細(xì)菌通用引物 341f-GC/U758。首先采用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行濃度及純度檢測(cè)。然后根據(jù)濃度檢測(cè)結(jié)果，采用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA樣品的完整性，電壓為120 V，電泳時(shí)間約為20 min。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Microsoft Excel 2003和DPS v3.01統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、作圖和統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 高強(qiáng)度種植對(duì)土壤微生物特性的影響

2.1.1 對(duì)微生物數(shù)量的影響 由表1可知，土壤細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量都表現(xiàn)出溫室>大田>陽(yáng)畦地，并且溫室、大田和陽(yáng)畦地之間表現(xiàn)出差異顯著性（P<0.05）。其中溫室細(xì)菌數(shù)分別較大田和陽(yáng)畦地高49.02%和149.06%，大田較陽(yáng)畦地高67.14%；溫室真菌數(shù)分別較大田和陽(yáng)畦地高47.66%和241.57%，大田較陽(yáng)畦地高131.33%；溫室放線菌數(shù)分別較大田和陽(yáng)畦地高120.90%和510.94%，大田較陽(yáng)畦地高176.56%。

2.1.2 對(duì)土壤細(xì)菌多樣性的影響 對(duì)溫室、陽(yáng)畦地和大田土壤進(jìn)行基因組DNA的提取，提取后產(chǎn)物經(jīng)0.8%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè)，樣品上樣量為50～100 ng，以 DL15 000為Marker，上樣量為3 μL，結(jié)果如圖1所示，可以清晰的看到基因組DNA條帶，條帶有較好的特異性、單一、條帶比較清晰，未出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，且擴(kuò)增產(chǎn)物與目的片段長(zhǎng)度相近。

3 小結(jié)與討論

連作高強(qiáng)度種植條件下土壤中的微生物數(shù)量、土壤養(yǎng)分、土壤酶活性、土壤離子含量、微量元素、重金屬含量和微生物多樣性都發(fā)生了較大的變化，與大田和陽(yáng)畦地相比有明顯的差異。通過(guò)各個(gè)指標(biāo)的分析，旨在為寧夏設(shè)施番茄連年生產(chǎn)過(guò)程中以及設(shè)施土壤連作改良提供理論參考。

土壤pH、微生物、土壤養(yǎng)分、土壤離子含量、土壤酶活性及微量元素含量等都是評(píng)價(jià)土壤質(zhì)量的重要指標(biāo)。結(jié)果表明，連作高強(qiáng)度種植條件下土壤中各離子含量發(fā)生很大的變化，其中鈉離子和氯離子含量與大田和陽(yáng)畦地相比有所降低，而鉀離子、鈣離子和碳酸氫根離子含量相比大田和陽(yáng)畦地增高。這可能是引起土壤鹽堿化的重要因素之一。從EC值也可以看出，設(shè)施高強(qiáng)度的種植導(dǎo)致土壤全鹽含量的增加，連年高強(qiáng)度的種植條件下鹽分離子主要積累在0～20 cm土層。溫室高強(qiáng)度的種植使土壤微生物數(shù)量明顯高于大田和陽(yáng)畦地土壤中微生物的數(shù)量，但是大田與陽(yáng)畦地相比較，前茬作物也影響著土壤中微生物的數(shù)量。同時(shí)溫室高強(qiáng)度的種植也影響著土壤酶活性的變化，與大田和陽(yáng)畦地相比較，高強(qiáng)度的種植降低了土壤蛋白酶、脲酶和蔗糖酶活性，提高了土壤脫氫酶的活性。溫室高強(qiáng)度的種植導(dǎo)致土壤養(yǎng)分的大量積累，尤其是磷素的積累更為嚴(yán)重，在0～20 cm土層，溫室速效磷分別較陽(yáng)畦地和大田高557.59%和242.32%，溫室全磷分別較陽(yáng)畦地和大田高250.00%和194.74%，這可能與當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)民長(zhǎng)年重施磷肥有關(guān)。在土壤重金屬方面，連年高強(qiáng)度的種植對(duì)土壤中重金屬含量的影響也比較明顯，其中對(duì)鉻和汞的含量影響最大，其中0～20 cm土層中，溫室鎘含量分別較陽(yáng)畦地和大田高25.00%和33.99%，溫室汞含量分別較陽(yáng)畦地和大田高80.95%和90.00%，這可能與農(nóng)藥、除草劑和化肥的大量使用有關(guān)。在土壤微量元素方面，連年的高強(qiáng)度種植對(duì)土壤中微量元素含量也有明顯影響，尤其是對(duì)土壤中有效銅和有效鋅含量的影響最大，其溫室土壤中有效銅和有效鋅含量較陽(yáng)畦地和大田高幾倍甚至10倍以上。高強(qiáng)度種植提高了土壤中真菌群落的多樣性，而降低了土壤中細(xì)菌群落的均勻度和多樣性。

土壤離子含量的高低直接影響著土壤次生鹽漬化程度，造成設(shè)施連作土壤離子含量變化的主要因素是不合理地大量使用化肥和有機(jī)肥，肥料的大量使用是造成設(shè)施菜地土壤次生鹽漬化的重要原因之一[10，11]。在長(zhǎng)期設(shè)施栽培條件下，氮素淋溶可導(dǎo)致地下水硝態(tài)氮污染。另外，過(guò)量的硝態(tài)氮還造成氮氧化物等溫室氣體的大量釋放，使溫室內(nèi)有害氣體聚集量增加，對(duì)蔬菜生長(zhǎng)產(chǎn)生直接危害[12]。土壤磷素的過(guò)量累積對(duì)環(huán)境也會(huì)帶來(lái)潛在的威脅：一方面在質(zhì)地較粗的土壤中可以發(fā)生磷素的淋失；另一方面，土壤侵蝕和地表徑流會(huì)將表土中的磷素帶入水體，引起富營(yíng)養(yǎng)化[13]。農(nóng)藥和雞糞、豬糞等有機(jī)肥和磷肥的大量使用是造成土壤重金屬含量增加的主要因素，動(dòng)物糞便中往往含有大量的銅、鋅等元素，會(huì)造成土壤中這些元素的積累，另外，鎘、鉻在磷肥中含量較高。當(dāng)重金屬含量積累到限制作物正常生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)，出現(xiàn)作物的生長(zhǎng)不良、產(chǎn)量下降等，作物生長(zhǎng)在重金屬含量較高的土壤中，使重金屬在作物體內(nèi)富集，進(jìn)過(guò)食物鏈進(jìn)入人體，影響人的身體健康。因此，在設(shè)施農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中，要重視農(nóng)藥和肥料的使用，進(jìn)行合理的輪作栽培，適當(dāng)?shù)男萏?，加?qiáng)設(shè)施土壤的管理，不能只為追求短期效益而破壞設(shè)施土壤的生態(tài)平衡。

參考文獻(xiàn)：

[1] 夏立忠，李忠配，楊林章.大棚栽培番茄不同施肥條件下土壤養(yǎng)分和鹽分組成與含量的變化[J].土壤，2005，37（6）：620-625.

[2] 王艷群，彭正萍，薛世川，等.過(guò)量施肥對(duì)設(shè)施農(nóng)田土壤生態(tài)環(huán)境的影響[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2005，24（S）：81-84.

[3] 房云波，孟春玲.保護(hù)地內(nèi)土壤次生鹽漬化對(duì)土壤性狀的影響及對(duì)策[J].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006（6）：40-41.

[4] 呂福堂，司東霞，張秀省.日光溫室土壤鹽分和養(yǎng)分的變化趨勢(shì)[J].中國(guó)蔬菜，2004（3）：14-16.

[5] 吳鳳芝，王學(xué)征.設(shè)施黃瓜連作和輪作中土壤微生物群落多樣性的變化及其與產(chǎn)量品質(zhì)的關(guān)系[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，40（10）：2274-2280.

[6] 吳鳳芝，劉 德，王東凱，等.大棚蔬菜連作年限對(duì)土壤主要理化性狀的影響[J].中國(guó)蔬菜，1998（4）：5-8.

[7] 童有為，陳淡飛.溫室土壤次生鹽漬化的形成和治理途徑研究[J].園藝學(xué)報(bào)，1991，18（2）：159-162.

[8] 關(guān)松蔭，張德生.土壤酶及其研究法[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1986.

[9] 鮑士旦.土壤農(nóng)化分析[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2000.268-282.

[10] 李文慶，賈繼文，李貽學(xué).大柵蔬菜種植對(duì)土壤理化及生理性狀影響規(guī)律研究[M].南京：河海大學(xué)出版社， 1997.

[11] ZHANG Y G， JIANG Y， LIANG W J. Accumulation of soil soluble salt in vegetable greenhouses under heavy application of fertilizers[J].Agricultural Journal，2006，3：123-127.

[12] 程美廷.溫室土壤鹽分積累鹽害及其防治[J].土壤肥料，1990（1）：1-4.

[13] 張金錦，段增強(qiáng).設(shè)施菜地土壤次生鹽漬化的成因、危害及其分類與分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的研究進(jìn)展[J].土壤，2011，43（3）：361-366.