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        中藥三七質(zhì)量評價半微量方法及在三七連作障礙樣品分析中的應(yīng)用

        2016-11-19 12:47:33曹怡王超群徐風賈秀虹劉廣學楊生
        中國中藥雜志 2016年20期
        關(guān)鍵詞:皂苷比值指紋

        曹怡+王超群+徐風+賈秀虹+劉廣學+楊生超+龍光強+陳中堅+魏富剛+楊紹周+福田浩三+王璇+蔡少青

        [摘要]該研究旨在建立三七質(zhì)量評價半微量方法并應(yīng)用于三七連作障礙樣品分析。采用100倍量水飽和正丁醇超聲提取0.1 g三七樣品,所建立的半微量提取方法相比于甲醇常量提取法對5個主要皂苷類成分及三七皂苷K和Fa提取效率高9.6%~20.6%,且重復性良好,RSD<2.5%。LC-MS-IT-TOF技術(shù)指認指紋圖譜16個皂苷類成分特征峰,包括8個人參二醇型皂苷和8個人參三醇型皂苷。利用HPLC指紋圖譜相似度評價及對特征峰峰面積提取可進行三七的質(zhì)量分析。應(yīng)用所建立的方法對人工干預克服連作障礙三七樣品質(zhì)量評價的結(jié)果表明:指紋圖譜相似度、三七皂苷Fa的相對含量及三七皂苷K與三七皂苷Fa的比值(N-K/Fa值)均可作為評價連作地三七質(zhì)量恢復程度的指標,其中N-K/Fa值同樣適用于不同生長年限三七樣品的區(qū)分。正常(無連作栽培)組樣品三七皂苷K與三七皂苷Fa的峰面積比值為0.45~1.33;連作組樣品個頭小于正常組,指紋圖譜與正常組相似度均低于0.87,三七皂苷Fa的峰面積顯著低于正常組,N-K/Fa值顯著高于正常組,為2.35~4.74,與正常組三七樣品質(zhì)量存在差異。人工干預一組的樣品與正常組相似度均高于0.87,且16個特征峰的峰面積和分布模式均與正常組無顯著差異,N-K/Fa值為0.42~2.06。人工干預二組的樣品除重量較小的樣品外,其余均與正常組指紋圖譜相似度較高,三七皂苷K顯著高于正常組,N-K/Fa值為0.96~6.16。連作障礙經(jīng)人工干預后三七的質(zhì)量均有不同程度的恢復和提高,其中人工干預一組的三七質(zhì)量恢復情況優(yōu)于人工干預二組。該研究建立的三七質(zhì)量評價半微量方法,采用指紋圖譜及峰面積比值作為評價指標可避免含量測定的繁瑣及昂貴,為連作障礙三七樣品的質(zhì)量分析提供了簡便、快速和準確的評價方法,且可應(yīng)用于三七不同年限等樣品的質(zhì)量評價。

        [關(guān)鍵詞]三七; 半微量高效提取; 連作障礙; LC-MS-IT-TOF; HPLC指紋圖譜; 特征峰; 三七皂苷K/三七皂苷Fa

        [Abstract]Panax notoginseng is a commonly used traditional Chinese medicine with blood activating effect while has continuous cropping obstacle problem in planting process. In present study, a semimicroextraction method with water-saturatedN-butanol on 0.1 g notoginseng sample was established with good repeatability (RSD<2.5 %) and 9.6 %-20.6 % higher extraction efficiency of seven saponins than the conventional method. A total of 16 characteristic peaks were identified by LC-MS-IT-TOF, including eight 20(S)-protopanaxatriol (PPT) type saponins and eight 20(S)-protopanaxadiol (PPD) type saponins. The established method was utilized to evaluate the quality of notoginseng samples cultivated by manual intervened methods to overcome continuous cropping obstacles.As a result, HPLC fingerprint similarity, content of Fa and ratio of notoginsenoside K and notoginsenoside Fa (N-K/Fa) were found out to be as valuatable markers of the quality of samples in continuous cropping obstacle research, of which N-K/Fa could also be applied to the analysis of notoginseng samples with different growth years.Notoginseng samples with continuous cropping obstacle had HPLC fingerprint similarity lower than 0.87, in consistent with normal sample, and had significant lower content of notoginsenoside Fa and significant higher N-K/Fa (2.35-4.74) than normal group (0.45-1.33). All samples in the first group with manual intervention showed high similarity with normal group (>0.87), similar content of common peaks and N-K/Fa (0.42-2.06). The content of notoginsenoside K in the second group with manual intervention was higher than normal group. All samples except two displayed similarity higher than 0.87 and possessed content of 16 saponins close to normal group. The result showed that notoginseng samples with continuous cropping obstacle had lower quality than normal sample. And manual intervened methods could improve their quality in different levels.The method established in this study was simple, fast and accurate, and the markers may provide new guides for quality control in continuous cropping obstacle research of notoginseng.

        [Key words]Panax notoginseng; semimicro and highly efficient extraction method; continuous cropping obstacles; LC-MS-IT-TOF; HPLC fingerprint; characteristic peaks; notoginsenoside K/notoginsenoside Fa

        doi:10.4268/cjcmm20162012

        三七是常用中藥,來源于五加科植物三七Panax notoginseng (Burk.) F.H. Chen的干燥根及根莖,主要功效為散瘀止血、消腫定痛[1]。2015年版《中國藥典》的質(zhì)量標準規(guī)定三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和Rb1的總含量不少于5.0 %[1]。

        三七在種植環(huán)節(jié)中存在連作障礙(continuous cropping obstacles),即在同一塊土壤連續(xù)種植、正常栽培的情況下也會出現(xiàn)生長勢變?nèi)酢a(chǎn)量降低、品質(zhì)下降、病蟲害嚴重等現(xiàn)象[2]。研究者們對于連作障礙的克服進行了很多嘗試,研究的主要關(guān)注點在于土壤的成分變化及三七的產(chǎn)量恢復[3],但對于人工干預克服連作障礙的三七并未進行質(zhì)量分析,其有效性及安全性如何有待評價。目前克服連作障礙的研究基本在試驗田中開展,所獲得的三七樣品數(shù)量有限,需要建立一種少量高效的分析方法來對其質(zhì)量進行研究,同時找出可用于質(zhì)量評價的指標。此外,由于三七個子藥材的個體差異大,為充分研究不同樣品之間的差異,宜對單個樣品分別進行分析。本課題組前期已建立三七的HPLC指紋圖譜法[4]、11種成分的定量[5]和“一測多評”方法[6-7],為本研究的方法開發(fā)提供基礎(chǔ)。

        本研究建立了半微量高效提取方法,所用樣品量降至100 mg,指紋圖譜采用LC-MS-IT-TOF技術(shù)解析出16個特征峰,特征峰的峰面積和比值比較可用于三七的質(zhì)量評價。將其應(yīng)用于云南文山苗鄉(xiāng)三七科技園的三七連作地、人工干預地及無連作正常地收集三七樣品質(zhì)量對比,找到了可用以進行評價的關(guān)鍵指標。

        1 材料

        1.1 儀器與試劑

        高效液相色譜儀Agilent 1200(Agilent,美國);Shimadzu LCMS-IT-TOF 液質(zhì)聯(lián)用儀(Shimadzu,日本);101-0AB型電熱鼓風干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司);FPV-S5,神奇超細珍珠機(佑崎有限公司);國家標準檢驗篩(浙江上虞市春耀儀器紗篩廠,65目,0.25 mm);1/10萬天平(BP211D,Sartorius);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE-52A,上海亞榮生化儀器廠);KH-500DB型數(shù)控超聲波清洗器(昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司)。

        正丁醇(分析純,北京化工廠);甲醇(分析純,北京化工廠);乙腈(色譜純,F(xiàn)isher Scientific);娃哈哈純凈水(杭州娃哈哈集團有限公司);甲酸(99% 色譜純,ROE);甲酸(LC-MS級,F(xiàn)isher Scientific);超純水(Milli-Q 系統(tǒng))。

        1.2 藥材信息

        樣品來源為云南文山苗鄉(xiāng)三七科技園連作障礙研究試驗田,由北京大學藥學院蔡少青教授鑒定為五加科植物三七P. notoginseng的新鮮地下部分。供研究的三七樣品共4組,均為同時生長及處理的二年生三七,具體編號及各組分析樣品數(shù)量,見表1,其中連作組為種植于連作土壤的三七,人工干預的2個組為種植于以特定方式施加工人干預的連作土壤中的三七,正常組為種植于正常土壤中的三七各組樣品外觀及代表HPLC圖,見圖1,2,可見正常組與人工干預2個組的樣品個頭大小相近,而連作組的樣品個頭普遍較小,且存在著主根腐爛的現(xiàn)象。新鮮樣品清洗后于陰涼處晾干,對須根、主根、根莖進行分離,取主根打粉,過65目篩,進行后續(xù)的分析。

        2 方法

        2.1 供試品制備

        在課題組前期研究[4]的基礎(chǔ)上為提高提取效率,降低樣品用量,采用100倍量的水飽和正丁醇進行提取,設(shè)計半微量提取方法:精密稱定粉末0.1 g,于50 mL錐形瓶中,精密加入水飽和正丁醇10 mL(水飽和正丁醇配制方法:于150 mL分液漏斗中加入80 mL正丁醇和20 mL水,混勻,靜置,取正丁醇層),20~40 ℃下超聲提取1 h(250 W),冷卻至室溫,濾過用8 mL甲醇(A.R.)洗滌濾紙和殘渣2次(4 mL/次),濾液70 ℃下減壓蒸干,用甲醇(G.R.)復溶,于2 mL量瓶中稀釋至刻度,過0.45 μm濾膜,即得供試品溶液,生藥質(zhì)量濃度0.05 g·mL-1。每份樣品平行提取2次,峰面積取平均值。

        2.2 HPLC分析[5]

        Agilent 1200 高效液相色譜儀,Phenomenex Luna C18色譜柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。流動相為0.005%甲酸水(A)和乙腈(B),梯度洗脫0~35 min,21% B;35~36 min,21~30% B;36~55 min,30~40% B;55~65 min,40~85% B;65~80 min,85~100% B;80~85 min,100% B。流速1 mL·min-1;進樣量10 μL;柱溫25 ℃;檢測波長200 nm。

        2.3 LC-MS-IT-TOF分析

        Shimadzu LC-MS-IT-TOF 液質(zhì)聯(lián)用儀:包括LC-20AD 二元輸液泵,DGU-20A3 脫氣單元,SIL-20AC可制冷自動進樣器,CTO-20A 柱溫箱,SPD-M20A二極管陣列檢測器,CBM-20A 系統(tǒng)控制器,ESI 離子源和IT-TOF質(zhì)量分析器。數(shù)據(jù)的采集和處理采用Shimadzu software

        LC-MS solution version 3.60,分子式和元素組成預測軟件Formula Predictor version 1.2 和 Accurate Mass Calculator (Shimadzu,日本)。

        液相條件同2.2項。質(zhì)譜條件:流速0.2 mL·min-1,超純N2為霧化氣(1.5 mL·min-1),超純He為碰撞氣,曲型脫溶劑管(CDL)和加熱模塊(Heat Block)溫度200 ℃,正負離子模式下的全掃描,掃描范圍m/z300~2 000(MS1), m/z50~2 000(MS2和MS3),接口電壓4.5 kV (+)/-3.5 kV (-),檢測器電壓1.7 kV,碰撞誘導解離能量(CID)50%,三氟乙酸鈉(2.5 mmol·L-1)校正質(zhì)量范圍。

        特征峰鑒定以負離子模式下的母離子及碎片信息進行解析,并以正離子模式下的母核信息進行進一步的確認。通過母離子的精確質(zhì)荷比推測分子式,推斷可能的結(jié)構(gòu)式,母核的信號判別皂苷的類型,通過糖基的丟失信號及碎片相對強度確定糖的連接位置及種類。同時以文獻報道的液相保留行為進行輔助解析[8-11]。

        2.4 中藥三七質(zhì)量評價半微量方法的建立

        2.4.1 樣品處理及HPLC分析 樣品處理如2.1項所述,HPLC方法同2.2項所述。

        2.4.2 指紋圖譜相似度評價 采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(國家藥典委員會2004A版),對照譜生成方法為平均數(shù),時間窗寬度0.5 min,剪切前5 min和最后5 min的數(shù)據(jù),選取10個峰進行多點校正。

        2.4.3 特征峰數(shù)據(jù)的提取及分析 對特征峰的色譜峰面積數(shù)據(jù)進行提取,對其各自的峰面積數(shù)據(jù)、峰面積加和數(shù)據(jù)及比值數(shù)據(jù)進行組間的t檢驗比較。

        2.5 人工干預克服連作障礙三七樣品的質(zhì)量評價

        1.2項中的三七藥材樣品按照2.4項所述步驟進行質(zhì)量評價研究。

        3 結(jié)果

        3.1 質(zhì)量評價方法建立

        3.1.1 半微量提取法提取效率及重復性評價 對本研究中所建立的半微量提取法(0.1 g樣品,水飽和正丁醇提取,以下稱為A法)和課題組前期建立的常量提取法[5](0.5 g樣品,甲醇提取,以下稱為B法)進行對比,所用樣品為三七粉(編號6748,產(chǎn)地云南),分別用2種提取方法重復提取3次,進行峰面積的比較。在相同的生藥濃度下,半微量提取法對人參皂苷Rg1, Re, Rb1, Rd和三七皂苷R1, Fa, K共7個成分的提取率分別提高17.5%, 16.6%, 15.0%, 9.6%, 13.8%, 20.6%, 19.0%,見表2。對半微量提取法的方法重復性進行考察,同一份三七粉(編號6748)用本方法重復提取6次,人參皂苷Rg1, Re, Rb1, Rd和三七皂苷R1, Fa, K的RSD分別為1.3%, 2.3%, 0.78%, 0.90%, 2.0%, 0.85%, 2.4%,證明方法重復性良好。

        3.1.2 HPLC指紋圖譜建立及特征峰指認 采用課題組前期建立的指紋圖譜方法[5],能夠?qū)υ碥疹惓煞诌M行有效分離。已證實0~60 min主要為皂苷類成分,這個時間段中16個特征峰可進行有效峰面積提取, 見圖3。采用LC-MS-IT-TOF技術(shù)對這16個特征峰進行結(jié)構(gòu)指認,母離子信息、碎片信息及解析結(jié)果見表3。16個特征峰的鑒定結(jié)果分別為三七皂苷R1(1, 以下簡稱 R1);人參皂苷Rg1(2, Rg1);人參皂苷Re(3, Re);乙酰人參皂苷Rg1(4, Ace-Rg1);三七皂苷R4(5, R4); 三七皂苷Fa(6, Fa);人參皂苷Rf(7, Rf);人參皂苷Rb1(8, Rb1);三七皂苷R2(9, R2);丙二酰人參皂苷Rb1(10, Mal-Rb1);人參皂苷Rg2(11, Rg2);人參皂苷Rh1(12, Rh1);人參皂苷Rb1異構(gòu)體(13, Iso-Rb1);人參皂苷Rd(14, Rd);丙二酰人參皂苷Rd(15, Mal-Rd);三七皂苷K(16, N-K)。其中8個為三醇型皂苷,分別為1, 2, 3, 4, 7, 9, 11, 12號化合物;8個為二醇型皂苷,分別為5, 6, 8, 10, 13, 14, 15, 16號化合物。對這16個特征峰進行峰面積提取可用以進行三七樣品的質(zhì)量評價。

        3.2 質(zhì)量評價方法在人工干預克服連作障礙三七樣品質(zhì)量評價中的應(yīng)用

        3.2.1 指紋圖譜相似度評價 利用3.1項建立的分析方法以單一主根個體為分析對象進行半微量提取及HPLC指紋圖譜的建立。以正常組9個樣品建立對照圖譜,各組樣品分別與其進行相似度分析。結(jié)果見圖4,顯示正常組樣品個體間相似度均高于0.87;連作組樣品與對照圖譜相似度均低于0.87,證明其在化學整體輪廓上質(zhì)量與正常組具有差異;人工干預一組相似度提高,均高于0.87,與正常組無差異;人工干預二組中有2個樣品相似度低于0.87,其余4個樣品相似度高于0.87。表明人工干預后連作樣品的化學輪廓差異得到改善,質(zhì)量接近于正常組。其中人工干預二組的三七中相似度最低的6號樣品(GY2-6)個頭較小,主根質(zhì)量為0.65 g,而該組其余樣品質(zhì)量分布范圍為0.91~3.95 g,連作障礙組樣品質(zhì)量為0.73~1.35 g,正常組樣品質(zhì)量為0.85~5.15 g,人工干預一組樣品質(zhì)量為0.84~3.22 g,樣品大小可能影響其次生代謝物的含量,因此GY2-6號樣品與正常對照圖譜的相似度較低,與連作組的模式更接近。從目前分析樣品的相似度評價結(jié)果看人工干預一組的三七樣品質(zhì)量改善效果優(yōu)于人工干預二組。

        3.2.2 特征峰峰面積及比值的組間比較 對16個特征峰的峰面積及峰面積比值在樣品間進行比較, 見表4,可見連作組Rg1, Re, R4, Fa, Rb1, Rh1, Mal-Rd成分的峰面積低于正常組,而N-K, R2, Rg2高于正常組,N-K與Fa的峰面積比值顯著高于正常組。人工干預一組和人工干預二組與正常組基本無明顯差異,但其中人工干預二組的GY2-6樣品的N-K峰面積較高, 見表4,其余各成分的峰面積均較低,與連作組的模式較為接近,樣品個頭小同樣可能為其質(zhì)量偏離正常樣品的原因。

        在各指標中,僅N-K/Fa及Fa的相對含量在連作組中與正常組具有顯著性差異,且同組內(nèi)樣品差異較小,適合作為評價連作障礙三七質(zhì)量研究指標,而其余成分在組間未見顯著性差異,且組內(nèi)樣品差異較大,難以作為特異性指標。對Fa的峰面積進行組間比較,見表4,圖5,可見連作組Fa顯著低于正常組,人工干預后的兩組Fa含量顯著上升。N-K與Fa峰面積比值在各組之間進行比較,見表4,圖5,正常組的比值范圍為0.45~1.33,人工干預一組的比值范圍為0.42~2.06,人工干預二組的比值范圍為0.96~6.16,連作組的比值范圍為2.35~4.74。連作組的樣品N-K/Fa比值顯著高于正常組(P<0.01),人工干預一組與正常組N-K/Fa無顯著性差異,人工干預二組顯著高于正常組(P<0.05),其中2個樣品比值大于2,其余小于2。證明N-K/Fa或Fa的相對含量可作為評判三七克服連作障礙樣品質(zhì)量恢復情況的指標,F(xiàn)a含量越高,N-K/Fa比值越低說明其更接近于正常三七,質(zhì)量得到提升。

        利用指紋圖譜相似度、Fa的相對含量及N-K/Fa比值的評價指標,可證明連作組在化學成分含量與分布模式上與正常組樣品存在差異,人工干預一組樣品均顯著減小此差異,而人工干預二組的樣品質(zhì)量存在組內(nèi)差異,個別個頭較小樣品質(zhì)量較差,但大部分接近正常三七的質(zhì)量。

        4 討論

        本研究建立了半微量提取、指紋圖譜及16個特征峰的LC-MS-IT-TOF指認及峰面積提取比較的三七質(zhì)量評價方法,并將其成功應(yīng)用于人工干預克服連作障礙的研究的三七樣品中。

        常規(guī)三七質(zhì)量評價研究(不同生長年限、不同產(chǎn)地等)獲得的樣品量較大,樣品批次多,可采用以批次為單位進行分析。但在連作障礙等部分研究中所獲得的樣品數(shù)量較少,且采用混合打粉不能反映組內(nèi)樣品質(zhì)量的分布情況,因此宜對單個三七樣品逐個分析。在本研究中,采收的均為二年生三七樣品,大部分樣品個頭較小,針對此問題采用所建立的水飽和正丁醇對0.1 g半微量樣品超聲提取方法,提高了提取效率,并且減少了樣品的耗費,方法重復性良好。此方法可以應(yīng)用于樣品數(shù)量有限的三七質(zhì)量評價分析中,在本課題組目前的研究中發(fā)現(xiàn)此方法可推廣應(yīng)用至主要成分同樣為皂苷類的貴重藥材人參、西洋參等質(zhì)量分析中。

        皂苷類為三七的主要活性成分,因此本研究選擇皂苷類為特征峰進行質(zhì)量評價。利用課題組前期建立的HPLC指紋圖譜方法,并采用LC-MS-IT-TOF技術(shù)共在指紋圖譜中指認16個可進行峰面積提取的特征峰,均為皂苷類成分,其中大部分成分本課題目前已證明為藥材原型活性成分或體內(nèi)吸收入血成分。指紋圖譜的相似度、16個成分的峰面積提取及組間比較可應(yīng)用于不同類型三七樣品的質(zhì)量評價,并找到各自的特征指標。

        HPLC指紋圖譜相似度評價結(jié)果顯示連作組的三七樣品均與正常組相似度較低,人工干預一組樣品與正常組均有較高的相似度,人工干預二組大部分樣品與正常組相似度較高,但存在部分樣品相似度較低的情況。16個特征峰的比較也顯示連作組與正常組的差異,而人工干預的兩個組均與正常組較為接近。

        16個特征峰的峰面積及比值比較發(fā)現(xiàn)指標Fa的含量及N-K與Fa的峰面積比值可用于評價人工干預克服連作障礙三七的質(zhì)量。在連作組中,N-K/Fa顯著升高,F(xiàn)a含量顯著降低,其余皂苷也呈降低趨勢,本課題組已證明三年生三七活血效果更好,N-K與三七活血藥效的相關(guān)性不強,隨著年限的增加有含量下降趨勢,而其余皂苷與活血藥效的相關(guān)性均較強,隨生長年限的增加而含量增高[5],提示連作地樣品的生長狀態(tài)差,有效成分含量低。而人工干預后的樣品Fa的含量均顯著提升,N-K/Fa在人工干預一組顯著下降,在人工干預二組略有下降,證明2種人工干預手段在不同程度提升了連作樣品質(zhì)量,活性成分含量上升接近于正常三七,但其中人工干預二組樣品存在質(zhì)量參差不齊,個別樣品質(zhì)量與正常組存在差異的情況。

        對課題組前期測定的不同生長年限三七樣品的N-K/Fa同樣進行組間的比較,見圖6[5],可見N-K/Fa隨著生長年限的升高而降低,三年生樣品中為0.17~2.88,二年生為1.55~4.97,一年生為2.17~6.57,三年生顯著低于一、二年生樣品,證明N-K與Fa的比值對于不同生長年限的三七區(qū)分及質(zhì)量評價同樣具有指導意義。在本課題組前期研究中,采用R4和Fa的定量分析后的總含量可對不同生長年限三七進行區(qū)分[5],本研究中新尋找到的N-K/Fa指標直接利用峰面積比值作為指標,減少了標準曲線建立的工作量,并解決了R4和Fa的標準品昂貴不易得的問題,可更方便地應(yīng)用于實際操作中。

        5 結(jié)論

        本研究建立了基于半微量提取法,以16個特征峰為指標的三七質(zhì)量評價方法,應(yīng)用性強,適用于樣品量少的三七個體分析。將所建立的方法成功應(yīng)用于人工干預克服連作障礙三七的質(zhì)量評價中,找到指紋圖譜相似度、三七皂苷Fa相對含量及三七皂苷K與三七皂苷Fa的比值(N-K/Fa)可作為其特征評價指標。其中N-K/Fa可同樣作為三七質(zhì)量評價標志物應(yīng)用于不同生長年限三七樣品的區(qū)分。

        [參考文獻]

        [1]中國藥典.一部[S]. 2015:11.

        [2]張重義,林文雄. 藥用植物的化感自毒作用與連作障礙[J]. 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學報,2009(1):189.

        [3]孫雪婷,李磊,龍光強,等. 三七連作障礙研究進展[J]. 生態(tài)學雜志,2015(3):885.

        [4]李靜,王璇,馬付勇,等. 影響中藥三七HPLC指紋譜的若干因素[J]. 中國天然藥物,2004(1):34.

        [5]Jia X, Wang C, Liu J, et al. Comparative studies of saponins in 1-3-year-old main roots, fibrous roots, and rhizomes of Panax notoginseng, and identification of different parts and growth-year samples[J]. J Nat Med,2013,67(2):339.

        [6]Wang C, Jia X, Zhu S, et al. A systematic study on the influencing parameters and improvement of quantitative analysis of multi-component with single marker method using notoginseng as research subject[J]. Talanta,2015,134:587.

        [7]王超群,賈秀虹,陳季,等. 中藥三七“一測多評”質(zhì)量控制方法的系統(tǒng)研究[J]. 中國中藥雜志,2012, 37(22):3438.

        [8]Yang W, Ye M, Qiao X, et al. A strategy for efficient discovery of new natural compounds by integrating orthogonal column chromatography and liquid chromatography/mass spectrometry analysis:its application in Panax ginseng, Panax quinquefolium and Panax notoginseng to characterize 437 potential new ginsenosides[J]. Anal Chim Acta,2012,739:56.

        [9]Qiu S, Yang W, Shi X, et al. A green protocol for efficient discovery of novel natural compounds:characterization of new ginsenosides from the stems and leaves of Panax ginseng as a case study[J]. Anal Chim Acta, 2015, 893:65.

        [10]Wu W, Lu Z, Teng Y, et al. Structural characterization of ginsenosides from flower buds of Panax ginseng by RRLC-Q-TOF MS[J]. J Chromatogr Sci, 2016, 54(2):136.

        [11]Liu J, Wang X, Cai S, et al. Analysis of the constituents in the Chinese drug notoginseng by liquid chromatography-electrospray mass spectrometry [J]. J Chin Pharm Sci,2004(4):225.

        [責任編輯 丁廣治]

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