陳 萍

一起豬鏈球菌病的診治及防治措施

陳 萍

（江蘇省南京市江寧區(qū)林業(yè)局，江蘇南京 211100）

豬鏈球菌病是由鏈球菌引起的一種人畜共患的傳染病。能引起各種年齡的豬發(fā)病，本病呈急性感染時，病豬可迅速發(fā)展為菌血癥、毒血癥和敗血癥。本文利用傳統(tǒng)的實驗方法對江寧區(qū)某豬場的疑似鏈球菌病病例進行病原分離鑒定、生化試驗、藥敏試驗，逐步探討豬鏈球菌病的診斷、治療及防治措施。

豬；鏈球菌；診斷；治療

豬鏈球菌病是世界范圍內(nèi)引致豬鏈球菌病最主要的病原，該菌可引起豬腦膜炎及敗血癥。1987年Kilpper Balz和Schleifer建議將豬鏈球菌歸納為一新種。到1995年，已鑒定豬35個莢膜血清型（1至34型及1/2型）［1］。包括我國在內(nèi)許多國家都發(fā)生過人感染豬鏈球菌并死亡的病例，被我國農(nóng)業(yè)部列為二類疫病［2］。有Ⅰ、Ⅱ兩個型，其中Ⅱ型最多見。豬鏈球菌Ⅱ型的致病性與它毒力因子關(guān)系密切，其毒力因子有溶菌酶釋放蛋白（MRP）、細胞外力因子（EF）、溶血素和莢膜等［3］。1998～1999年江蘇省部分地區(qū)爆發(fā)該病，造成25人感染發(fā)病，其中14人死亡；2005年6-7月，四川在此爆發(fā)由豬鏈球菌Ⅱ型感染引致的豬鏈球菌病，導(dǎo)致人和豬的發(fā)病和死亡，累計報告發(fā)病206人，死亡39例，發(fā)病者均為接觸或食用病、死豬肉的人［4，5］。不僅給養(yǎng)豬業(yè)造成經(jīng)濟損失，而且給公共衛(wèi)生和食品安全造成嚴重威脅。該病一年四季均可發(fā)生，以5～11月發(fā)病較多，多生發(fā)在混群飼養(yǎng)的不良環(huán)境中，全封閉、高密度的現(xiàn)代化集約化養(yǎng)殖場容易流行［6］。近年來，隨著江寧區(qū)養(yǎng)豬業(yè)的集約化程度的不斷提高，該病呈上升趨勢，特別是耐藥性增強，給鏈球菌的防治帶來困難，針對江寧某養(yǎng)殖場的一起疑似豬鏈球菌病進行了實驗室診斷，確診并為養(yǎng)殖戶選擇和使用抗菌藥物提供重要依據(jù)。

1 發(fā)病情況

江寧某一規(guī)模自繁自養(yǎng)豬場的4-10周齡的10頭仔豬突然大病，體溫較高，不食或少食，精神萎靡，發(fā)病初期，用青霉素治療后，體溫有所下降，但發(fā)病后2d已死亡4頭，治療效果不佳。

2 臨床癥狀

病豬精神不振，食欲減少或廢絕，體溫40～42 ℃，并呼吸緊迫。眼結(jié)膜潮紅，流淚。部分仔豬有關(guān)節(jié)炎癥狀，關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、后肢不能站立，頭、頸、背部出現(xiàn)水腫，指壓凹陷。病死豬皮膚發(fā)紺，耳朵、四肢末端、服下等處皮膚紫紅色。

3 剖檢變化

死亡的仔豬剖檢呈明顯敗血癥，頸部、耳根發(fā)紺，鼻粘膜紫紅色、充血及出血，喉頭、器官黏膜出血，常見大量泡沫，肺充血腫脹，淋巴結(jié)不同程度的出血、腫大；肝臟充血腫大，有片狀出血點；脾臟腫大呈暗紅色；心肌松軟，有不規(guī)則出血斑。關(guān)節(jié)皮下有膠樣水腫，關(guān)節(jié)囊內(nèi)有黃色膠樣或纖維素性滲出物。

4 實驗室診斷

根據(jù)本病的發(fā)病情況、臨床癥狀及剖檢變化的特征，一般可做出初步診斷，但由于本病癥狀和病變易與急性豬丹毒、及急性豬瘟相混淆，因此為了確診進行了實驗室診斷。

4.1試驗材料

4.1.1病料 無菌采集疑似豬鏈球菌病豬關(guān)節(jié)液、肝、脾、淋巴結(jié)各1份，編號1號、2號、3號、4號。

4.1.2培養(yǎng)基及試劑 鮮血瓊脂培養(yǎng)基 、血清肉湯培養(yǎng)基、化學(xué)試劑及生化微量反應(yīng)管糖發(fā)酵管等。

4.1.3試驗藥物 藥敏紙片（青霉素、土霉素、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、環(huán)丙沙星、頭孢菌素）。

4.2方法

4.2.1涂片鏡床 無菌采集急性死亡的病豬關(guān)節(jié)液、肝、脾、淋巴結(jié)等病料制成涂片，干燥、火焰固定后進行革蘭氏染色、鏡檢。

4.2.2細菌分離培養(yǎng) 將無菌采集的病料分別接種于血清肉湯進行增菌培養(yǎng)，然后接種在血液瓊脂平板，37 ℃培養(yǎng)18～24 h后，觀察菌落特征及溶血類型，進行革蘭氏染色，顯微鏡檢查。挑取疑似菌落再次接種置血清肉湯37 ℃培養(yǎng)18～24 h做純培養(yǎng)，放置4℃環(huán)境下，保存，待鑒定［7］。

4.2.3生化試驗特性床床 分離菌純培養(yǎng)物分別接種于蔗糖、乳糖、麥芽糖、山梨醇、葡萄糖、甘露糖、棉實糖、水楊苷培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)24 h后，觀察其生化反應(yīng)特性。

判定標準："+"表示大多數(shù)菌株（90～100%）為陽性；"-"表示大多數(shù)菌株（90～100%）為陰性［8，9］。

4.2.4藥敏試驗 采用紙片擴散法［10］，根據(jù)藥敏試驗要求的距離，用無菌棉簽蘸取分離菌的肉湯培養(yǎng)物，涂布法接種于瓊脂平板，待稍干后，用無菌鑷子將各種藥敏紙片分別平貼在培養(yǎng)基表面，37 ℃培養(yǎng)20-24 h，觀察結(jié)果，分別測定抑菌環(huán)的直徑。

判定標準：經(jīng)培養(yǎng)后，有抑菌能力的抗菌藥在紙片周圍出現(xiàn)一個無菌生長的圓圈，成為抑菌圈。抑菌圈直徑在15 mm以上為高度敏感，10-15 mm為中度敏感，10 mm以下為低度敏感，無抑菌環(huán)為不敏感。

5 結(jié)果

5.1涂片鏡檢

革蘭氏染色、顯微鏡檢查為革蘭氏陽性球菌，多數(shù)為圓形或橢圓形，呈成對或短鏈狀排列。

5.2培養(yǎng)特性

37 ℃培養(yǎng)24 h后，在鮮血瓊脂平板上形成半透明、表面光滑、微隆起的灰白色露珠狀的小菌落，外層有明顯的β-溶血環(huán)，生長良好。在血清肉湯中先均勻渾濁，后在試管底部形成沉淀，上部澄清，不形成菌膜。鮮血瓊脂、血清肉湯培養(yǎng)物涂片，可見革蘭氏染色陽性，多呈長鏈狀球菌。

5.3生化試驗結(jié)果

見表1。表明生化反應(yīng)結(jié)果均符合豬鏈球菌的生化特性，說明分離的菌為豬鏈球菌。

表1　分離菌生化試驗結(jié)果

5.4藥敏試驗結(jié)果

見表2。藥敏試驗結(jié)果敏感的藥物依次是頭孢菌素、環(huán)丙沙星；中度的藥物是卡那霉素；對青霉素、土霉素、鏈霉素、慶大霉素不敏感。

表2　藥敏實驗結(jié)果（單位：cm）

6 防治

6.1治療

按藥敏試驗選擇高敏藥物進行治療。

6.1.1清除病原 環(huán)丙沙星治療豬鏈球菌病，用2.5～10.0mg/ kg，每12h注射1次，連用3d，能迅速改善癥狀，療效明顯優(yōu)于青霉素。對敗血型及關(guān)節(jié)型，應(yīng)早期大劑量使用抗生素。青霉素每頭每次40萬～100萬單位，每天肌注2～4次；肌注慶大霉素，1～2mg/kg，每日2次。肌注慶增安注射液0.1ml/kg，肌肉每日2次，也有很好的療效。為了鞏固療效，應(yīng)連續(xù)用藥5d以上。對淋巴結(jié)膿腫型，待膿腫成熟后，及時切開排出濃汁，用3%雙氧水或0.1%新潔爾滅等沖洗后，涂以碘酊，有膿腫轉(zhuǎn)移時，應(yīng)注射抗生素。

6.1.2對對的行 在治療過程中有明顯發(fā)熱癥狀的，配合使用解熱鎮(zhèn)痛藥物安普定，嚴重病例配合鏈霉素、維生素C，一同注射，2次/d，或用頭孢菌素效果更好。

6.1.3防止繼發(fā)感染 全群口服抗生素，每1t飼料加入500g土霉素，連用7d以防繼發(fā)感染。

6.2預(yù)防

6.2.1清除傳染源 病豬和帶菌豬是該病的重要傳染源。一旦發(fā)現(xiàn)病豬隔離治療，帶菌母豬盡可能淘汰，死豬全部進行深埋或焚燒，糞便做堆積發(fā)酵處理。污染的用具和環(huán)境用清水徹底沖洗，然后場地用2%的熱燒堿溶液消毒，用具用強力金碘噴灑消毒，并注意消毒，1次/d，連續(xù)7d。

6.2.2除去感染的因素 豬圈和飼槽上的尖銳物體，如釘頭、鐵片、碎玻璃、尖石頭等能引起外傷的物體，一律清除。新生仔豬斷臍、剪牙、斷尾、打耳號等要嚴格用碘酊消毒，當發(fā)生外傷時要及時按外科方法進行處理，防止傷口感染病菌，引發(fā)本病。

6.2.3免疫局種疫苗 疫區(qū)在60日齡進行第一次免疫，以后春秋各免疫一次，豬鏈球菌弱毒菌苗注射免疫。特別注意疫苗菌株的血清型是否含致病菌株的血清型或是否一致。

6.2.4加強飼養(yǎng)管理 豬鏈球菌主要通過呼吸道（扁桃體和鼻腔）、生殖道和感染，搞好豬舍內(nèi)外的環(huán)境衛(wèi)生，豬舍要保持清潔干燥，通風良好；豬群的飼養(yǎng)密度要適中，特別是仔豬的飼養(yǎng)密度不可過大；豬舍每周應(yīng)堅持用百毒殺或菌毒敵等高效消毒劑進行噴霧消毒。豬場嚴禁飼養(yǎng)貓、犬和其它動物，徹底消滅鼠類和吸血昆蟲（蚊、蠅等），控制傳遞媒介傳播病原體，可有效的防止本病的發(fā)生與流行。

7 討論與分析

7.1不斷學(xué)習新知識，提高對疾病的認識

該豬場為自繁自養(yǎng)，管理要求較高，一般基層獸醫(yī)對豬瘟等重大疫病的預(yù)防都十分重視，均按嚴格的免疫程序操作，而對豬鏈球菌病的危害認識不足，同時本次疫情由于實驗條件有限，具體分屬哪一血清型，還需進一步分離鑒定。所以應(yīng)選擇適合的血清型疫苗或做自家苗，按規(guī)定的免疫程序進行預(yù)防注射。

7.2配合實驗室診斷結(jié)果，合理用藥

因紙片擴散法受培養(yǎng)基的質(zhì)量、細菌接種量、培養(yǎng)基藥敏紙片的質(zhì)量、紙片含藥的準確性和均勻性等諸多因素的影響較大［11］，與之前做的數(shù)值有差別，但從本次藥敏試驗來看，以往首選的藥物已經(jīng)產(chǎn)生耐藥性，因此在臨床上不能亂用抗生素，還是應(yīng)該按照嚴格的免疫程序，使用疫苗來預(yù)防本病［12］。使用藥物預(yù)防時應(yīng)避免長期使用同一種藥物，可幾種藥物交替使用。

7.3提高自身抵抗力是防止疾病的關(guān)鍵

豬鏈球菌病的發(fā)生與飼養(yǎng)管理密切相關(guān)，加強消毒、提高飼養(yǎng)管理水平、改善豬場衛(wèi)生條件，合理使用營養(yǎng)豐富的全價飼料以增強抵抗力是控制該病的基本措施。

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