李 敏 袁桂平

（湖北省十堰市太和醫(yī)院，湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院，湖北 十堰 442000）

·證治探討·

內(nèi)熱針聯(lián)合臭氧穴位注射介入治療家兔膝骨關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究*

李 敏 袁桂平△

（湖北省十堰市太和醫(yī)院，湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院，湖北 十堰 442000）

目的 觀察內(nèi)熱針聯(lián)合臭氧注射“內(nèi)外膝眼、梁丘”介入治療對(duì)家兔膝骨關(guān)節(jié)炎（KOA）的影響。方法32只家兔隨機(jī)分為模型組、內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組4組，每組8只。采用弗氏完全佐劑注射家兔前右肢膝關(guān)節(jié)腔制備KOA模型；成模后內(nèi)熱針組取“內(nèi)外膝眼、梁丘、陽陵泉、鶴頂、足三里、血?！钡戎T穴內(nèi)熱針治療，臭氧組膝取 “內(nèi)外膝眼、梁丘”小劑量注射臭氧；內(nèi)熱針+臭氧組為內(nèi)熱針組和臭氧組的治療方法；用表面肌電圖儀錄股內(nèi)側(cè)?。╲M）和股外側(cè)?。╲L）肌電信號(hào)并計(jì)算vM/vL達(dá)峰值時(shí)限差值（ΔTBP），記錄家兔坐骨神經(jīng)閾刺激、最大刺激和傳導(dǎo)速度；檢測家兔關(guān)節(jié)積液中透明質(zhì)酸（HA）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）及基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）表達(dá)。結(jié)果 治療后模型組家兔坐骨神經(jīng)閾刺激、最大刺激閾值和傳導(dǎo)速度與治療前比較未見升高（P＞0.05）。內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組閾刺激與治療前比較均升高（均P＜0.05）。內(nèi)熱針組閾刺激和臭氧組比較差別不大（P＞0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組閾刺激與同組治療前比較升高（P＜0.05），且與模型組、內(nèi)熱針組和臭氧組比較升高明顯（均P＜0.05）。4組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度和最大刺激閾值與治療前比較差別不大，且治療后各組比較差別不大（均P＞0.05）。模型組vM、vL和ΔTBP與治療前比較無明顯變化（均P＞0.05）。內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組vM、vL與治療前比較均升高，而ΔTBP降低（均P＜0.05）。內(nèi)熱針組M、vL和ΔTBP與臭氧組比較差別不大 （均P＞0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組vM、vL與治療前比較升高，而ΔTBP降低（均P＜0.05），且優(yōu)于模型組、內(nèi)熱針組和臭氧組（均P＜0.05）。模型組IL-1β和HA與治療前比較無明顯變化（P＞0.05）。內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組與治療前比較，IL-1β含量均下降，HA含量均增加（均P＜0.05）。臭氧組IL-1β降低和HA升高幅度均大于內(nèi)熱針組（P＜0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組IL-1β和HA與同組治療前比較IL-1β含量下降，HA含量增加（P＜0.05），且優(yōu)于模型組、內(nèi)熱針組和臭氧組（P＜0.05）。模型組和內(nèi)熱針組家兔血清MMPs與同組治療前比較無明顯變化（均P＞0.05）。臭氧組MMP-2和MMP-10與治療前比較低表達(dá)（P＜0.05），且優(yōu)于模型組（P＜0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組MMP-2和MMP-10與治療前比較均降低（P＜0.05），且優(yōu)于模型組和內(nèi)熱針組（均P＜0.05），但與臭氧組、模型組比較差別不大（P＞0.05）。結(jié)論內(nèi)熱針刺激可祛寒除濕、降低IL-1β造成的局部炎癥反應(yīng)，并糾正患肢肌電以降低痛閾，臭氧穴位注射介入治療可抑制MMPs對(duì)關(guān)節(jié)組織細(xì)胞外基質(zhì)降解、提高HA分泌，兩者具有明顯協(xié)同治療作用。

KOA模型 家兔 內(nèi)熱針 臭氧 ΔTBP 肌電信號(hào)

膝骨性關(guān)節(jié)炎（KOA）是導(dǎo)致生活質(zhì)量下降的常見病和多發(fā)病，屬中醫(yī)學(xué)“筋痹”“骨痹”范疇［1］。KOA按病因可分為原發(fā)性和繼發(fā)性，原發(fā)性KOA的病因可能與機(jī)械性和生物性等因素的相互作用造成關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞、基質(zhì)和軟骨合成和降解失衡，骨贅形成有關(guān)。繼發(fā)性KOA則多與關(guān)節(jié)外傷、代謝病、類風(fēng)濕病等內(nèi)分泌失衡等有關(guān)［2］。兩類KOA多隨膝骨關(guān)節(jié)面滑膜毛細(xì)血管擴(kuò)張和通透性增大，最終因關(guān)節(jié)腔內(nèi)組織液大量滲出而形成關(guān)節(jié)積液［3］。本研究采取內(nèi)熱針配合臭氧注射穴位介入治療家兔KOA，研究治療KOA的鎮(zhèn)痛消炎的作用機(jī)制?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 家兔32只，體質(zhì)量1.8～2.2 kg，雌雄各半，由十堰太和醫(yī)院實(shí)驗(yàn)中心提供［SCXK（鄂）2014-0008］。

1.2 儀器與試劑 表面肌電圖儀 （美國Noraxon生產(chǎn)）；BL-420生物信號(hào)記錄系統(tǒng)（成都泰盟生產(chǎn)）。臭氧（太和醫(yī)院制劑室提供）；弗氏完全佐劑（上海實(shí)生細(xì)胞生物技術(shù)有限公司提供）；MMPs測試盒 （上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司提供）。

1.3 造模 將弗氏完全佐劑1周內(nèi)分3次注人家兔右膝關(guān)節(jié)腔，每次注射0.1 mL。注射后根據(jù)超疲勞可導(dǎo)致KOA發(fā)病的臨床特點(diǎn)，每日強(qiáng)迫動(dòng)物活動(dòng)60 min［4］。成模標(biāo)準(zhǔn):2周后家兔出現(xiàn)右膝局部軟組織紅腫、關(guān)節(jié)僵硬跛行，關(guān)節(jié)腔可抽出積液，且積液檢查出現(xiàn)HA降低和IL-1β明顯高于正常值［5］。出現(xiàn)以上體癥即可確定KOA造模成功。

1.4 治療方法 家兔隨機(jī)均分為模型組、內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組4組，每組8只。模型組動(dòng)物每日僅做消毒處理。內(nèi)熱針組，將家兔固定于家兔固定器，取“內(nèi)外膝眼、梁丘、陽陵泉、鶴頂、足三里、血海”等諸穴由內(nèi)向外斜刺2 cm，刺入骨膜后，接NRZ-16R-E型內(nèi)熱針治療儀，參數(shù):針體溫度40～60℃，留針加熱28 min，每日1次，14 d為1個(gè)療程。臭氧組于“內(nèi)外膝眼、梁丘”各注射臭氧0.1 mL，每隔日1次，注射7次為1個(gè)療程。內(nèi)熱針+臭氧組治療方法同內(nèi)熱針組和臭氧組，療程同前。

1.5 觀察指標(biāo) 從家兔耳緣靜脈取血，采用PCR法測定治療前后MMP-2、MMP-10表達(dá)［5］；治抽取各組動(dòng)物關(guān)節(jié)腔積液，HA采用放免試劑盒檢測，IL-1β采用ELISA法檢測［6］。用表面肌電圖儀錄股內(nèi)側(cè)?。╲M）和股外側(cè)?。╲L）肌電信號(hào)并計(jì)算vM/vL達(dá)峰值時(shí)限差值（ΔTBP）［7］。BL-420生物信號(hào)記錄系統(tǒng)記錄治療前后記錄家兔坐骨神經(jīng)閾刺激、最大刺激閾值和傳導(dǎo)速度。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。計(jì)量資料以（±s）表示，采用單因素方差分析對(duì)和組指標(biāo)進(jìn)行比較，組間差異采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組治療前后家兔坐骨神經(jīng)閾刺激、最大刺激閾值和傳導(dǎo)速度比較 見表1。治療后模型組家兔坐骨神經(jīng)閾刺激、最大刺激閾值和傳導(dǎo)速度與治療前比較未見升高（P＞0.05）。內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組閾刺激與治療前比較均升高（均P＜0.05）。內(nèi)熱針組閾刺激和臭氧組比較差別不大（P＞0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組閾刺激與同組治療前比較升高（P＜0.05），且與模型組、內(nèi)熱針組和臭氧組比較升高明顯（均P＜0.05）。各組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度和最大刺激閾值與治療前比較差別不大，且治療后各組比較差別不大（均P＞0.05）。

表1 各組家兔治療前后閾刺激、最大刺激閾值和傳導(dǎo)速度比較（±s）

表1 各組家兔治療前后閾刺激、最大刺激閾值和傳導(dǎo)速度比較（±s）

與本組治療前比較，*P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05；與內(nèi)熱針組比較，#P＜0.05；與臭氧組比較，▲P＜0.05。下同。

?

2.2 各組家兔治療前后vM、vL肌電信號(hào)及ΔTBP比較 見表2。治療后，模型組vM、vL和ΔTBP與治療前比較無明顯變化（均P＞0.05）。內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組vM、vL與治療前比較均升高，而ΔTBP降低（均P＜0.05）。內(nèi)熱針組M、vL和ΔTBP與臭氧組比較差別不大（均P＞0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組vM、vL與治療前比較升高，而ΔTBP降低（均P＜0.05），且優(yōu)于模型組、內(nèi)熱針組和臭氧組（均P＜0.05）。

表2 各組家兔治療前后vM、vL和ΔTBP比較（±s）

表2 各組家兔治療前后vM、vL和ΔTBP比較（±s）

組別 時(shí)間 ΔTBP模型組 治療前 7.71±0.25（n＝8） 治療后 6.79±0.12內(nèi)熱針組 治療前 7.35±0.26 vM（μV） vL（μV）215.15±21.78 152.93±7.66 210.35±23.12 147.58±9.21 213.74±25.07 150.41±9.62（n＝8） 治療后 3.71±0.24*△286.31±31.70*△175.23±11.01*△臭氧組 治療前 210.93±23.53 151.44±7.97 7.29±0.23（n＝8） 治療后 279.45±27.19*△177.50±12.21*△3.08±0.12*△內(nèi)熱針+臭氧組 治療前 215.27±26.40 153.02±8.75 7.60±0.25（n＝8） 治療后 312.71±35.68*△#▲191.76±21.52*△#▲1.96±0.10*△#▲

2.3 各組家兔治療前后HA和IL-1β水平比較 見表3。治療后，模型組IL-1β和HA與治療前比較無明顯變化（P＞0.05）。內(nèi)熱針組、臭氧組和內(nèi)熱針+臭氧組與治療前比較，IL-1β含量均下降，HA含量均增加（均P＜0.05）。臭氧組IL-1β降低和HA升高幅度均大于內(nèi)熱針組（P＜0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組IL-1β和HA與同組治療前比較IL-1β含量下降，HA含量增加 （P＜0.05），且優(yōu)于模型組、內(nèi)熱針組和臭氧組（P＜0.05）。

表3 各組家兔治療前后IL-1β和HA水平比較（±s）

表3 各組家兔治療前后IL-1β和HA水平比較（±s）

IL-1β（pg/mL） HA（μg/L）72.33±9.24 4.71±0.27 79.51±10.12 4.01±0.25 70.45±7.46 4.79±0.24（n＝8） 治療后 54.04±7.13*△6.72±0.35*△臭氧組 治療前 71.72±7.52 4.53±0.29（n＝8） 治療后 41.52±6.73*△#8.03±0.40*△#內(nèi)熱針+臭氧組 治療前 70.58±8.73 4.64±0.22（n＝8） 治療后 32.43±5.28*△#▲10.73±0.57*△#▲組別 時(shí)間模型組 治療前（n＝8） 治療后內(nèi)熱針組 治療前

2.4 各組家兔血清基質(zhì)金屬蛋白酶水平比較 見表4。模型組和內(nèi)熱針組家兔血清MMPs與同組治療前比較無明顯變化（均P＞0.05）。臭氧組MMP-2和MMP-10與治療前比較低表達(dá)（P＜0.05），且優(yōu)于模型組（P＜0.05）。內(nèi)熱針+臭氧組MMP-2和MMP-10與治療前比較均降低（P＜0.05），且優(yōu)于模型組和內(nèi)熱針組（均P＜0.05），但與臭氧組模型組比較差別不大（P＞0.05）。

表4 各組家兔血清基質(zhì)金屬蛋白酶比較（ng/L，±s）

表4 各組家兔血清基質(zhì)金屬蛋白酶比較（ng/L，±s）

MMP-1 MMP-2 90.21±7.72 85.26±9.14 92.12±8.32 87.21±9.27 89.72±8.13 86.27±7.02（n＝8） 治療后 90.23±7.24 88.93±9.35臭氧組 治療前 91.71±9.22 86.03±7.65（n＝8） 治療后 90.80±6.81 70.25±7.96*△內(nèi)熱針+臭氧組 治療前 90.22±8.53 85.55±7.81（n＝8） 治療后 89.87±9.85 67.29±7.92*△#組別 時(shí)間模型組 治療前（n＝8） 治療后內(nèi)熱針組 治療前MMP-9 MMP-10 70.22±7.24 75.02±5.93 73.72±7.21 78.38±8.04 73.17±6.99 73.95±8.30 71.70±7.65 69.26±6.14 72.19±7.11 75.48±8.04 69.05±8.25 55.70±5.32*△71.22±6.53 73.59±6.90 68.37±9.02 51.12±6.27*△#

3 討 論

KOA病理改變以IL-1β對(duì)關(guān)節(jié)腔和滑膜的炎性浸潤并伴隨軟骨細(xì)胞外MMPs的病理性降解為主，常造成關(guān)節(jié)面軟骨破壞和關(guān)節(jié)腔內(nèi)組織液大量滲出而成關(guān)節(jié)腔積液［8］。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，KOA是膝關(guān)節(jié)局部血瘀氣滯，濕濁之氣痹阻于膝而致，故治宜“除痹利濕、舒筋通絡(luò)、行氣止痛、活血化瘀”［9］。

IL-1β在正常關(guān)節(jié)腔積液僅有少量分秘，當(dāng)有KOA病理改變時(shí)，IL-1β會(huì)異常分秘。而HA可抑制KOA關(guān)節(jié)內(nèi)IL-1β等造成的炎癥反應(yīng)，潤滑關(guān)節(jié)并降低滑膜的通透性，從而減少關(guān)節(jié)內(nèi)滲液造成的成關(guān)節(jié)腔積液［10］。本實(shí)驗(yàn)內(nèi)熱針+臭氧組在對(duì)“內(nèi)外膝眼、梁丘、陽陵泉、鶴頂、足三里、血海”等諸穴進(jìn)行內(nèi)熱針后，利用內(nèi)熱針對(duì)熱的傳導(dǎo)，將熱量導(dǎo)入病變組織深部來改善組織局部微循環(huán)、促進(jìn)炎性因子的吸收，加速組織修復(fù)，故IL-1β降低［11］。而且內(nèi)熱針可降低骨骼肌張力，使緊張的肌肉松弛，同時(shí)還可提高閾刺激，提高對(duì)疼痛刺激的敏感性［12］。內(nèi)熱針+臭氧組在“內(nèi)外膝眼、梁丘”注射臭氧后，臭氧作為強(qiáng)氧化劑，可直接作用于關(guān)節(jié)鄰近韌帶和周圍組織分布的神經(jīng)末梢，臭氧的強(qiáng)氧化作用造成IL-1β等致痛炎性因子失活，減少對(duì)神經(jīng)末梢的刺激，起到“化學(xué)針灸”的止痛效果。還可通過拮抗炎癥反應(yīng)中的免疫因子釋放擴(kuò)張血管、改善靜脈回流、減輕神經(jīng)根水腫及粘連達(dá)到抗炎作用［13］。由于IL-1β等致痛炎性因子失活，機(jī)體致痛炎性因子減少，故監(jiān)測到的vM、vL等肌電話活動(dòng)均升高，ΔTBP降低。研究表明，基質(zhì)降解的主要蛋白是MMP-2和MMP-10，其增高表達(dá)與KOA發(fā)生密切相關(guān)［14］。在通過臭氧穴位注射后，筆者觀察到內(nèi)熱針+臭氧組關(guān)節(jié)積液中MMP-2和MMP-10的表達(dá)明顯降低，說明臭氧的強(qiáng)氧化作用在一定程度可以抑制MMP-2和MMP-10分泌。MMP-2和MMP-10減少可減輕其對(duì)關(guān)節(jié)組織細(xì)胞外基質(zhì)的降解［15］，不可促使滑膜內(nèi)襯B型滑膜細(xì)胞分泌HA，而HA可起到潤滑關(guān)節(jié)和保護(hù)關(guān)節(jié)作用［16］。總之，通過內(nèi)熱針和臭氧治療后，內(nèi)熱針+臭氧組vM、vL和閾刺激明顯提高，ΔTBP降低，關(guān)節(jié)液中IL-1β明顯降低、HA明顯提高，關(guān)節(jié)積液中MMP-2和MMP-10的表達(dá)明顯降低。

綜上，內(nèi)熱針治療可改善組織局部微循環(huán)、促進(jìn)炎性因子的吸收，提高機(jī)體對(duì)疼痛刺激的敏感性。臭氧的強(qiáng)氧化作用可起到抗炎止痛、抑制MMP-2和MMP-10分泌，提高HA分泌的作用。兩者相輔相成，可明顯提高治療效果，這對(duì)于臨床治療KOA有一定的指導(dǎo)意義。

［1］ 楊利，魏蓉，魏云，等.中藥外敷治療膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎臨床觀察［J］.中國中醫(yī)急癥，2016，25（1）:120-121.

［2］ 宓軼群，陳一．溫針灸配合鹽酸氨基葡萄糖治療膝骨關(guān)節(jié)炎臨床研究［J］．上海針灸雜志，2013，32（11）:938-941．

［3］ 唐瑭，陳德森，李莉，等．通痹外敷膏聯(lián)合關(guān)節(jié)腔沖洗治療膝骨性關(guān)節(jié)炎合并積液的臨床研究［J］．國際中醫(yī)中藥雜志，2014，3（11）:213-216．

［4］ 顏梅，郭俐宏.激光針刀配合穴位注射威靈仙總皂苷對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎模型大鼠RF及PGE2的影響［J］.針灸臨床雜志，2015，31（12）:71-73.

［5］ 王國金，衛(wèi)小春，張志強(qiáng)，等．血清和關(guān)節(jié)液中基質(zhì)金屬蛋白酶-3及其抑制因子-的檢測及臨床意義［J］．中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2006，10（5）:311-315．

［6］ 鐘琴，劉正奇，安陽，等．苗藥痛風(fēng)停湯對(duì)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型日本大耳白兔血清IL-8的影響［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2014，21（1）:16-18.

［7］ 薛靜，薛燕萍，梁英，等.髕股疼痛綜合征患者神經(jīng)肌電活動(dòng)比率與Merchant匹配角的相關(guān)性［J］．中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30（3）:265-268.

［8］ 李特，李運(yùn)曼，劉麗芳，等.威靈仙總皂苷抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制［J］.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，40（2）:157-160.

［9］ 陳才興，孫成長.中藥內(nèi)外兼治合透明質(zhì)酸鈉治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎［J］.浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2006，16（7）:427-428.

［10］李敏，丁武華，李莉，等.電針后外敷威靈仙浸膏治療日本大耳白兔實(shí)驗(yàn)性膝骨關(guān)節(jié)炎的研究［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，24（13）:1394-1396.

［11］吳群，沈玉杰，周曉霞，等.內(nèi)熱針聯(lián)合氨基葡萄糖膠囊對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎外周血中IL-1、IL-6表達(dá)的影響研究［J］．湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，12（6）:33-35.

［12］溫莎，高謙，王剛，等.0．5 mm針徑內(nèi)熱針密集針刺對(duì)家兔骨骼肌慢性損傷后肌張力的影響［J］．中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30（1）:31-34.

［13］張艷，陳鋒，吳松，等.臭氧穴位注射治療下腰痛臨床觀察［J］．中國針灸，2007，27（2）:115-116.

［14］麻圣達(dá)，盧雄，羅利飛，等．玻璃酸鈉對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎患者關(guān)節(jié)液中基質(zhì)金屬蛋白酶-3、-9水平的影響及療效觀察［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2014，52（1）:42-44.

［15］劉敏娟，穆敬平，王魁，等.熱敏灸配合功能訓(xùn)練治療膝骨關(guān)節(jié)炎療效觀察［J］．上海針灸雜志，2013，12（9）:750-752.

［16］馮艷琴，姚忠紅，秦雪琴，等.穴位注射骨瓜提取物注射液聯(lián)合電針夾脊穴對(duì)兔骨質(zhì)疏松性椎體壓縮骨折二聚糖的影響［J］.中國中醫(yī)急癥，2015，24（l1）:1911-1914.

Experimental Study on the Treatment of Rabbit Knee Osteoarthritis with Acupoint Injection of Ozoneand Heat-type Acupuncture Needles

LI Min，YUAN Guiping.Department of Pain Management，Taihe Hospital，Hubei，Shiyan 442000，China.

Objective:To observe the curative effect of the heat-type acupuncture needles combined with ozone injection on Inner and Outer Xiyan acupoints and Liangqiu acupoint in treating the rabbit knee osteoarthritis（KOA）.Methods:32 rabbits were randomly divided into model group，acupuncture group and ozone group and acupuncture plus ozone group，8 rabbits in each group.Freund′s complete adjuvant was injected into the front right limb knee joint cavity of the rabbits to establish KOA models.In the acupuncture group，we used the heattype acupuncture needles on the following acupoints:Inner and Outer Xiyan，Liangqiu，Yanglingquan，Heding，Zusanli，Xuehai，etc.In the ozone group，we injected small dose of ozone on Inner and Outer Xiyan acupoints and Liangqiu acupoint.In the acupuncture plus ozone group，we used the two therapies together.We recorded theEMG signals of the vastus medialis（vM）and the vastus lateralis（vL）using the surface electromyography（sEMG）system and calculated the vM/vL peak time difference（ΔTBP）.Moreover，we recorded the rabbit sciatic nerve threshold stimulation，maximum threshold of sciatic nerve stimulation and sciatic nerve conduction velocity，detected the hyaluronic acid of rabbit articular effusion（hyaluronic acid HA），interleukin-1 beta（interleukin-1 beta，beta IL-1）and joint cartilage expression of matrix metalloproteinases（matrixmetalloproteinases，MMPs）.Results:After the treatment，the rabbit sciatic nerve threshold stimulation，maximum threshold of sciatic nerve stimulation and sciatic nerve conduction velocity in the model group did not increase（P＞0.05）.The sciatic nerve threshold stimulation in the acupuncture group，ozone group and acupuncture plus ozone group increased after the treatment（all P＜0.05）.There was little difference on the sciatic nerve threshold stimulation between the acupuncture group and the ozone group（P＞0.05）.The sciatic nerve threshold stimulation in the acupuncture plus ozone group increased after the treatment compared with the same group before the treatment（P＜0.05）and increased significantly than that of the model group，the acupuncture group and the ozone group（all P＜0.05）.The maximum threshold of sciatic nerve stimulation in all the groups did not change a lot after the treatment and there was little difference on the value among the four groups（all P＞0.05）.The vM，vL and ΔTBP in the model group did not change a lot after the treatment（all P＞0.05）.The vM and vL increased but ΔTBP decreased（all P＜0.05）in the acupuncture group，ozone group and acupuncture plus ozone group after the treatment.There was little difference on the vM，vL and ΔTBP between the acupuncture group and the ozone group（all P＞0.05）.The vM and vL increased but ΔTBP decreased（all P＜0.05）in the acupuncture plus ozone group after the treatment whose result was better than that of the model group，the acupuncture group and the ozone group（all P＜0.05）. The content of IL-1β and HA in synovial fluid in the model group did not change much after the treatment（P＞0.05）.The content of IL-1β in synovial fluid decreased and the content of HA increased（all P＜0.05）in the acupuncture group，ozone group and acupuncture plus ozone group after the treatment.The decreased extent of IL-1β and increased extent of HA in the ozone group was higher than that of the acupuncture group（P＜0.05）. The content of IL-1β in synovial fluid decreased and the content of HA increased（P＜0.05）in the acupuncture plus ozone group after the treatment whose result was better than that of the model group，the acupuncture group and the ozone group（P＜0.05）.The expression of MMPs in the model group and the acupuncture group did not change much after the treatment（all P＞0.05）.The expression of MMP-2 and MMP-10 in the ozone group was lower after the treatment（P＜0.05）and was better than that of the model group（P＜0.05）.The expression of MMP-2 and MMP-10 in the acupuncture plus ozone group was lower after the treatment（P＜0.05）whose result was better than that of the model group and the acupuncture group（all P＜0.05），but was almost the same with that of the ozone group（P＞0.05）.Conclusion:The heat-type acupuncture needles stimulation helps with dispelling coldness and dehumidification，reducing local inflammation response caused by IL-1β，correcting limb EMG to reduce the pain threshold.The ozone acupoint injection treatment can inhibit the expression of MMPs to help with the degradation of joint tissue extracellular matrix and improving the secretion of HA.These two ways have obvious synergistic effects.

KOA model；Rabbit；Heat-type acupuncture needles；Ozone；ΔTBP；EMG signal

R246

A

1004-745X（2016）10-1866-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2016.10.010

湖北省科技廳項(xiàng)目（2013cfc037）

△（電子郵箱：limingllmmmm@163.com）

（2016-06-24）