王瑾，王光磊，陳耀金，林雄，王宮

（1．福建省中醫(yī)藥研究院，福建福州350003；2．福建大醫(yī)本草醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司，福建福州350003）

牛樟芝腸溶片的最佳處方篩選

王瑾1，王光磊1，陳耀金1，林雄2，王宮1

（1．福建省中醫(yī)藥研究院，福建福州350003；2．福建大醫(yī)本草醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司，福建福州350003）

目的篩選牛樟芝腸溶片的最佳處方。方法用Box-Behnken法設(shè)計試驗，考察影響牛樟芝腸溶片片芯質(zhì)量的MCC、L-HPC、糊精和乳糖的用量。結(jié)果Box-Behnken擬合方程得到的最佳處方為：牛樟芝浸膏50%、硬脂酸鎂1%、MCC 25%、L-HPC 6%、糊精18%。結(jié)論根據(jù)最佳處方制得的牛樟芝腸溶片片芯硬度較好，表面光潔，崩解時限符合藥典規(guī)定。

牛樟芝腸溶片；Box-Behnken法；最佳處方

牛樟芝Antrodia camphorata是原產(chǎn)于我國臺灣省的珍稀藥用菌，性寒，味辛、苦、微甘，歸肝、膽、肺經(jīng)［1］?，F(xiàn)代研究表明，牛樟芝含有多糖、三萜、超氧化物歧化酶、腺苷、免疫蛋白、維生素、固醇類、木質(zhì)素、不飽和長鏈脂肪酸、麥角甾醇、微量元素鍺、凝集素、氨基酸、薄孔菌酸等多種生理活性物質(zhì)［2-4］，具有廣泛的生理活性和臨床應用價值，在多種癌癥的治療上具有顯著功效。目前，已有多種不同劑型的牛樟芝產(chǎn)品問世。由于牛樟芝性寒，對胃有一定刺激性，不適合胃寒者長期服用，限制了其臨床應用。我們研制牛樟芝腸溶片，使其避免對胃部的刺激，以提高患者的依從性。

1　材料

1.1儀器CJY-2C型片劑脆碎硬度測定儀（上海市黃海藥檢儀器有限公司）；ZB-1C智能崩解儀（上海市安亭電子儀器廠）；LGJ-30FD型真空冷凍干燥機（北京市松源華興科技發(fā)展有限公司）。

1.2試藥固態(tài)培養(yǎng)牛樟芝（臺灣省亞新生物科技股份有限公司，批號：20150603）；維晶纖維素（Microcrystalline cellulose，MCC）（日本旭化成公司）；低取代羥丙纖維素（Low-Substituted Hydroxypropyl Cellulose，L-HPC）（日本旭化成公司）；糊精、乳糖、硬脂酸鎂、無水乙醇（國藥集團化學試劑有限公司）。

2　方法

2.1牛樟芝浸膏的制備固態(tài)培養(yǎng)牛樟芝，無水乙醇回流提取2 h，提取液回收溶劑，經(jīng)冷凍干燥制得醇提干浸膏。殘渣再次用水提取2 h，提取液濃縮，經(jīng)冷凍干燥制得水提干浸膏。將2部分干浸膏合并打粉混勻制得牛樟芝干浸膏。

2.2制粒壓片按Box-Behnken實驗設(shè)計的比例混合浸膏及各種輔料，混勻后濕法制粒，壓片，每片直徑11 mm，每片質(zhì)量0.5 g。

2.3片芯硬度及崩解時間測定采用CJY-2C型片劑脆碎硬度測定儀測定片芯硬度，崩解時間按照2015年版中國藥典附錄崩解時限檢查法項下進行。

2.4單因素考察

2.4.1填充劑固定片芯中的其它輔料的種類及用量，分別用MCC、糊精、淀粉和乳糖作為填充劑，制粒壓片，測定所壓片芯硬度。結(jié)果表明，片芯以MCC為填充劑時硬度最大，而以淀粉為填充劑時硬度最小。考慮到腸溶衣片片芯對硬度的要求及制劑成本，選擇MCC、糊精或乳糖混合作為片芯的填充劑。

2.4.2崩解劑《中國藥典》一部中規(guī)定中藥浸膏片的崩解時限不超過60 min。在固定片芯中的其它輔料種類及用量后，考察了L-HPC、CMC-Na及CMSNa在相同用量下的片芯崩解時間，均符合藥典規(guī)定?？紤]到腸溶衣片要在小腸中崩解釋放，選擇在胃液和腸液中膨潤度幾乎相同的L-HPC作為崩解劑。

2.4.3潤滑劑固定片芯中的其它輔料種類及用量，分別以硬脂酸鎂、滑石粉和微粉硅膠作潤滑劑，考察壓片過程及片芯外觀，實驗表明壓片過程均無粘沖現(xiàn)象，以硬脂酸鎂和微粉硅膠作潤滑劑的片面較為光潔美觀，外觀差別不大，故選擇硬脂酸鎂作為潤滑劑。

2.5Box-Behnken實驗設(shè)計根據(jù)單因素考察的結(jié)果，在固定牛樟芝浸膏含量50%、硬脂酸鎂添加量1%的情況下，采用Box-Behnken實驗設(shè)計考察MCC、糊精、乳糖、L-HPC的用量，因素水平表見表1。

由于腸溶衣片對片芯的硬度要求較高，在考察確認實驗中不同處方所壓片芯的崩解時限均符合藥典規(guī)定后，選擇片芯硬度作為實驗的檢測指標，用Design Expert對試驗結(jié)果進行分析。

表1　因素水平表

3　結(jié)果與討論

實驗結(jié)果及方差分析，見表2、3。響應面方程圖形，見圖1～圖3。

表2　實驗結(jié)果

表3　方差分析表

Box-Behnken擬合的二次多項式回歸方程為：

y＝44.56+7.51A+1.39B+8.54C－1.91AB+ 4.32AC+0.88BC－3.08A2+0.72B2+2.70C2 r＝0.9827

從實驗結(jié)果的方差分析中可知，模型項P＜ 0.01，說明y與回歸方程的關(guān)系是極顯著的；Lack of Fit失擬項P＞0.05，說明所得方程與實際擬合中非正常誤差所占比例很小，此回歸方程極顯著地表示了y與A、B、C因素的關(guān)系。此外，A、C因素的P＜0.01，B因素的P＞0.05，說明因素A、C對實驗結(jié)果的影響極顯著，而因素B對實驗結(jié)果的影響較不顯著，因素A、B、C對實驗結(jié)果y值的影響大小為A＞C＞B，通過響應面方程圖形可直觀地看出這一結(jié)論。通過回歸方程擬合的最佳處方為MCC 25%，LHPC 6%，糊精18%，此處方預測硬度為65.63 N。根據(jù)此處方進行3次驗證實驗，3次實測片芯硬度分別為67.89 N、66.78 N、63.95 N，非常接近預測值，3次驗證實驗所測崩解時間分別為35、32、26 min，符合藥典規(guī)定，且片芯外觀光潔，無粘沖現(xiàn)象，說明該處方合理可行。

4　結(jié)論

根據(jù)Box-Behnken法優(yōu)選的牛樟芝腸溶片片芯處方為：牛樟芝浸膏50%，MCC25%，L-HPC 6%，糊精18%，硬脂酸鎂1%。

［1］蘇志誠，阮時寶.臺灣牛樟芝的性味、歸經(jīng)與功效的探討［J］.中醫(yī)臨床研究，2013，5（20）：26-27.

［2］蔡為明，金群力，蔡青松，等.牛樟芝人工培養(yǎng)及活性成分與藥理作用的研究進展［J］.食藥用菌，2015，23（1）：17-23.

［3］馮路瑤，程顯好，李寅，等.培養(yǎng)皿培養(yǎng)對牛樟芝生長特性及其總?cè)坪康挠绊懀跩］.中國食用菌，2015，34（4）：31-35.

［4］程利娟，郭琪。雷虹，等.高效液相色譜法測定牛樟芝中腺苷的含量［J］.解放軍醫(yī)藥雜志，2014，26（5）：76-78，85.

R284.2

B

1000-338X（2016）05-0026-03

2016-07-25

福建省科技廳省屬公益類科研院所基本科研專項（2014R 1035-3）

王瑾（1979—），女，碩士，助理研究員，主要從事中藥保健品的研究。

通迅作者：王宮（1962—），男，副研究員。E-mail：1056563129@qq. com