趙滿達(dá) 何孟蓮 蘇麗娟 安伯玉

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東 濰坊 261061；2.昌邑市畜牧獸醫(yī)管理局，山東 濰坊 261300；3.諸城市畜牧局，山東 濰坊 262200）

烏骨雞轉(zhuǎn)移因子消除IBD疫苗引起的免疫抑制的研究

趙滿達(dá)1何孟蓮1蘇麗娟2安伯玉3

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東 濰坊 261061；2.昌邑市畜牧獸醫(yī)管理局，山東 濰坊 261300；3.諸城市畜牧局，山東 濰坊 262200）

本研究利用烏骨雞TF進(jìn)行消除IBD疫苗造成的免疫抑制，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分新城抗體檢測組和禽流感抗體檢測組，每組又分為空白對(duì)照組、烏骨雞TF實(shí)驗(yàn)組（TF）、烏骨雞TF與IBD疫苗結(jié)合組和IBD疫苗組，每組50羽，分別隔離飼養(yǎng)。TF+IBD疫苗組和IBD疫苗組雛雞7日齡免疫IBD疫苗。TF組和TF+IBD疫苗組13日齡飲水投服烏骨雞TF。14日齡新城疫抗體檢測組全部免疫新城疫疫苗（Lasota），禽流感抗體檢測組免疫禽流感疫苗（H9）。同時(shí)，14、21、28日齡檢測新城疫和禽流感（H9）HI抗體。29日齡新城疫攻毒試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)，計(jì)算72h內(nèi)死亡率。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SAS軟件分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該IBD疫苗可引起肉仔雞的明顯的免疫抑制；烏骨雞TF有顯著提高ND-HI和AI-HI作用，同時(shí)，可以徹底消除IBD疫苗造成的免疫抑制。

烏骨雞轉(zhuǎn)移因子 免疫抑制 IBD疫苗 抗體檢測

自1949年以來，學(xué)術(shù)界大量研究討論轉(zhuǎn)移因子的免疫調(diào)節(jié)功能，認(rèn)為TF可以調(diào)節(jié)T細(xì)胞的免疫活性，并促進(jìn)免疫器官的發(fā)育［1-2］。轉(zhuǎn)移因子（TF）是存在于人和動(dòng)物白細(xì)胞中的可透析小分子物質(zhì)，TF屬寡肽和寡核苷酸的復(fù)合物，含多種氨基酸，分子量小，無熱原，無抗原性，無毒副作用和無種屬差異，是一種新型而又安全的免疫調(diào)節(jié)劑。

TF作用迅速，受體受TF作用后的4～24h便可獲得相應(yīng)的細(xì)胞免疫功能。這種獲得的細(xì)胞免疫功能可維持?jǐn)?shù)月或數(shù)年之久。TF能提高受體的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，表現(xiàn)為E玫瑰花環(huán)形成率顯著提高，白細(xì)胞吞噬能力增強(qiáng)和游走活性提高，外周血液T淋巴細(xì)胞比值（TC）升高以及受體的抗體水平增高等。研究證明，TF并不存在種屬差異，并不同動(dòng)物來源的TF對(duì)肉仔雞免疫活性不同，其中烏骨雞來源的TF免疫活性最強(qiáng)［3-6］。通過對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)，烏骨雞TF對(duì)肉仔雞免疫活性最強(qiáng)［7］。

傳染性法氏囊?。↖BD）是一種危害雛雞的急性、高度接觸性、病毒性傳染病。淋巴細(xì)胞，尤其是B淋巴細(xì)胞是主要的靶細(xì)胞，法氏囊是受影響最大的組織。雛雞早期感染本病，會(huì)引起嚴(yán)重的、長期的免疫抑制。因免疫抑制而臨床容易出現(xiàn)繼發(fā)感染其他?。?］。

很多研究已經(jīng)證明傳染性法氏囊炎中等毒力疫苗可造成法氏囊的損傷，進(jìn)而引起免疫抑制。所以用免疫調(diào)節(jié)劑來防治傳染性法氏囊炎中等毒力疫苗造成免疫抑制的實(shí)驗(yàn)具有科學(xué)性，可以證明免疫調(diào)節(jié)劑的免疫調(diào)節(jié)作用。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

烏骨雞TF（自備），雞傳染性法氏囊炎中等毒力活疫苗（B87），新城疫弱毒活疫苗（Lasota株），禽流感滅活疫苗（H9亞型，LG1株），新城疫病毒（本實(shí)驗(yàn)室臨床分離并鑒定），新城疫標(biāo)準(zhǔn)抗原，禽流感H9標(biāo)準(zhǔn)抗原，1%雞紅細(xì)胞，雞胚，超凈工作臺(tái)，離心機(jī)，顯微鏡，微量加樣器，96孔微量細(xì)胞培養(yǎng)板，CO2培養(yǎng)箱，Star Fax-2600酶標(biāo)儀；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：非免疫雞共400羽，分別隔離飼養(yǎng)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組

非免疫雞共400羽。分新城抗體檢測組和禽流感抗體檢測組，每組又分為空白對(duì)照組、烏骨雞轉(zhuǎn)移因子（TF）實(shí)驗(yàn)組、烏骨雞轉(zhuǎn)移因子與IBD疫苗結(jié)合組（TF+IBD疫苗）和IBD疫苗組，每組50羽，分別隔離飼養(yǎng)。

1.2.2 烏骨雞TF消除IBD疫苗引起的免疫抑制實(shí)驗(yàn)

TF+IBD疫苗組和IBD疫苗組雛雞7日齡免疫IBD疫苗。TF組和TF+IBD疫苗組13日齡1000單位/100kg比例飲水添加TF。14日齡新城疫抗體檢測組全部免疫新城疫疫苗，禽流感抗體檢測組免疫禽流感疫苗（H9）。同時(shí)14、21、28日齡采血，分離血清，檢測新城疫和禽流感（H9）HI抗體。

1.2.3 新城疫攻毒實(shí)驗(yàn)

29日齡新城疫攻毒試驗(yàn)（尿囊液1∶100稀釋，胸肌注射0.5 ml/只），計(jì)算72h內(nèi)死亡率。

1.3 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SAS軟件方差分析處理。

表1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

2 結(jié)果與分析

空白對(duì)照組與其他實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)方差分析，進(jìn)行比較結(jié)果，烏骨雞轉(zhuǎn)移因組與空白對(duì)照組比較ND-HI 21日齡和28日齡均存在有極顯著差異（P<0.01），實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，烏骨雞轉(zhuǎn)移因子可顯著提高新城疫疫苗的免疫效價(jià)；烏骨雞轉(zhuǎn)移因組與空白對(duì)照組比較

AI-HI 21日齡時(shí)有顯著差異（P<0.05），28日齡時(shí)有極顯著差異（P<0.01），實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，烏骨雞轉(zhuǎn)移因子可顯著提高禽流感（H9）疫苗的免疫效價(jià)。IBD疫苗組與空白對(duì)照組比較ND-HI和AI-HI于21日齡、28日齡時(shí)均極顯著差異（P<0.01），實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，IBD中等毒力疫苗可顯著降低肉仔雞新城疫和禽流感（H9）疫苗免疫效價(jià)。TF+IBD疫苗組與空白對(duì)照組比較ND-HI和AI-HI于21日齡、28日齡時(shí)均無顯著差異（P>0.05），TF+IBD疫苗組與IBD疫苗組比較，21日齡、28日齡時(shí)均有極顯著差異（P<0.01），這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，烏骨雞轉(zhuǎn)移因子可有效消除IBD中等毒力疫苗造成的免疫抑制；

3 討論

烏骨雞轉(zhuǎn)移因子與新城疫疫苗和禽流感（H9）疫苗結(jié)合使用可顯著的提高免疫效價(jià)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析得出，烏骨雞轉(zhuǎn)移因子飲水免疫時(shí)結(jié)合疫苗使用可明顯提高免疫效價(jià)，是一種較為良好的免疫調(diào)節(jié)劑；傳染性法氏囊炎中等毒力疫苗對(duì)新城疫疫苗和禽流感（H9）疫苗免疫效價(jià)的影響實(shí)驗(yàn)表明，傳染性法氏囊中等毒力疫苗可導(dǎo)致肉仔雞顯著的免疫抑制；烏骨雞轉(zhuǎn)移因子結(jié)合傳染性法氏囊炎中等毒力疫苗對(duì)新城疫疫苗和禽流感（H9）疫苗免疫效價(jià)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，烏骨雞轉(zhuǎn)移因子可有效消除傳染性法氏囊炎中等毒力疫苗造成的免疫抑制，所以烏骨雞轉(zhuǎn)移因子可以作為免疫調(diào)節(jié)劑有效防治雞免疫抑制性疾病。

轉(zhuǎn)移因子可以促進(jìn)輔助T淋巴細(xì)胞的分化、分裂和激活來提高細(xì)胞免疫效價(jià)，同時(shí)也間接的提高體液免疫的效價(jià)，從而達(dá)到HI抗體效價(jià)提高、消除傳染性法氏囊炎疫苗造成的免疫抑制和新城疫攻毒試驗(yàn)保護(hù)率提高的效果。

2005 濰坊市重點(diǎn)資助項(xiàng)目（2005VFZDZZ0012）

趙滿達(dá)（1975-），男，內(nèi)蒙古科爾沁左翼中旗人，副教授，農(nóng)學(xué)碩士，主要從事動(dòng)物免疫病理學(xué)研究。