周秀萍，楊長順

（湖南醫(yī)藥學(xué)院，湖南懷化418000）

3675份痰標(biāo)本中病原菌的分布及藥敏結(jié)果分析

周秀萍1，楊長順2

（湖南醫(yī)藥學(xué)院，湖南懷化418000）

目的分析痰標(biāo)本中病原菌的分布及其藥敏結(jié)果，為臨床合理抗菌治療提供科學(xué)依據(jù)。方法按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行病原菌分離培養(yǎng)，采用珠海迪爾全自動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)進(jìn)行菌株的鑒定及藥物敏感實(shí)驗(yàn)。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢測(cè)采用頭孢西丁紙片法。結(jié)果3675份痰標(biāo)本中共檢出1397株常見病原菌，檢出率為38.0%。革蘭陰性桿菌檢出率為63.1%，其中肺炎克雷伯菌20.4%、鮑曼不動(dòng)桿菌18.2%，大腸埃希菌14.3%，銅綠假單胞菌10.2%。革蘭陽性球菌檢出率為28.8%，其中肺炎鏈球菌檢出率為18.8%，金黃色葡萄球菌檢出率為10.0%。真菌檢出率為8.2%。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢出率為33.1%，產(chǎn)超廣譜β－內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌的檢出率分別為57.5%和33.3%，檢出細(xì)菌大多具有高耐藥及多重耐藥性。結(jié)論下呼吸道感染病原菌中革蘭陰性桿菌感染率較高，分離細(xì)菌大多具有高耐藥性和多重耐藥性。

痰標(biāo)本；病原菌；分布；耐藥性

呼吸道感染為臨床最常見的感染性疾病之一，可由細(xì)菌、病毒、真菌、支原體等多種病原體引起，據(jù)統(tǒng)計(jì)在發(fā)達(dá)國家以病毒感染為主，而在發(fā)展中國家則以細(xì)菌感染為主［1］。痰標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查對(duì)于呼吸道疾病的診斷及治療具有重要指導(dǎo)意義。近年來由于抗菌藥物的大量使用，使得臨床痰標(biāo)本檢出菌譜發(fā)生改變，檢出菌耐藥率不斷增加，有些菌株表現(xiàn)為多重耐藥，這已成為臨床抗感染治療最關(guān)注的問題。為指導(dǎo)臨床合理用藥，筆者對(duì)懷化市第一人民醫(yī)院2015年1月－2015年12月送檢3675份痰標(biāo)本中分離的1397株主要病原菌及其藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源及采集方法所有痰標(biāo)本均來自我院2015年1月-2015年12月的住院和門診患者。標(biāo)本采集方法：患者清晨清水漱口三次后用力咳痰或用吸痰管吸痰至無菌痰盒內(nèi)，及時(shí)送檢。微生物室用胰酶對(duì)痰標(biāo)本進(jìn)行消化并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查，：白細(xì)胞數(shù)＞25/HP，鱗狀上皮細(xì)胞數(shù)＜10/LP為合格標(biāo)本。

1.2 儀器及試劑血瓊脂平板、中國蘭平板及含萬古霉素的巧克力平板來自廣州迪景生物有限公司，細(xì)菌鑒定及藥敏系統(tǒng)來自珠海迪爾生物有限公司，頭孢西丁紙片購于英國Oxoid公司。

1.3 質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923購自中國菌種保存中心。

1.4 方法細(xì)菌培養(yǎng)：按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［2］進(jìn)行標(biāo)本分離培養(yǎng)。送檢合格的痰標(biāo)本分別接種于血瓊脂平板、中國蘭平板及含萬古霉素的巧克力平板。細(xì)菌鑒定：挑選可疑菌落進(jìn)行革蘭染色，氧化酶和觸酶等實(shí)驗(yàn)對(duì)分離細(xì)菌進(jìn)行初步鑒定，然后選擇相應(yīng)的鑒定和藥敏卡進(jìn)行菌種的鑒定及藥物敏感試驗(yàn)。按照CLSI［3］提供的ESBLs表型篩選及確認(rèn)方法檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs），耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢測(cè)采用頭孢西丁紙片法。同一病人連續(xù)送檢，如檢出同一株細(xì)菌，按一株計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 分離常見病原菌構(gòu)成比3675份痰標(biāo)本中共分離出常見病原菌1397株，分離率達(dá)38.0%。見表1。

表1 痰標(biāo)本分離常見病原菌的構(gòu)成比

2.2 大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌耐藥率見表2。

2.3 鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌耐藥率見表3。

2.4 肺炎鏈球菌和金黃色葡萄球菌耐藥率見表4。金黃色葡萄球菌經(jīng)頭孢西丁紙片法確定耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢出率為33.1%（46/139）。

3 討論

本院送檢痰標(biāo)本中檢出的病原菌以革蘭陰性桿菌為主，檢出率高達(dá)63.1%，其中肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌，大腸埃希菌及銅綠假單胞菌為4種最主要的革蘭陰性檢出菌，與以往的報(bào)道基本一致［4-6］。分離到的革蘭陰性桿菌大多都具有高耐藥性和多重耐藥性，大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs率為57.5%，肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs率33.3%，低于有關(guān)報(bào)道［7］，由于ESBLs能破壞β-內(nèi)酰胺酶抗菌藥物，可明顯降低頭孢菌素的活性，導(dǎo)致產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)青霉素類、第一代頭孢、第二代頭孢、第三代頭孢菌素和氨曲南均耐藥。表2結(jié)果顯示大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林、復(fù)方新諾明、頭孢呋辛、頭孢曲酸和頭孢唑啉的耐藥率均超過50%。本結(jié)果顯示亞胺培南和美洛培南的抗菌活性好，耐藥率非常低。阿米卡星和派拉西林/他唑巴坦對(duì)本院分離的這兩種細(xì)菌也具有較好的抗菌活性。表3結(jié)果顯示鮑曼不動(dòng)桿菌呈現(xiàn)多重耐藥趨勢(shì)，僅表現(xiàn)出對(duì)多粘菌素和復(fù)方新諾明有較好的敏感性，對(duì)其他抗菌藥物均顯示高耐藥性。銅綠假單胞菌對(duì)常見抗菌藥物敏感性較好，尚未出現(xiàn)對(duì)多種抗生素耐藥的趨勢(shì)。

表2 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥率（%）

表3 鮑曼不動(dòng)桿菌和銅綠假單胞菌耐藥率（%）

表4 肺炎鏈球菌和金黃色葡萄球菌耐藥率（%）

檢出的革蘭陽性球菌以肺炎鏈球菌和金黃色葡萄球菌為主。表4結(jié)果顯示98.5%肺炎鏈球菌都耐青霉素G，但對(duì)利福平和左氧氟沙星敏感性較好，尚未發(fā)現(xiàn)耐利奈唑胺及萬古霉素的菌株。金黃色葡萄球菌對(duì)利福平和氯霉素敏感性較好，尚未發(fā)現(xiàn)耐利奈唑胺和萬古霉素的菌株。經(jīng)頭孢西丁紙片法確定耐甲氧西林金黃色葡萄球菌檢出率為33.1%，萬古霉素對(duì)MRSA有較好的抗菌活性，但國外已報(bào)道檢出耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌，故臨床科室應(yīng)引起重視。

由于各地用藥習(xí)慣的不同，細(xì)菌在不同抗菌藥物選擇性壓力下生存狀況不一致，從而導(dǎo)致引起呼吸道感染的病原菌存在明顯的地區(qū)差異［8-10］，并在不斷變化。由于臨床上不規(guī)范及不合理的濫用抗菌藥物，造成細(xì)菌的耐藥現(xiàn)象越來越嚴(yán)重，多重耐藥菌株不斷增加，給臨床治療帶來了極大的困難。因此需要對(duì)本地區(qū)呼吸道感染的病原學(xué)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，了解本地區(qū)病原菌分布及耐藥情況，為臨床醫(yī)生合理選用抗菌藥物，減少細(xì)菌耐藥性提供科學(xué)依據(jù)。

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R446.5，Q939.92

A

1674-1129（2016）05-0623-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.028

2016-05-19；

2016-06-20）