張 麗，丁耀東，萬雅妮，王麗赟，王 田，陳娟娟，譚立明，黃會金

（1、九江市婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西九江332000；2、南昌大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院2011級，江西南昌330006；3、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌330006）

156例自身免疫性疾病患者補(bǔ)體C1q檢測結(jié)果分析及臨床意義

張 麗，丁耀東2，萬雅妮2，王麗赟2，王 田2，陳娟娟3，譚立明3，黃會金1

（1、九江市婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西九江332000；2、南昌大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院2011級，江西南昌330006；3、南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌330006）

目的探討補(bǔ)體C1q檢測對自身免疫性疾?。ˋID）的診斷及臨床價(jià)值。方法對南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院2014年5月至2015年8月符合納入標(biāo)準(zhǔn)的156例AID患者及40例健康體檢者作為研究對象，采用透射比濁法檢測其補(bǔ)體C1q、核酸熒光染色技術(shù)（DIFF通道）和激光流式分析技術(shù)（WBC/BASO通道）雙方法檢測白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、免疫比濁法檢測C反應(yīng)蛋白（CRP）及改良魏氏法檢測血沉（ESR），并對結(jié)果進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果與健康對照組相比，補(bǔ)體C1q在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）組平均水平下降［（171.58±37.22 vs 192.08±27.85）mg/L，P＜0.05］，補(bǔ)體C1q在其他AID升高，其中類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）與對照組相比［（230.17±65.29 vs 192.08±27.85）mg/L，P＜0.05］；WBC水平在AID中有所升高，但敏感性不強(qiáng)；CRP、ESR在AID中均明顯升高（P＜0.05），補(bǔ)體C1q、CRP和ESR之間的相關(guān)系數(shù)均大于0.3（P＜0.01），呈中度相關(guān)；自身免疫性甲狀腺疾病（AITD）、SLE、RA、其他結(jié)締組織疾病患者補(bǔ)體C1q不在正常范圍內(nèi)的總陽性率分別為44.23%、60.00%、73.33%、51.72%，其低值陽性率分別為9.62%、53.33%、16.67%、13.79%，其高值陽性率分別為34.62%、6.67%、56.67%、37.93%。結(jié)論補(bǔ)體C1q水平的變化及CRP、ESR的升高對AID患者的臨床診斷具有一定的指導(dǎo)意義，補(bǔ)體C1q、CRP及ESR之間存在一定的相關(guān)性，提示補(bǔ)體C1q是一個炎癥反應(yīng)指標(biāo)，聯(lián)合檢測對臨床的診斷具有一定的指導(dǎo)作用。

補(bǔ)體C1q；自身免疫性疾?。幌到y(tǒng)性紅斑狼瘡

自身免疫性疾?。ˋutoimmune Diseases，AID）是機(jī)體自身免疫耐受遭受破壞引發(fā)自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致自身組織或器官發(fā)生器質(zhì)性損傷和（或）功能障礙的一類疾病。它可累及任何器官，因作用組織器官不同，可分為細(xì)胞免疫介導(dǎo)性（器官特異性）如自身免疫性甲狀腺疾?。ˋutoimmune Thyroid Diseases，AITD），和體液免疫介導(dǎo)性（非器官特異性或全身性）如SLE、RA、PM/DM等AID，其發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，其中補(bǔ)體缺陷或功能異常是AID的誘發(fā)病因之一［1］；補(bǔ)體C1q作為起始分子在補(bǔ)體系統(tǒng)的經(jīng)典途徑中起到不可或缺的作用［2］，此外其作為SLE的一個誘導(dǎo)因子，對SLE的發(fā)生發(fā)展有著極大的關(guān)聯(lián)［3，4］。筆者就測定補(bǔ)體C1q等項(xiàng)目對AID的關(guān)系予以探討，以指導(dǎo)臨床。

1 資料與方法

1.1 研究對象標(biāo)本來源于南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院2014年5月至2015年8月間156例住院患者，其中AITD 52例，男性6例，女性46例，年齡16～72歲，平均（40.31±14.21）歲；SLE 45例，男性3例，女性42例，年齡18～67歲，平均（41.28±14.03）歲；RA 30例，男性9例，女性23例，年齡27～76歲，平均（45.67±9.56）歲；29例其他結(jié)締組織病患者，男性8例，女性20例，年齡2～74歲，平均（44.55±18.17）歲，其中皮肌炎9例，混合性結(jié)締組織病6例，強(qiáng)直性脊柱炎6例，干燥綜合征4例，硬皮病2例，各種血管炎2例；所有患者的臨床診斷均符合國際相應(yīng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。健康對照組：40例均來自南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院同期健康體檢者，男性12例，女性28例，年齡21～76歲，平均（43.32±11.46）歲。AID患者在性別、年齡等一般資料與對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 試劑與檢測方法補(bǔ)體C1q試劑購自上海北加生化試劑有限公司于OLYMPUS-AU5400以免疫透射比濁法檢測，WBC計(jì)數(shù)于Sysmex XE-2100型全自動血細(xì)胞分析儀予以分析，CRP于BECKMAN-IMMAGE800以免疫比濁法檢測，ESR于Percil XC-40型全自動動態(tài)血沉測試儀檢測，所有項(xiàng)目的操作均按照南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科提供的相應(yīng)SOP文件執(zhí)行。

1.3 觀察指標(biāo)比較各組血清補(bǔ)體C1q、WBC、CRP、ESR水平及陽性率。各項(xiàng)指標(biāo)的參考范圍如下：補(bǔ)體C1q的參考值為159～233mg/L，WBC的參考值為4～10×109/L，CRP的參考值為0～8mg/L，ESR的參考值男性為0～15mm/h，女性為0～20mm/ h。其中補(bǔ)體C1q的測定結(jié)果低于或高于其范圍內(nèi)均為陽性結(jié)果，其他項(xiàng)目測定結(jié)果高于參考值上限為本實(shí)驗(yàn)設(shè)定的陽性結(jié)果，低于上限的為本實(shí)驗(yàn)設(shè)定的陰性結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 22.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，定性資料以百分率表示；定量資料采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，變量相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)檢驗(yàn)，定性資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 補(bǔ)體C1q、WBC、CRP和ESR在AID組與健康對照組中的結(jié)果比較SLE患者血清補(bǔ)體C1q明顯低于對照組［（171.58±37.22 vs 192.08±27.85）mg/ L，P＜0.05］，CRP、ESR高于對照組［（13.79±30.38 vs 3.13±2.30）mg/L、（39.47±32.99 vs 6.45±4.36）mg/L，P＜0.01］；非SLE自身免疫病患者血清補(bǔ)體C1q水平相比對照組均有所升高，但RA組更加明顯（P＜0.05）；且其CRP、ESR與對照組相比，差異均具有極顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；WBC計(jì)數(shù)雖然在各類疾病中都有所提高，但是敏感性不高，只有在RA中差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；見表1。

2.2 156例患者血清補(bǔ)體C1q、CRP及ESR之間相關(guān)性的比較156例患者血清補(bǔ)體C1q、CRP和ESR之間的相關(guān)系數(shù)均大于0.300，具有較好的相關(guān)性，其差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），詳細(xì)見表2。

2.3 自身免疫性疾病組血清中補(bǔ)體C1q不在正常范圍的陽性率以不在正常范圍內(nèi)補(bǔ)體C1q做一統(tǒng)計(jì)分析（表3）：SLE組補(bǔ)體C1q高值、低值的陽性率分別為6.67%、53.33%，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），非SLE組高值陽性率與對照組相比（P＜0.05）；AID各組補(bǔ)體C1q不在正常范圍內(nèi)的總陽性率均明顯升高（P＜0.05）。

表1 自身免疫性疾病與對照組幾項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測結(jié)果的對比（x±s）

表2 156例患者其補(bǔ)體C1q、CRP、ESR檢測結(jié)果的相關(guān)性分析

3 討論

自身免疫性疾?。ˋID）是機(jī)體對自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致自身組織和（或）器官功能損害所引起的一類嚴(yán)重危害人類健康的疾病，其發(fā)病率因人群而異，全球總體發(fā)病率為3%，美國為5%～8%，我國約3%。迄今，AID的發(fā)病機(jī)制尚未明了，作為“5D”疾病之一一直受到全世界各國醫(yī)學(xué)專家的高度重視，經(jīng)過多年研究，此類疾病仍只能依據(jù)病史、臨床表現(xiàn)、影像學(xué)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢查等予以綜合分析診斷，實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)指標(biāo)的敏感性和特異性仍有待進(jìn)一步提高，從而為尋找新的更有意義的診斷與治療監(jiān)測指標(biāo)提出可能。

表3 自身免疫性疾病組血清中補(bǔ)體C1q不在正常范圍的百分率（%）

補(bǔ)體是存在于正常人和動物血清、組織液和細(xì)胞膜表面的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì)，由30余種可溶性蛋白和膜結(jié)合性蛋白組成，是天然免疫系統(tǒng)的重要組成部分。補(bǔ)體系統(tǒng)的激活主要通過經(jīng)典途徑、替代途徑和MBL途徑，使補(bǔ)體固有成分依次被激活，形成具有活性的酶，最終以攻膜復(fù)合物的形式介導(dǎo)溶細(xì)胞效應(yīng)［5］。作為補(bǔ)體的激活物，AID患者體內(nèi)存在的大量自身反應(yīng)性T細(xì)胞或（和）自身抗體；自身抗體與游離抗原結(jié)合形成的抗原-抗體復(fù)合物，特別是在抗原量略多時(shí)形成的中等大小的可溶性免疫復(fù)合物，隨血液循環(huán)在全身小血管基底膜或滑液囊沉積下來，在局部激活補(bǔ)體，促進(jìn)免疫復(fù)合物及病變和凋亡細(xì)胞的清除，當(dāng)補(bǔ)體缺陷或功能異常導(dǎo)致免疫復(fù)合物及凋亡的細(xì)胞不能及時(shí)有效的清除時(shí)，易誘發(fā)自身免疫性疾?。?-8］。補(bǔ)體C1是補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑的第一補(bǔ)體成分，是一多聚體分子復(fù)合物，由一個C1q分子以鈣離子依賴方式與兩個C1r、兩個C1s分子相連而成。C1q是其中的一個亞基，為各種補(bǔ)體分子中分子量最大（410kDa）的γ球蛋白；抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合C1q后導(dǎo)致C1q構(gòu)象改變啟動補(bǔ)體的經(jīng)典激活途徑，C1q在其中充當(dāng)起始分子的作用［9］；CRP是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤等疾病均有升高，ESR的臨床意義與CRP相似，此外CRP也可與補(bǔ)體C1q直接結(jié)合而激活補(bǔ)體，促進(jìn)病變和凋亡細(xì)胞的清除，結(jié)合核抗原并使自身抗原躲避免疫系統(tǒng)監(jiān)視或加強(qiáng)其清除，因此CRP可以用于評估自身免疫性疾?。?0］。關(guān)于血清補(bǔ)體C1q與SLE、狼瘡腎炎相關(guān)性的研究已有很多的報(bào)道［11-14］，zhang等發(fā)現(xiàn)補(bǔ)體C1q水平在SLE患者中下降，提示補(bǔ)體C1q與SLE患者病情活動度呈負(fù)相關(guān)。補(bǔ)體C1q缺陷或功能異常，不能及時(shí)地清除免疫復(fù)合物，使得其沉積在血管壁及某些組織中誘導(dǎo)自身抗體的產(chǎn)生，是SLE的一個誘發(fā)因素［15，16］。此誘發(fā)因素是否會誘導(dǎo)其他自身免疫性疾病目前還未見相關(guān)研究報(bào)道，故為進(jìn)一步了解AID與補(bǔ)體C1q的關(guān)系，筆者收集156例AID患者進(jìn)行一些統(tǒng)計(jì)分析。

統(tǒng)計(jì)顯示，SLE患者補(bǔ)體C1q水平低于健康對組［（171.58±37.22 vs 192.08±27.85）mg/L，P＜0.05］，但非SLE的AID患者血清補(bǔ)體C1q水平高于健康對照組，其中RA組補(bǔ)體C1q水平與對照組相比［（230.17±65.29 vs 192.08±27.85）mg/L，P＜0.05］，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，WBC在一般的炎癥反應(yīng)性疾病中都有所升高，在此實(shí)驗(yàn)中敏感性不強(qiáng)，雖然有一定程度的升高，但其平均值都在正常范圍內(nèi)，這與文獻(xiàn)［17］相符。CRP和ESR作為急性時(shí)相反應(yīng)的一個指標(biāo)，其平均水平明顯比對照組高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AID患者血清補(bǔ)體C1q水平與其CRP、ESR呈正相關(guān)，CRP與ESR之間成正相關(guān)，提示補(bǔ)體C1q與CRP、ESR相似，也是一個炎癥反應(yīng)因子；補(bǔ)體C1q不在正常范圍內(nèi)的自身免疫性疾病患者的百分率與對照組相比差異均具有顯著性意義，唯有不同的是SLE中低于正常值下限的百分率53.33%明顯高于正常值上限的陽性率，其他非SLE患者的高值百分率均大于低值，且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這些數(shù)據(jù)可以看出對于非SLE自身免疫性疾病患者血清中補(bǔ)體C1q的水平?jīng)]有我們預(yù)期的下降，相反，其他自身免疫性疾病患者補(bǔ)體C1q水平比正常值高，但都與CRP、ESR水平呈正相關(guān)，也隨著自身抗體滴度的升高而下降，且補(bǔ)體C1q不在正常值范圍的百分率與對照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。可懷疑補(bǔ)體C1q除了可作為SLE的一個診斷指標(biāo)外，提示補(bǔ)體C1q和CRP、ESR一樣也可能是一種炎性反應(yīng)分子，但有待于驗(yàn)證；同時(shí)它對非SLE自身免疫性疾病也存在著一定的相關(guān)性。聯(lián)合檢測補(bǔ)體C1q、CRP和ESR有助于其他自身免疫性疾病的輔助診斷及對疾病的活動性的判斷具有一定的臨床指導(dǎo)意義。

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2016-02-23；

2016-08-24）

南昌大學(xué)科研訓(xùn)練（創(chuàng)新）項(xiàng)目，項(xiàng)目編號：14001834；江西省教育廳學(xué)位與研究生教育改革項(xiàng)目，項(xiàng)目編號：9162-2205000 301，100125

譚立明，e-mial：yuuje@126.com