李潤成，楊　宇，李　淼

（湖南農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，湖南 長沙 410128）

黑山羊細頸囊尾蚴與彎曲桿菌混合感染的診治

李潤成，楊宇，李淼

（湖南農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，湖南 長沙 410128）

圖1　病羊肝臟上突起的腫塊

1　發(fā)病情況

2014年9月湖南株洲某黑山羊養(yǎng)殖場羊只發(fā)病，發(fā)病主要表現(xiàn)為消瘦、病程長、慢性死亡，少數(shù)懷孕母羊消瘦后出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象。用阿苯達唑多次驅蟲仍沒有明顯效果。63只羊，35 d內(nèi)死亡11只。

2　剖檢變化

將極度消瘦的病羊處死剖開胸腹腔可見肝臟腫大，并且肝臟表面有突起的腫塊（圖1），切開腫塊組織呈蜂窩狀，此外在肝臟、腸系膜上有雞蛋大小的囊泡粘附（圖2），泡內(nèi)充滿透明囊液，其他臟器病變不明顯。

3　實驗室診斷

圖2　病羊肝臟上的囊泡

3.1細菌分離培養(yǎng)取羊肝臟腫大部位組織接種于血瓊脂平板，37℃、分別進行有氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)48 h，厭氧培養(yǎng)采用自封袋內(nèi)放置厭氧發(fā)生袋進行。結果有氧培養(yǎng)的平板上沒有長出任何細菌，但在厭氧培養(yǎng)的平板上長出了大量密密麻麻形態(tài)一致的針尖大小菌落。將培養(yǎng)的細菌進行涂片與革蘭染色鏡檢，結果表明，分離細菌為革蘭陰性、彎曲程度不一的桿菌。

3.2分離菌的PCR擴增與測序鑒定取分離菌作為模版，用細菌通用引物［1］進行PCR擴增，擴增結果見圖3，可見從分離菌擴增出了約1 142 bp的目的條帶。將擴增的PCR產(chǎn)物送上海鉑尚生物科技有限公司進行測序（序列已登錄到GenBank，登錄號為KP208684）和Blast分析。結果證明分離菌為彎曲桿菌，與各彎曲菌相應基因片段同源性最高達到99%以上。

圖3　分離菌16S rRNA基因PCR擴增

3.3細菌藥物敏感性檢測及臨床治療效果將分離菌用綿羊血瓊脂培養(yǎng)后，刮取細菌菌落用TSB液體培養(yǎng)基稀釋，按藥敏試驗要求將菌液濃度調至0.5個麥氏單位后，根據(jù)不同細菌特性選擇檢測藥物，采用紙片法進行藥物敏感性檢測，藥物敏感性檢測細菌培養(yǎng)仍然按厭氧法進行。藥敏檢測結果見表1。由表1可見該分離菌對氟苯尼考、恩諾沙星最為敏感。建議羊場采用吡喹酮對羊群進行口服驅蟲，給有明顯發(fā)病表現(xiàn)的羊肌肉注射氟苯尼考，連用3 d。結果10 d控制了病情，沒有再出現(xiàn)發(fā)病羊的死亡，并且羊群的精神狀態(tài)較以前有了很大改善。

表1　分離菌藥物敏感性檢測結果

4　討論與分析

本文對送檢病羊進行了剖檢以及實驗室診斷，從剖檢觀察來看，發(fā)病羊肝臟表面以及腸系膜粘附有明顯的水鈴鐺樣囊泡，說明存在細頸囊尾蚴感染［2-3］，雖然細頸囊尾蚴主要危害幼齡羊，成年羊群常僅為帶蟲者。病羊的臨床癥狀一般不甚明顯，主要是慢性經(jīng)過，但本文通過有氧和厭氧兩種培養(yǎng)方法從發(fā)病羊實質臟器進行細菌分離，結果厭氧方法從肝臟分離到了大量彎曲桿菌，結合臨床針對細頸囊尾蚴、彎曲桿菌聯(lián)合用藥取得明顯效果這一結果。證明該羊群發(fā)病死亡主要原因為細頸囊尾蚴和彎曲桿菌混合感染引起，這也是該養(yǎng)殖場使用阿苯達唑未能取得明顯效果的重要原因。細頸囊尾蚴病是寄生于犬等肉食動物小腸內(nèi)的帶科、泡狀帶絳蟲的幼蟲-細頸囊尾蚴，寄生在羊、豬、牛等動物的腹膜、肝臟等處引起的寄生蟲病。細頸囊尾蚴在世界范圍分布較廣，凡養(yǎng)犬的地方，一般都可能有牲畜感染細頸囊尾蚴，家畜感染細頸囊尾蚴，是由于接觸帶有泡狀帶絳蟲的犬的糞便中的節(jié)片或蟲卵而引起，因此，減少牧區(qū)犬的養(yǎng)殖，或防止犬的糞便污染了牧場、飼料和飲水可減少羊群細頸囊尾蚴感染流行的嚴重程度。至于本文從發(fā)病羊肝臟分離到大量彎曲桿菌，尚未見到類似的報道，該菌可能為羊群感染細頸囊尾蚴后由于機體體質下降繼發(fā)感染所致，同樣這也可能是發(fā)病羊死亡的重要原因。

［1］Run-Cheng Li，Chao-Ting Xiao，Xing Qian，et al.Occurrence of Streptococcus dysgalactiae subsp.Equisimilis in Masked Palm Civet（Paguma larvata）［J］.Journal of Animal and Veterinary Advances，2012，11（12）：2020-2023.

［2］李繁，梁珠嫻.屠宰豬細頸囊尾蚴病的調查與思考［J］.中國獸醫(yī)雜志，2004，21（4）：42.

［3］張長英.烏蘭縣豬細頸囊尾蚴病感染情況調查［J］.中國獸醫(yī)雜志，2008，44（12）：41.

S855.1+2

B

0529-6005（2016）04-0066-02

2015-01-09

李潤成（1979-），男，實驗師，碩士，從事動物傳染病的教學與研究工作，E-mail：lixueshengqq@126.com