賀南南，管永祥，梁永紅，吳昊，羅朝暉*，趙海燕*，顧祖麗

（1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，南京210095；2.江蘇省耕地質(zhì)量與農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)站，南京210036；3.江蘇省農(nóng)業(yè)環(huán)境監(jiān)測與保護(hù)站，南京210036）

高效液相色譜-熒光檢測法同時分析沼液中4種喹諾酮類抗生素

賀南南1，管永祥2，梁永紅2，吳昊3，羅朝暉1*，趙海燕1*，顧祖麗1

（1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，南京210095；2.江蘇省耕地質(zhì)量與農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)站，南京210036；3.江蘇省農(nóng)業(yè)環(huán)境監(jiān)測與保護(hù)站，南京210036）

通過對沼液樣品預(yù)處理過程優(yōu)化、提取劑與洗脫劑的篩選和檢測色譜條件優(yōu)化，建立了固相萃取-高效液相色譜-熒光檢測法分析沼液中4種喹諾酮類抗生素（FQs）的檢測方法。該方法選用Na2EDTA溶液作為提取劑，調(diào)節(jié)樣品pH=4，漩渦混勻后經(jīng)HLB固相萃取柱凈化，選用6 mL甲醇為洗脫劑，濃縮后用高效液相色譜-熒光分析法（HPLC-FLD）檢測，采用乙腈/0.01 mol·L-1四丁基溴化銨作為流動相，外標(biāo)法定量。4種FQs在0.002～5.0 mg·L-1濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，R2均大于0.990。樣品在0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg·L-16個添加水平下的平均回收率在80.4%～105.7%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.0%～5.1%，方法的檢出限為0.004～0.01 mg·L-1。應(yīng)用該方法對南京地區(qū)分別以雞糞、豬糞、牛糞為發(fā)酵原料的3個大中型沼氣工程的沼液樣品進(jìn)行分析，4種喹諾酮類抗生素均被檢出，檢測濃度為5～204 μg·L-1，表明沼液中抗生素污染問題值得關(guān)注。

喹諾酮類抗生素；固相萃取-高效液相色譜-熒光檢測法（SPE-HPLC-FLD）；沼液；分析方法

近年來，在集約化、規(guī)?；男笄蒺B(yǎng)殖過程中，喹諾酮類抗生素（FQs）是迅速發(fā)展起來的一類人工合成的藥物［1］，因其具有抗菌譜廣、抗菌力強(qiáng)、低毒、組織穿透力強(qiáng)、結(jié)構(gòu)簡單、給藥方便等優(yōu)點而被廣泛用來促進(jìn)畜禽生長和減少畜禽疾?。?-3］。目前，中國是世界上最大的抗生素生產(chǎn)國和消費國［4］，每年約生產(chǎn)210 000 t抗生素，其中48%用于農(nóng)業(yè)和畜牧產(chǎn)業(yè)［5］。由于許多種類抗生素藥物在動物體內(nèi)不能被吸收利用，造成30%～90%的抗生素會以原形和活性代謝產(chǎn)物的方式排泄到環(huán)境中［6］。據(jù)研究報道，環(huán)境中殘留的抗生素會影響陸地生物、改變土壤中微生物活動和種群組成［7］，促進(jìn)細(xì)菌耐藥性抗性基因發(fā)展，并逐步演變成新型環(huán)境有機(jī)污染物，進(jìn)而給人類健康帶來嚴(yán)重的威脅［8］。

目前，國內(nèi)外研究者對FQs的檢測分析主要集中于畜禽糞便，關(guān)于沼液中FQs的檢測鮮見報道。沼液是以畜禽糞便為主要發(fā)酵原料，并經(jīng)過甲烷菌厭氧消化后生成［9］，因為其基質(zhì)復(fù)雜且殘留藥物濃度較低（痕量或超微量）［10］，對沼液中的FQs的分析造成了較大干擾。

針對環(huán)境中FQs的檢測分析技術(shù)主要采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS），但該分析方法儀器設(shè)備昂貴，分析成本高，難以普及應(yīng)用［11］。因為FQs在靈敏度較高而成本相對較低的熒光檢測器（FLD）下響應(yīng)良好，所以高效液相色譜-熒光分析法（HPLC-FLD）檢測技術(shù)受到眾多研究者歡迎。He等［12］使用HPLCFLD對廢水中的11種FQs進(jìn)行殘留檢測，該方法檢測限在5～30 ng·L-1；Gao等［13］建立了HPLC-FLD對牛奶、雞蛋、蜂蜜的6種FQs同時檢測分析方法，方法檢測限在70～530 ng·L-1；Sun等［14］利用HPLC-FLD對魚中的8種FQs進(jìn)行檢測分析時發(fā)現(xiàn)，該方法的檢出限在60～220 ng·L-1；Rodriguez等［15］建立了HPLCFID對嬰兒產(chǎn)品中5種FQ檢測分析方法，其最低檢測限為10 ng·L-1；劉博等［16］利用HPLC-FLD對雞糞中6種FQ進(jìn)行檢測分析時發(fā)現(xiàn)，該方法檢出限為0.002～0.022 mg·kg-1；丑亞琴等［17］建立了HPLC-FLD對水產(chǎn)品中4種FQs藥物殘留檢測分析發(fā)現(xiàn)，其定量限為0.004 mg·kg-1。

本研究借鑒了Vázquez等［18］的SPE-HPLC-FID檢測地下水8種FQs的研究技術(shù)，考慮到沼液基質(zhì)的復(fù)雜性，在此基礎(chǔ)上對樣品的前處理過程進(jìn)行優(yōu)化，建立了一種簡單、快速、低成本、可靠、同時檢測沼液中4種喹諾酮類抗生素殘留量的方法。本實驗開發(fā)的研究方法，提取抗生素的過程簡單；不需要增加復(fù)雜的超聲、離心等過程；不需要添加復(fù)雜的提取劑；固相萃取后的洗脫液不經(jīng)過氮氣吹干而是利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)蒸干，顯著節(jié)約時間和實驗成本。另外，基于本實驗采用的液相條件得到的部分FQs的檢出限顯著高于Ni等［19］和Urraca等［20］的文獻(xiàn)報告，適合對沼液中4種FQs的分析，為研究和治理復(fù)雜介質(zhì)環(huán)境中FQs污染提供支撐，以期為沼液的農(nóng)業(yè)安全利用把關(guān)。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀（附FLD檢測器、標(biāo)準(zhǔn)型自動進(jìn)樣器、四元泵、柱溫箱），美國安捷倫公司；Shim-Pack，VP-ODS色譜柱（250 mm×4.6mm，5 μm），日本島津公司；真空泵、十二孔固相萃取裝置，東康科技有限公司；超聲波清洗儀，昆山禾超聲儀器有限公司；Oasia HLB固相萃取柱（3 mL/60 mg），月旭科技股份有限公司；抽濾裝置，南京壽德有限公司；0.7 μm玻璃纖維微膜，昀冠生物科技有限公司；0.45 μm聚四氟乙烯微孔濾膜，上海鼎杰生物科技有限公司；pH計，德國Sartorius公司；超純水器，南京易普易達(dá)發(fā)展有限公司；萬分之一天平，SHIMADAU公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，德國BUCHI公司。

氧氟沙星（FOL）、環(huán)丙沙星（CIP）、恩諾沙星（ENR）、諾氟沙星（NOR）均購于上海瑞永生物科技有限公司，純度均為98%；四丁基溴化銨購于Aladdin公司，純度99%；甲醇、乙腈均為色譜純；氫氧化鈉、檸檬酸、磷酸氫二鈉、乙二胺四乙酸二鈉、磷酸、鹽酸等為分析純，均購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；試驗用水為超純水。

1.2 溶液配制

Na2EDTA-McIIvaine緩沖溶液：稱取一定量的

Na2EDTA、Na2HPO4和檸檬酸，分別配制成0.1、0.2、0.4 mol·L-1的溶液。按照3∶2的比例混合Na2HPO4和檸檬酸，配制成McIIvaine溶液。將0.1 mol·L-1Na2EDTA溶液與McIIvaine緩沖溶液按照1∶1的比例混合，配制成Na2EDTA-McIIvaine緩沖溶液（混合后pH值約為4）。

標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取OFL、CIP、ENR、NOR標(biāo)準(zhǔn)品各0.010 0 g溶于0.03 mol·L-1的氫氧化鈉溶液，用高純水稀釋定容至100 mL，配成100 mg·L-1的工作母液，在4℃避光保存?zhèn)溆?，保質(zhì)期為2個月。

1.3 樣品采集與前處理

沼液樣品采自南京市郊區(qū)3個大中型沼氣工程。以牛糞為發(fā)酵原料的沼液采自南京市浦口區(qū)永寧鎮(zhèn)友聯(lián)村（118°32′16″E，32°10′47″N）；以豬糞為發(fā)酵原料的沼液采自南京市浦口區(qū)大林養(yǎng)殖場（118°34′32″E，32°1′16″N）；以雞糞為發(fā)酵原料的沼液采自南京市江寧區(qū)新洲蛋雞養(yǎng)殖場（118°35′8″E，31°53′34″N）。多點收集新鮮沼液并混合均勻成為一個沼液樣品，避光密封，帶回實驗室在室溫條件下保存。

采集的沼液先通過濾紙過濾除去懸浮物，再通過0.7 μm的玻璃纖維過濾后，準(zhǔn)確量取濾液50 mL到燒杯中，加入0.25 g乙二胺四乙酸二鈉抑制重金屬的螯合，然后用鹽酸調(diào)節(jié)樣品pH=4左右。濾液經(jīng)過漩渦均質(zhì)后保持以1 mL·min-1的速率通過Oasis HLB固相萃取柱進(jìn)行富集［Oasis HLB固相萃取柱使用前，依次用3×2 mL甲醇、3×2 mL超純水、3×2 mL鹽酸（pH=4）進(jìn)行預(yù)處理］，萃取富集后，用6 mL超純水清洗固相萃取柱，并真空干燥30 min。最后用6 mL甲醇緩慢洗脫到10 mL離心管中，將收集的洗脫液在40℃水浴條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，用2 mL超純水復(fù)溶，超聲5 min促溶。以上溶液均過0.22 μm水系濾膜后放入2 mL的棕色玻璃瓶待測。

1.4 色譜條件

色譜柱Shim-Pack，VP-ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫30℃；流動相為0.01 mol·L-1四丁基溴化銨/乙腈混合液（95∶5，V∶V），（用磷酸調(diào)節(jié)pH=3，用前過0.45 μm的聚四氟乙烯微孔濾膜、乙腈使用前超聲脫氣30 min），流速1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量20 μL；熒光檢測器（FLD）檢測：激發(fā)波長280 nm，發(fā)射波長450 nm。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

將標(biāo)準(zhǔn)儲備液用超純水稀釋，配制成濃度為0.002、0.005、0.02、0.05、0.1、0.2、0.1、1、2、5 mg·L-1的 FQs混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.6 回收率的計算過程

根據(jù)文獻(xiàn)［21］的規(guī)定，對添加抗生素的樣品與未添加抗生素的空白樣品同時執(zhí)行SPE-HPLC測試抗生素濃度，按以下公式計算回收率：

加標(biāo)回收率（%）=（加標(biāo)樣品中抗生素濃度-空白樣品中抗生素濃度）/加標(biāo)量×100%

2 結(jié)果與討論

2.1 SPE過程優(yōu)化

2.1.1 提取劑的選擇

從環(huán)境樣品中提取FQs物質(zhì)，提取劑的選擇非常重要，目前常用的提取劑為Na2EDTA-McIIvaine緩沖液。本研究比較了Na2EDTA-McIIvaine緩沖液（pH= 4）和單獨使用Na2EDTA溶液提取沼液各目標(biāo)物的回收率，結(jié)果見表1。分別使用Na2EDTA溶液、Na2EDTA-Mcllvaine緩沖液提取液時，均可以從沼液中提取出目標(biāo)物，但單獨使用Na2EDTA溶液時ENR和NOR的提取效果與使用Na2EDTA-Mcllvaine緩沖液相比存在顯著性差異。同時Na2EDTA-McIIvaine實驗使用量較大，配制過程繁瑣、易堵塞SPE裝置、前處理后的樣品上機(jī)檢測時檢出的雜質(zhì)也較多。綜合考慮本實驗使用Na2EDTA溶液作為沼液中FQs的提取劑。

2.1.2 樣品待測液pH的影響

表1 不同提取劑條件下4種FQs的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（%）Table 1 Percent recoveries and relative standard deviation（RSD）under different extraction agents（%）

FQs在水溶液酸性條件下（通常pH＜5）是陽離子形式，在對FQs樣品預(yù)處理中大多將樣品pH調(diào)節(jié)為酸性，將其轉(zhuǎn)化為陽離子形式有利于提?。?2-23］。選擇Na2EDTA溶液作為提取劑，用HCl或NaOH調(diào)節(jié)樣品pH為2～7，對樣品進(jìn)行提取過SPE柱后上機(jī)測定，每個樣品重復(fù)3次，比較樣品在不同pH條件下

的提取效果。由表2可知，各目標(biāo)物回收率受樣品pH變化影響非常顯著，在一定范圍內(nèi)，抗生素回收率隨著pH的降低而提高。pH=5時，目標(biāo)物回收率較低均小于68.3%，而當(dāng)pH=4時，4種FQs回收率最佳，達(dá)87.5%～101.9%。因此，選擇Na2EDTA溶液作為提取劑，樣品pH調(diào)至4時，提取效率最佳。

表2 樣品在不同pH值條件下4種FQs的回收率（%）Table 2 Percent recoveries of 4 FQs in samples at different pH values（%）

2.1.3 洗脫溶劑和洗脫體積

由于沼液基質(zhì)的復(fù)雜性，洗脫溶劑類型會影響喹諾酮類抗生素的提取效果，需選擇適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑盡可能洗脫目標(biāo)物，同時避免將干擾雜質(zhì)洗脫下來影響目標(biāo)物的檢測。目前常用洗脫液中抗生素的溶劑主要是甲醇、乙腈［24-25］。將1 mL各目標(biāo)物濃度均為2 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用50 mL超純水稀釋后過HLB柱，分別以甲醇、乙腈為洗脫劑，進(jìn)行洗脫實驗，結(jié)果見圖1。甲醇的洗脫效果最理想為91.9%～101.8%，乙腈的洗脫能力比甲醇低，而且甲醇洗脫實際樣品后產(chǎn)生的雜質(zhì)峰并不會對目標(biāo)峰產(chǎn)生干擾，所以對沼液實際樣品洗脫選用甲醇。分別用4、5、6、7、8 mL甲醇洗脫吸附在固相萃取柱上的目標(biāo)物，實驗結(jié)果見圖2，發(fā)現(xiàn)6 mL時目標(biāo)物洗脫效率已達(dá)最高值，最終確定最佳洗脫體積為6 mL。

2.2 色譜分離條件

2.2.1 流動相

喹諾酮抗生素化合物具有兩性基團(tuán)，在水溶液中呈離子狀態(tài)，會因色譜柱的吸附形成拖尾，從而導(dǎo)致諾氟沙星與環(huán)丙沙星很難在較短時間內(nèi)基線分離。結(jié)合其最大吸收波長，實驗確定了激發(fā)波長為280 nm，發(fā)射波長為450 nm，加入磷酸作為改性劑對拖尾現(xiàn)象有較大改善。使用磷酸調(diào)節(jié)流動相pH值，考察pH在2.0～4.0范圍內(nèi)的色譜分離效果，發(fā)現(xiàn)pH在2.5～3.0時，4種FQs可以在合適時間得到基線分離。流動相中乙腈的含量對保留時間影響4種FQs藥物的出峰時間在17～38 min，而樣品中的雜峰集中在14 min之前，不會形成干擾。標(biāo)準(zhǔn)樣品（1.0mg·L-1）、加標(biāo)樣品（以豬糞為發(fā)酵原料的沼液樣品添加濃度為0.5mg·L-1）、沼液樣品中4種FQs的色譜分離圖見圖3。

圖1不同洗脫劑對回收率的影響Figure 1 Effects of different elution solutions on recoveries of FQs

圖2不同洗脫量對回收率的影響Figure 2 Effects of different volume of elution solutions on recoveries of FQs

2.2.2 色譜柱

不同型號的色譜柱因其鍵合工藝和填料方法的不同，同樣條件下分析同樣物質(zhì)時會有不同的色譜行為。本實驗考查了安捷倫公司的AgilentXDB-C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）和日本島津公司的Shim-Pack，VP-ODS色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相0.01 mol·L-1四丁基溴化銨（用磷酸調(diào)pH至2.5～3）/乙腈調(diào)制為95∶5，其余色譜條件不變。圖4為使用AgilentXDB-C18色譜柱時的色譜圖，圖5為Shim-Pack，VP-ODS色譜柱的色譜圖。比較可知，圖5明顯優(yōu)于圖4，所以本研究采用Shim-Pack，VP-ODS進(jìn)行分析。

2.2.3 流速、柱溫

流速和柱溫對樣品保留時間和峰型都有影響。流速增加、柱溫升高都會使保留時間減少，峰寬變窄，峰

型更加尖銳，但是如果流速太大、柱溫太高，會造成峰重疊。本研究考察了0.6、0.8、1.0 mL·min-13個流速，20、25、30、35℃4個柱溫，結(jié)果表明流速1.0 mL·min-1、柱溫30℃時效果最佳。

圖3 標(biāo)準(zhǔn)樣品、加標(biāo)樣品、沼液樣品中FQs的色譜圖Figure 3 Chromatograms of FQs in a standard sample，a spikedsample and biogas slurry samples

圖4 Agilent XDB-C18色譜柱Figure 4 Agilent XDB-C18 chromatographic column

圖5 Shim-Pack，VP-ODS色譜柱Figure 5 Shim-Pack，VP-ODS chromatographic column

2.3 線性范圍和檢出限

配制0.002、0.005、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0 mg·L-1的系列混合工作曲線，按照前述的色譜條件進(jìn)行檢測，以色譜峰面積對抗生素質(zhì)量濃度作校正曲線后得到線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)，采用3倍信噪比計算檢出限，結(jié)果見表3。4種FQs濃度（C）與峰面積（S）呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系（R2＞0.990）。

2.4 添加回收率

分別在50 mL沼液樣品中添加0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個添加水平取3個平行樣，按上述方法進(jìn)行實驗，并計算各目標(biāo)物平均回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），結(jié)果見表4。4種FQs的平均回收率為81.3%～105.7%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差＜10%，表明本方法的準(zhǔn)確度和精密度均符合樣品分析要求。

表3 4種FQs標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Table 3 Calibration equations and correlation coefficients of developed method

2.5 實際樣品檢測

利用上述所建立的分析方法，對南京市以豬糞、牛糞、雞糞為發(fā)酵原料的沼液樣品中4種FQs進(jìn)行了檢測，分析結(jié)果見表5。檢測結(jié)果表明，以豬糞、牛糞、雞糞為發(fā)酵原料的沼液樣品中均檢測到4種FQs。沼液樣品中以豬糞為發(fā)酵原料的沼液中4種抗生素總含量為475 μg·L-1；以牛糞為發(fā)酵原料的沼液中4種抗生素總含量為188.8 μg·L-1；以雞糞為發(fā)酵原料的沼液中4種抗生素總含量為204 μg·L-1。這可能與獸藥使用量最大和豬的消化系統(tǒng)有關(guān)。沼液樣品中氧氟沙星濃度范圍為16.8～103 μg·L-1，環(huán)丙沙星為濃度范圍為5～17 μg·L-1、恩諾沙星濃度范圍為67～151 μg·L-1，諾氟沙星濃度范圍為56～204 μg·L-1，沼液樣品中4種FQs的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均＜10%，諾氟沙星的含量較高，環(huán)丙沙星的含量較低。這可能是因為除了諾氟沙星使用比較廣泛以外，還由于諾氟沙星水溶性比較好，易于以糞尿的形式排出。沼液樣品中諾氟沙星和恩諾沙星的含量比較高，應(yīng)該加強(qiáng)監(jiān)管。

表4 4種FQs的添加回收率（n=3）Table 4 Percent recoveries of developed method for 4 FQs（n=3）

表5 沼液樣品中4種FQs含量（μg·L-1）Table 5 Content of 4 FQs in different biogas slurry samples measured by developed method（μg·L-1）

3 結(jié)論

建立了基于固相萃取-高效液相色譜-熒光檢測法（SPE-HPLC-FLD）分析沼液中4種喹諾酮類藥物的方法。4種FQs的檢測限范圍為0.004～0.01μg·mL-1，外標(biāo)法定量準(zhǔn)確性較好。應(yīng)用該方法對南京郊區(qū)沼液樣品中4種FQs進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)諾氟沙星在以豬糞為發(fā)酵原料的沼液中含量最高，恩諾沙星在以牛糞為發(fā)酵原料的沼液中含量最高，氧氟沙星在以雞糞為發(fā)酵原料的沼液中含量最高。沼液樣品中恩諾沙星、諾氟沙星、氧氟沙星的含量較高，環(huán)丙沙星含量最低。

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Simultaneous determination of four fluoroquinolones in biogas slurry by high Performance liquid chromatograPhy with fluorescence detection

HE Nan-nan1，GUAN Yong-xiang2，LIANG Yong-hong2，WU Hao3，LUO Zhao-hui1*，ZHAO Hai-yan1*，GU Zu-li1
（1.College of Resources and Environmental Sciences，Nanjing Agricultural University，Nanjing 210095，China；2.Jiangsu Station of Cultivateland Qualitative and Agro-Environmental Protection，Nanjing 210036，China；3.Jiangsu Station of Agro-Environmental Monitoring and Protection，Nanjing 210036，China）

An analytical method for simultaneous determination of four fluoroquinolones（FQs）in biogas slurry based on solid-phase extraction and high performance liquid chromatography with a fluorescence detection（HPLC/FLD）was developed in this study.The homogenized sample adjusted to pH=4 was extracted with Na2EDTA solution，purified by Oasis HLB solid phase extraction after vortexing，and eluted with 6 mL methanol solvent.The FQs in the extract were determined by HPLC/FLD with acetonitrile and 0.01 mol·L-1tetrabutylammonium bromide as mobile phases.Quantitation was carried out using an external standard method.The standard curves for all the compounds were linear over the concentration ranges of 0.002 mg·L-1to 5.0 mg·L-1with all correlation coefficients above 0.990.The spiked recoveries at six levels of 0.1，0.2，0.5，1.0，2.0 mg·L-1and 5.0 mg·L-1were ranged from 80.4%to 105.7%，and the relatives standard deviations（RSD）were in the ranges of 1.0%to 5.1%.The limits of detection were from 0.004 mg·L-1to 0.01 mg·L-1.This method was used to analyze four FQs in biogas slurry samples fermented with chicken dung，pig dung，and cow dung collected from 3 large and medium-sized biogas projects in Nanjing.Four FQs were detected in all samples，with concentrations ranging from 5 μg·L-1to 204 μg·L-1，four kinds of FQs were detected. Therefore，antibiotic pollution problems in biogas slurry deserve attention.

fluoroquinolones；solid-phase extraction-high performance liquid chromatography with fluorescence detection；biogas slurry；analytical method

X502

A

1672-2043（2016）10-2034-07

10.11654/jaes.2016-0442

賀南南，管永祥，梁永紅，等.高效液相色譜-熒光檢測法同時分析沼液中4種喹諾酮類抗生素［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2016，35（10）：2034-2040.

HE Nan-nan，GUAN Yong-xiang，LIANG Yong-hong，et al.Simultaneous determination of four fluoroquinolones in biogas slurry by high performance liquid chromatography with fluorescence detection［J］.Journal of Agro-Environment Science，2016，35（10）:2034-2040.

2016-04-01

國家水體污染控制與治理科技重大專項（2012ZX07101-009）；國家公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項（201303089）

賀南南（1991—），女，碩士研究生，主要研究方向為有機(jī)污染物環(huán)境行為與風(fēng)險評價。E-mail：2014103026@njau.edu.cn

*通信作者：羅朝暉E-mail：lzhui@niau.edu.cn；趙海燕E-mail：haiyanzhao@njau.edu.cn