潘　琳，周迎春，劉　華，占松鶴，周宏華

（1. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，安徽合肥　230036；2. 安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥　230091）

安徽省2015年規(guī)模場(chǎng)秋季重大動(dòng)物疫病免疫抗體監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)

潘琳1，周迎春2，劉華2，占松鶴2，周宏華2

（1. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，安徽合肥230036；2. 安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥230091）

為評(píng)估安徽省2015年秋季政府采購(gòu)重大動(dòng)物疫病疫苗的臨床免疫效果，在全省16個(gè)市、2個(gè)直管縣，隨機(jī)選取427個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，采集畜禽血清9 918份，利用ELISA、HA/HI試驗(yàn)進(jìn)行血清學(xué)抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示：豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、口蹄疫O型合成肽苗、A型口蹄疫滅活疫苗、小反芻獸疫弱毒疫苗、高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗、禽流感滅活苗（H5）的免疫抗體合格率分別為88.0%、86.8%、94.3%、89.6%、87.8%、82.0%；而3種滅活疫苗的免疫效果較差，豬O型口蹄疫滅活苗、牛羊O－亞I型口蹄疫滅活苗、高致病性豬藍(lán)耳病滅活苗的免疫抗體合格率分別為41.0%、41.3%、50.5%。建議今后要加強(qiáng)O型和亞I型口蹄疫滅活疫苗以及高致病性豬藍(lán)耳病滅活疫苗的使有效果監(jiān)測(cè)。

重大動(dòng)物疫?。幻庖?；抗體；監(jiān)測(cè)；評(píng)價(jià)

HPPRRS live vaccine and AI（H5 subtype）inactivated vaccine were 88.0%，86.8%，94.3%，89.6%，87.8%，

82.0%， respectively. Three of the inactivated vaccines had poor effects，including O-FMD inactivated vaccine for pigs，

O-Asia I- FMD inactivated vaccine for cattle and sheep and HPPRRS inactivated vaccine，their qualifi cation rates were 41.0%，41.3%，53.5%， respectively. Suggestions that strengthening the immune effect monitoring of the O-FMD and Asia I-FMD inactivated vaccine and HPPRRS inactivated vaccines were put forward.

動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫是我國(guó)當(dāng)前防控重大動(dòng)物疫病的有效措施，是避免和減少疫病大規(guī)模暴發(fā)流行的關(guān)鍵［1］。豬瘟、口蹄疫、高致病性藍(lán)耳病、小反芻獸疫、高致病性禽流感等重大動(dòng)物疫病是目前國(guó)家實(shí)行強(qiáng)制免疫的5大病種［2］。在免疫過程中，疫苗品種的選擇是決定免疫質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一［3］。為此，本研究選擇了政府采購(gòu)的以上5種動(dòng)物疫病的11種疫苗進(jìn)行了免疫抗體的監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)，為今后指導(dǎo)疫苗選用提供參考。

1　材料與方法

1.1免疫用疫苗種類

豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）：廣西麗原、山東齊魯和廣東永順三家企業(yè)生產(chǎn)；O型口蹄疫滅活苗：金宇保靈、中農(nóng)威特、必威安泰三家企業(yè)生產(chǎn)；O型口蹄疫合成肽苗：上海申聯(lián)、中牧股份兩家企業(yè)生產(chǎn)；A型口蹄疫滅活疫苗：中農(nóng)威特生產(chǎn)；牛羊O-亞I型口蹄疫滅活苗：天康生物、中農(nóng)威特兩家企業(yè)生產(chǎn)；小反芻獸疫弱毒疫苗：新疆天康生產(chǎn)；高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗：山東齊魯和吉林正業(yè)兩家企業(yè)生產(chǎn)；高致病性豬藍(lán)耳病滅活苗：上海海利和杭州薦量?jī)杉移髽I(yè)生產(chǎn)；禽流感（H5+H9）滅活苗：遼寧益康、青島易邦、大華農(nóng)和哈維科四家企業(yè)生產(chǎn)；禽流感H5N1（Re-6）滅活疫苗：青島易邦、遼寧益康兩家企業(yè)生產(chǎn)；禽流感二價(jià)H5N1（Re-7+Re-6）滅活疫苗：大華農(nóng)、遼寧益康、青島易邦、乾元浩和廣東永順五家企業(yè)生產(chǎn)。以上疫苗均由政府招標(biāo)采購(gòu)，逐級(jí)發(fā)放供應(yīng)，且由村級(jí)防疫員進(jìn)行防疫并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)。

1.2規(guī)模場(chǎng)選擇

主要選取中小規(guī)模飼養(yǎng)場(chǎng)。豬場(chǎng)存欄母豬30～100頭或年出欄商品豬1 000頭以下，禽場(chǎng)存欄300～10 000只，牛羊場(chǎng)存欄10～500頭（只）。

1.3樣品采集

按照疫苗發(fā)放區(qū)域，每種疫苗選擇兩個(gè)市，每個(gè)市隨機(jī)選擇10個(gè)秋季集中免疫過的中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)。隨機(jī)采樣，每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)采樣2次。依據(jù)飼養(yǎng)動(dòng)物種類，每次采集牛（羊）血清樣本10份、豬血清樣本15份、家禽血清樣本20份。第1次，在疫苗使用后20～30日進(jìn)行，10個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)全部采集；第2次，在第1次采樣的10個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)中隨機(jī)選取5個(gè)，于疫苗免疫后60日左右進(jìn)行。豬、牛、羊血清采集不少于2 mL，家禽血清不少于1 mL，-20 ℃保存待檢。

對(duì)全省16個(gè)市2個(gè)直管縣的427個(gè)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行了采樣，共采集畜禽血清9 918份，其中豬血清3 882份、牛羊血清939份、雞血清 4 492份、鴨血清400份、鵝血清205 份。

1.4檢測(cè)試劑盒

豬瘟抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：99-43220-F301）：美國(guó)愛德士公司（IDEXX）生產(chǎn)；高致病性藍(lán)耳病抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：99-40959-F381）：美國(guó)愛德士公司（IDEXX）生產(chǎn)；口蹄疫O型、亞I型、A型液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)分別為：20151120101-2、20151123102-1、20150706103-1）：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)所生產(chǎn)；口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：201510012）：上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)；小反芻獸疫抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：PPRC-4P-0814）：法國(guó)ID公司生產(chǎn)；禽流感病毒H5亞型HI試驗(yàn)抗原（H5N1亞型，Re-6株）（批號(hào)：2015027）：哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)。

1.5檢測(cè)方法

豬瘟、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病抗體檢測(cè)分別依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16551—2008、GB/T18935—2003和GB/T18090—2008，均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法檢測(cè)［4］，操作方法、判定標(biāo)準(zhǔn)按照試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行；禽流感抗體檢測(cè)依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18936—2003，采用微量紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（HI）方法進(jìn)行。

1.6結(jié)果判定

豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病、小反芻獸疫ELISA抗體檢測(cè)陽(yáng)性，判為免疫合格；口蹄疫液相阻斷ELISA抗體≥26判為免疫合格；禽流感HI抗體效價(jià)≥24判為免疫合格。

2　結(jié)果

2.1總體檢測(cè)結(jié)果

經(jīng)檢測(cè)，豬瘟、小反芻獸疫、H5亞型禽流感的免疫抗體平均合格率較高，在80%以上。其中，雞、鴨、鵝的H5亞型禽流感抗體合格率分別為82.6%（3 709/4 429）、79.5%（318/400）和75.1%（154/205）?？谔阋撸ㄘi、牛、羊）免疫抗體合格率最低，平均為50%，其中豬O型口蹄疫免疫抗體合格率為54.2%（849/1 566）；牛羊O型口蹄疫免疫抗體合格率為32.1%（180/560）；牛羊亞I型口蹄疫免疫抗體合格率為50.5%（283/560）；牛A型口蹄疫免疫抗體合格率為94.3%（66/70）。具體結(jié)果見表1

表1　5種重大動(dòng)物疫病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2各種疫苗的檢測(cè)結(jié)果

免疫21天后的抗體合格率與免疫2個(gè)月后抗體合格率相比，總體是上升趨勢(shì)。11種疫苗的免疫抗體檢測(cè)結(jié)果見表2。

2.3不同種類規(guī)模場(chǎng)的免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

全省共抽檢規(guī)模豬場(chǎng)184個(gè)、規(guī)模牛/羊場(chǎng)59個(gè)。豬瘟、口蹄疫、高致病性藍(lán)耳病、小反芻獸疫抗體檢測(cè)結(jié)果見表3。

2.4不同種類規(guī)模禽場(chǎng)的禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

全省共抽檢規(guī)模雞場(chǎng)164個(gè)、規(guī)模鴨場(chǎng)13個(gè)、規(guī)模鵝場(chǎng)7個(gè)。禽流感抗體檢測(cè)結(jié)果見表4。

表2　11種重大動(dòng)物疫病疫苗的免疫抗體檢測(cè)結(jié)果（單位：份/%）

表3　不同種類規(guī)模畜場(chǎng)4種重大動(dòng)物疫病免疫抗體檢測(cè)結(jié)果（單位：頭/只/%）

表4　不同種類規(guī)模禽場(chǎng)禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3　討論

本次政府采購(gòu)疫苗免疫效果評(píng)價(jià)中的所有樣品均是在免疫1次后隨機(jī)從不同的中小規(guī)模規(guī)模場(chǎng)中采集的。11種政府采購(gòu)的疫苗中，有8種疫苗在免疫后21天達(dá)到了農(nóng)業(yè)部所要求的群體免疫抗體合格率70%的標(biāo)準(zhǔn)，分別是豬瘟活疫苗、O型口蹄疫合成肽苗、A型口蹄疫滅活疫苗、高致病性豬藍(lán)耳病活疫苗、小反芻獸疫弱毒苗、禽流感（H5+H9）滅活苗、禽流感H5N1（Re-6）滅活苗、禽流感H5N1（Re-6+ Re-7）滅活苗。檢測(cè)結(jié)果表明，2015年秋季安徽省政府采購(gòu)的上述疫苗，在質(zhì)量上基本達(dá)到了免疫要求。至于部分養(yǎng)殖服務(wù)企業(yè)、養(yǎng)殖場(chǎng)認(rèn)為政府采購(gòu)疫苗存在質(zhì)量差等問題，有待進(jìn)一步調(diào)查和核實(shí)。

從免疫抗體合格率的總體情況看，豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病、牛A型口蹄疫和H5亞型高致病性禽流感的免疫合格率均達(dá)到了農(nóng)業(yè)部要求的70%的標(biāo)準(zhǔn)，但是O型和亞I型口蹄疫免疫抗體合格率不高，其原因是否與產(chǎn)品質(zhì)量、冷鏈運(yùn)輸、劑量不足、打飛針、免疫程序、免疫抑制等原因有關(guān)［5］，能否通過加大免疫劑量和增加免疫次數(shù)來保證其達(dá)到免疫合格水平［6-7］，有待進(jìn)一步調(diào)查研究。

本次疫苗效果評(píng)價(jià)主要在中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行，未對(duì)散養(yǎng)戶和大型養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行評(píng)價(jià)。主要是因?yàn)榇笮宛B(yǎng)殖場(chǎng)有自己的免疫程序，并且疫苗來源復(fù)雜；而散養(yǎng)戶較為分散，飼養(yǎng)量較小，采樣相對(duì)困難。關(guān)于散養(yǎng)戶和大型養(yǎng)殖場(chǎng)的免疫效果，有待進(jìn)一步研究。

由于本次樣品來自不同市、縣的養(yǎng)殖場(chǎng)，其免疫時(shí)環(huán)境、易感動(dòng)物狀態(tài)、免疫人員技術(shù)水平，以及免疫記錄的規(guī)范性等可能有差異，同時(shí)考慮到疫苗供應(yīng)商的商業(yè)行為，未公開不同廠家疫苗的免疫效果。

4　結(jié)論

從此次免疫監(jiān)測(cè)的結(jié)果來看，安徽省2015年秋季重大動(dòng)物疫病疫苗免疫效果總體情況較好，但有3種滅活疫苗（O型口蹄疫滅活苗、O-亞I型口蹄疫滅活苗、高致病性豬藍(lán)耳病滅活苗）的免疫效果較差。建議加大監(jiān)測(cè)力度，對(duì)免疫抗體效果不理想的畜禽，要及時(shí)補(bǔ)免。

［1］ 裴潔，吳文艷，胡立學(xué)，等. 湖北省2011年重大動(dòng)物疫病免疫抗體監(jiān)測(cè)情況與分析［J］.湖北畜牧獸醫(yī)，2012（8）：18-20.

［2］ 農(nóng)業(yè)部. 關(guān)于印發(fā)《2013年國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》的通知［A］. 北京：農(nóng)業(yè)部，2013.

［3］ 汪紅琴，趙保生，喬瑾，等. 禽類免疫失敗的原因及預(yù)防對(duì)策［J］. 畜牧獸醫(yī)雜志，2014，33（1）：107-108.

［4］ 農(nóng)業(yè)部. 關(guān)于印發(fā)《2015年國(guó)家動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》的通知［A］. 北京：農(nóng)業(yè)部，2015.

［5］ 劉江，劉君，王蕓華，等. 影響動(dòng)物疫苗免疫效果因素分析［J］. 中國(guó)畜禽種業(yè)，2016（1）：37-38.

［6］ 張正鳳，劉永恒，葛東紅，等. 豬瘟、豬口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病三種疫苗組合免疫對(duì)比試驗(yàn)［J］. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2014，30（1）：83-84.

［7］ 王長(zhǎng)彬，李世芬，王澤敏，等. 豬口蹄疫、豬瘟、豬藍(lán)耳病疫苗最佳免疫方法研究［J］.四川畜牧獸醫(yī)，2013（12）：29-33.

（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

Monitoring and Evaluation on Post-vaccine Antibody of Major Animal Diseases in Large-scale Livestock and Poultry Farms in Anhui Province in Fall of 2015

Pan Lin1，Zhou Yingchun2，Liu Hua2，Zhan Songhe2，Zhou Honghua2
（1. Anhui Agricultural University，Hefei，Anhui 230036；2. Anhui Provincial Center for Animal Infectious Disease Prevention and Control，Hefei，Anhui 230091）

To evaluate the immune effects of the compulsory vaccines which were provided by the government for free to protect livestock and poultry in Anhui province in autumn of 2015，427 scaled farms which were immunized these vaccines and distributed in 16 cities and 2 counties were selected and totally 9 918 serum samples were collected from these farms. Then the serum antibodies were tested. The results showed that the antibodies qualifi cation rates of CSF live vaccine（cell source），O-FMD synthetic peptide vaccine，A-FMD inactivated vaccine，PPR attenuated vaccine，

major animal diseases；immunization；antibody；monitoring；evaluation

S851.3

B

1005-944X（2016）10-0020-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2016.10.005

周宏華