展瑞,鄒國楨,季成棟,陸夏良
(南通大學附屬吳江醫(yī)院病理科,江蘇蘇州215002)
AR在ER(-)/HER2(+)乳腺癌組織中的表達及其與臨床病理特征、Ki-67相關性分析
展瑞,鄒國楨,季成棟,陸夏良
(南通大學附屬吳江醫(yī)院病理科,江蘇蘇州215002)
目的觀察雄激素受體(AR)及Ki-67在雌激素受體(ER)(-)/人表皮生長因子受體2(HER2)(+)的乳腺癌組織中的表達及AR與臨床病理特征、Ki-67強度的相關性。方法收集該科2007年1月至2015年12月經(jīng)病理學確診為乳腺癌的62例患者的組織標本,采用免疫組織化學EnVision兩步法檢測ER(-)/HER2(+)乳腺癌組織中AR和Ki-67的表達,統(tǒng)計分析AR與臨床病理特征、Ki-67表達強度的相關性。結果AR表達率為69.57%,Ki-67表達率為5%~8%。AR表達與腫瘤組織學分級、Ki-67表達強度及淋巴脈管侵犯相關(P<0.01或0.05),且與Ki-67高強度表達呈負相關(P<0.05),而與年齡、腫瘤大小、絕經(jīng)與否、淋巴結轉移及臨床分期無明顯相關性(P>0.05)。結論ER(-)/HER2(+)乳腺癌組織中AR表達率較高,與腫瘤分級、Ki-67高強度及淋巴脈管侵犯相關,提示AR高表達者預后較好。
受體,雌激素;乳腺腫瘤/病理學;Ki-67抗原;相關性
乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。近年來,乳腺癌患病率呈上升趨勢,且呈年輕化趨勢,已成為女性惡性腫瘤的死亡原因之首。據(jù)報道,僅2012年全球新發(fā)乳腺癌病例約為1 670萬例,2008年近46萬人死于乳腺癌[1]。因此,對乳腺癌早期而準確的診斷和治療迫在眉睫。研究表明,有10%~15%的乳腺癌患者為人表皮生長因子受體2(HER2)(+),對此類患者應用曲妥單抗聯(lián)合輔助化療可顯著提高無瘤生存率和總生存率[2]。但盡管如此,仍有相當一部分患者治療效果欠佳。75%~80%乳腺癌是激素依賴性的,雄激素受體(AR)在60%~70%乳腺癌組織中呈高表達[3],表明AR在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。目前,關于AR和HER2關系的報道較少,故本研究探討雌激素受體(ER)(-)/HER2(+)乳腺癌組織中AR和Ki-67的表達情況及AR與臨床病理特征、Ki-67強度的相關性。
1.1一般資料收集本科2007年1月至2015年12月經(jīng)病理學確診為乳腺癌的62例患者的組織標本,其中ER(-)/HER2(+)者46例,均為女性,年齡29~65歲,平均42歲。患者均未經(jīng)過放、化療等治療。其中組織學分級1級6例,2、3級40例,伴淋巴結轉移27例。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟/美國癌癥聯(lián)合委員會(AJCC/UICC)TNM臨床分期第6版標準:Ⅰ期12例,Ⅱ期25例,Ⅲ期9例。
1.2方法
1.2.1檢測方法采用免疫組織化學(IHC)EnVision兩步法進行檢測。AR、Ki-67、HER2試劑均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。將乳腺癌組織標本以10%甲醛固定24 h,常規(guī)石蠟包埋,制作成厚度為4 μm的切片。用已知所有IHC指標(ER、HER2、AR、Ki-67)的陽性標本作陽性對照,以磷酸緩沖鹽溶液(PBS)代替一抗作陰性對照。
1.2.2ER(-)/HER2(+)判定HER2經(jīng)IHC染色后從染色范圍和細胞膜染色強度判定:(-)為組織未表達;(+)為大于10%的細胞膜弱陽性;(++)為大于或等于10%細胞膜中等強度或小于或等于10%的細胞膜強陽性;(+++)為大于或等于10%的細胞膜強陽性。HER2(+++)者判為陽性,評定為(++)和(+)的再經(jīng)熒光原位雜交技術進行檢測。ER<10%瘤細胞核陽性判為陰性。
1.2.3結果判斷AR采用大于或等于10%瘤細胞核陽性作為陽性標準。Ki-67陽性細胞為核著色,取任意5個高倍鏡視野中陽性細胞所占細胞總數(shù)比例的平均值為Ki-67陽性率,Ki-67陽性率小于或等于30%為低度,>30%為高度。
1.3統(tǒng)計學處理應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,應用Pearson χ2檢驗和非參數(shù)統(tǒng)計中Spearman等級相關分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2.1AR及Ki-67的表達情況IHC結果顯示,AR及Ki-67主要表達于細胞核。46例乳腺癌患者中,AR陽性32例(69.57%)。Ki-67表達率為5%~80%,其中低強度者19例(41.30%),高強度者27例(58.70%)。
2.2AR表達與臨床病理特征、Ki-67強度的相關性分析AR表達與年齡、腫瘤大小、絕經(jīng)與否、淋巴結轉移及臨床分期無明顯相關性(P>0.05),而與腫瘤組織學分級、Ki-67強度及淋巴脈管侵犯相關(P<0.01或0.05),見表1。經(jīng)Spearman等級相關性分析,AR表達與Ki-67高強度表達呈負相關(P<0.05)。
表1 AR表達與臨床病理特征、Ki-67強度的相關性分析
乳腺癌是一組高度異質性的惡性腫瘤,無論在組織形態(tài)、免疫表型、生物學行為還是治療反應上都存在著極大的差異。根據(jù)美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(NCCN)指南,臨床上對于ER和孕激素受體(PR)(+)的乳腺癌患者給予內(nèi)分泌治療,其有效率可達近70%。因此,目前臨床上多使用IHC染色方法檢測ER、PR和HER2這3種常用的標記物,并將乳腺癌分為3種類型,即管腔型:高表達激素受體腫瘤,預后良好;HER2型:高表達HER2,而激素受體(-);基底細胞樣型:缺少激素受體和HER-2表達,預后較差。
Ki-67是與細胞增殖相關的核抗原,位于細胞核內(nèi),在有絲分裂中起到維持DNA結構的功能,其表達隨細胞周期的變化而變化,可用于判斷細胞的增殖活性,是目前應用最廣泛的增殖細胞標志之一。據(jù)報道,Ki-67表達與多種惡性腫瘤如甲狀腺癌、膀胱癌和卵巢癌等的發(fā)生、發(fā)展和預后密切相關[4],尤其在乳腺癌的診治與預后判斷等方面具有重要的臨床參考價值。在不同年齡和不同類型的乳腺癌中,Ki-67表達也有所不同,可作為乳腺癌無病生存率和無復發(fā)生存率獨立和有意義的預后因素。目前,Ki-67已在臨床上作為乳腺癌病理診斷報告中不可或缺的重要病理標記。在2011年,NCCN指南將Ki-67作為臨床應用的病理學指標之一。本研究根據(jù)Jalava等[5]將Ki-67表達強度分為低度(≤30%)和高度(>30%),而Jalava等[5]報道顯示,Ki-67表達強度為高度者預后較差。本研究結果表明,AR表達與Ki-67高強度表達呈負相關,說明AR高表達者其腫瘤細胞增殖能力較弱,預后較好。
原癌基因HER2屬于表皮生長因子受體,可調(diào)節(jié)細胞的生長、分化和增殖,HER2基因擴增引起HER2受體蛋白過度表達,且隨著陽性表達率的升高,病理分級也增高[6],但預后較差。臨床上,ER(-)/HER2(+)亞群患者常表現(xiàn)為腫瘤惡性程度高、生存率低、病情進展迅速、易發(fā)生淋巴結轉移等特點,但由于曲妥珠單抗(HER2抗體)的問世,改善了HER2(+)乳腺癌患者的預后,影響了乳腺癌的診療模式。該藥治療療效明確,可加強HER2陽性轉移或早期可手術切除乳腺癌患者的化療效果。因此,推薦該藥單用或聯(lián)合化療用于早期可手術切除和轉移性HER2(+)乳腺癌的治療。但臨床上仍有相當一部分患者對HER2抗體無反應,甚至出現(xiàn)了耐藥性。因此,針對這部分乳腺癌患者的遺傳基礎和分子生物學的深入研究將是醫(yī)學上的研究熱點之一。本研究結果顯示,AR在ER(-)/HER2(+)患者中表達率為69.57%,說明ER(-)/HER2(+)亞群中AR表達率較高,為部分乳腺癌患者提供了可能的臨床治療方向。
女性體內(nèi)的雄激素包括由卵巢、腎上腺分泌的睪酮及由腎上腺分泌的雄烯二酮和脫氫表雄酮(DHEA)。有研究表明,所有正常乳腺上皮均表達AR,AR可維持正常乳腺的發(fā)育,并與ER共同保持乳腺內(nèi)分泌的平衡[7]。然而,AR也可以增加乳腺癌的風險,提高惡性腫瘤細胞增殖率。有研究發(fā)現(xiàn),絕經(jīng)后婦女血液中AR濃度升高者其乳腺癌危險性明顯增高,且AR在80%乳腺癌患者中呈高表達,說明AR在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮了重要作用[8]。目前,關于AR與乳腺癌生存率的報道不一。Peters等[9]發(fā)現(xiàn),AR的高表達與乳腺癌的10年生存率呈負相關,但也有學者提出了相反的觀點,認為AR高表達患者有更長的生存時間[10]。本研究結果顯示,AR的表達與年齡、腫瘤大小、絕經(jīng)與否、淋巴結轉移及臨床分期無明顯相關性,而與腫瘤組織學分級、淋巴脈管侵犯、Ki-67高強度表達相關,提示AR(-)者具有惡性程度較高、侵襲性強、預后較差的臨床特征,而AR(+)者具有腫瘤分化和預后較好的臨床特點。
目前,關于AR與HER2關系的研究較少,由于ER和HER2同時表達者較少。有報道研究ER(-)患者,結果顯示AR高表達與HER2的表達強度相關[11]。本研究中,AR的表達率高達69.57%,陰性者僅為30.43%,二者比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),說明在ER(-)/HER2(+)亞群中,AR與HER2的表達相關。
綜上所述,AR在ER(-)/HER2(+)亞群乳腺癌中表達較高,其表達主要與腫瘤組織學分級、淋巴脈管侵犯、高的Ki-67指數(shù)顯著相關,提示AR高表達者具有較好的臨床預后,但目前關于AR與乳腺癌的生存率報道不一致,可能與各研究對象和激素水平不同所致。由于本研究對象數(shù)量的限制,并未進行AR表達與患者總生存率關系的分析。因此,在今后的工作中,將進一步大樣本研究AR與HER2、ER(-)/HER2(+)患者總生存率的關系。而且,隨著對乳腺癌基礎和分子生物學的深入研究,期待對乳腺癌進行更深、更詳細的分型,以便對乳腺癌患者進行精確治療。
[1]Jemal A,Bray F,Center MM,et al.Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin,2011,61(2):69-90.
[2]TolaneySM,BarryWT,DangCT,etal.Adjuvantpaclitaxelandtrastuzumab for node-negative,HER2-positive breast cancer[J].N Engl J Med,2015,372(2):134-141.
[3]Rampurwala M,Wisinski KB,O′regan R.Role of the androgen receptor in triple-negative breast cancer[J].Clin Adv Hematol Oncol,2016,14(3):186-193.
[4]劉秦香.Ki-67在不同類型乳腺癌中的研究進展[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2014,30(3):379-381.
[5]Jalava P,Kuopio T,Juntti-Patinen L,et al.Ki67 immunohistochemistry:a valuable marker in prognostication but with a risk of misclassification:proliferation subgroups formed based on Ki67 immunoreactivity and standardized mitotic index[J].Histopathology,2006,48(6):674-682.
[6]Bang YJ,Van Cutsem E,F(xiàn)eyereislova A,et al.Trastuzumab in combination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER2-positive advanced gastric or gastro-oesophageal junction cancer(ToGA):a phase 3,open-label,randomised controlled trial[J].Lancet,2010,376(9742):687-697.
[7]Yu Q,Niu Y,Liu N,et al.Expression of androgen receptor in breast cancerand its significance as a prognostic factor[J].Ann Oncol,2011,22(6):1288-1294.
[8]Shen H,Yang Y,Zhao L,et al.Lin28A and androgen receptor expression in ER-/Her2+breast cancer[J].Breast Cancer Res Treat,2016,156(1):135-147.
[9]Peters KM,Edwards SL,Nair SS,et al.Androgen receptor expression predictsbreastcancersurvival:theroleof genetic and epigenetic events[J]. BMC Cancer,2012,12:132.
[10]Gonzalez LO,Corte MD,Vazquez J,et al.Androgen receptor expresion in breast cancer:relationship with clinicopathological characteristics of the tumors,prognosis,andexpressionofmetalloproteasesandtheirinhibitors[J]. BMC Cancer,2008,8:149.
[11]Ni M,Chen Y,Lim E,et al.Targeting androgen receptor in estrogen receptor-negative breast cancer[J].Cancer Cell,2011,20(1):119-131.
10.3969/j.issn.1009-5519.2016.18.033
B
1009-5519(2016)18-2872-03
(2016-03-29
2016-04-22)