楊小紅

（河南省鄢陵縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 許昌 461200）

血清與抗凝血漿標(biāo)本在臨床檢驗(yàn)分析中的應(yīng)用探討

楊小紅

（河南省鄢陵縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 許昌 461200）

目的 探討血清和抗凝血漿對于臨床檢驗(yàn)結(jié)果的影響，以及存放時(shí)間對檢驗(yàn)結(jié)果的作用。方法 隨機(jī)選取本院2013年2月至2015年5月門診體檢者50例，采集所有體檢者的靜脈血樣，并分別制備抗凝血漿樣本和血清樣本，對兩組樣本進(jìn)行9項(xiàng)常用臨床檢驗(yàn)指標(biāo)檢驗(yàn)，并分別于存放1、2 h后對相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測記錄。結(jié)果 兩種樣本之間對比顯示，在相同存放時(shí)間內(nèi)，血漿樣本中的K+、Ca2+水平明顯低于血清標(biāo)本，TP、GLU水平明顯高于對照組，差異具有顯著性（P＜0.05）。結(jié)論 標(biāo)本的存放時(shí)間和類型對于檢測項(xiàng)目有著不同的影響，根據(jù)檢測目的及項(xiàng)目對標(biāo)本和報(bào)告單進(jìn)行不同處理，以更好的反應(yīng)血液中各種成分的水平。

抗凝血漿；血清；臨床檢驗(yàn)；存放時(shí)間

隨著近年來我國居民生活水平的逐漸提高，健康體檢所受的重視程度也逐漸上升。特別是隨著血標(biāo)本檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，急查項(xiàng)目在臨床逐漸得到廣泛應(yīng)用［1］。臨床研究指出，標(biāo)本的快速分離對于檢測項(xiàng)目的檢測效果和準(zhǔn)確性具有十分重要的意義［2］。本次研究為探討抗凝血漿和血清標(biāo)本對于檢測結(jié)果影響，以及存放時(shí)間不同檢測結(jié)果的差異，隨機(jī)選取本院近年來門診體檢者50例，并并對進(jìn)行相關(guān)臨床檢驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果匯報(bào)如下。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1樣本來源：隨機(jī)選取本院2013年2月至2015年5月門診體檢者50例，男性28例，女性22例，年齡分布為21～63歲，平均年齡為（47.4± 11.3）歲。

1.1.2試劑：肝素鈉抗凝管（由湖南瀏陽市醫(yī)用醫(yī)具廠提供）；生化試劑乙肝HBsAg試劑（由北京萬泰提供）。

1.1.3儀器：本次研究采用拜爾AV1200全自動(dòng)生化儀進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的檢測，采用Ex1800酶標(biāo)儀、Ex150洗板機(jī)進(jìn)行相關(guān)操作，所有參數(shù)均按照試劑說明輸入。

1.2方法

1.2.1樣本采集：于清晨抽取受檢者9 mL空腹靜脈血，分別注入普通干燥試管、EDTA-K2抗凝管、肝素鈉抗凝管，根據(jù)《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》將抗凝管置于室溫環(huán)境下30 min后進(jìn)行離心，將干燥試管置于37 ℃水浴箱中30 min后進(jìn)行離心，置于室溫環(huán)境下作為備用。每日采集5份，持續(xù)采集10 d。

1.2.2樣本檢測：根據(jù)SOP文件相關(guān)要求進(jìn)行操作，在完成樣本采集處理后，采用AV1200全自動(dòng)生化儀分別對肝素鈉準(zhǔn)備的血清和血漿在1、2 h時(shí)進(jìn)行生化檢測，在30 min、1 h時(shí)采用ELISA酶聯(lián)免疫法對標(biāo)本中的HBsAg水平進(jìn)行檢測。

2　結(jié) 果

2.1兩組樣本在存放1、2 h時(shí)相關(guān)指標(biāo)水平：見表1，由表中數(shù)據(jù)可知，在存放2 h后，血漿標(biāo)本的K+、TP水平明顯上升，Cl-、GLU水平明顯下降（P＜0.05）；血清標(biāo)本的K+水平 明顯上升，Cl-、TP、GLU水平明顯降低，差異具有顯著性（P＜0.05）。兩種樣本之間對比顯示，在相同存放時(shí)間內(nèi)，血漿樣本中的K+、Ca2+水平明顯低于血清標(biāo)本，TP、GLU水平明顯高于對照組，差異具有顯著性（P＜0.05）。

2.2HBsAg檢測：本次研究中，在采集30 min時(shí)，血清標(biāo)本中共計(jì)檢測出10例真陽性，2例假陽性和38例真陰性；肝素抗凝血漿標(biāo)本中共計(jì)檢出9例真陽性，1例假陽性和40例真陰性，兩種標(biāo)本的檢測結(jié)果相比并無明顯差異（P＞0.05）。在采集1 h時(shí)，血清標(biāo)本中共計(jì)檢出11例真陽性和39例真陰性；肝素抗凝血漿中共計(jì)檢出12例真陽性和38例真陰性，兩組標(biāo)本相比并無明顯差異（P＞0.05）。

表1　兩組樣本在存放1、2 h時(shí)相關(guān)指標(biāo)水平對比結(jié)果（）

表1　兩組樣本在存放1、2 h時(shí)相關(guān)指標(biāo)水平對比結(jié)果（）

時(shí)間　　樣本　K+　Ca2+　Cl-　TP　GLU 1 h　　抗凝血漿　4.12±0.23　2.09±0.13　101.1±3.30　77.70±2.62　5.64±1.05血清　4.13±0.29　2.35±0.15　101.7±3.26　76.17±2.50　5.59±1.13 2 h　　抗凝血漿　4.26±0.23　2.10±0.12　99.1±3.49　77.98±2.78　5.03±1.13血清　4.47±0.39　2.35±0.13　99.0±3.61　76.03±2.77　4.57±1.16

3　討 論

目前，臨床存在多種標(biāo)本分離技術(shù)，其中肝素抗凝劑常被用于生化檢測中，以縮短標(biāo)本分離時(shí)間。肝素作為一種含硫酸基團(tuán)粘多糖，能夠促進(jìn)抗凝血酶活性的增強(qiáng)，抑制絲氨酸蛋白酶的活性，從而阻止形成凝血酶，阻止血小板的聚集，具有較強(qiáng)的抗凝強(qiáng)力，且不會(huì)對細(xì)胞體積造成影響，是一種較為理想的生化檢測抗凝劑，而血清標(biāo)本則是一種同樣較為常用的臨床生化檢測標(biāo)本分離技術(shù)［3］。近年來，大量臨床試驗(yàn)均證實(shí)，不同的標(biāo)本分離技術(shù)對于臨床檢測結(jié)果具有較為直接的影響，抗凝血漿和血清標(biāo)本作為兩種常用的臨床生化檢驗(yàn)標(biāo)本，探討其檢驗(yàn)指標(biāo)差異具有十分重要的意義［4］。

本次研究中，共計(jì)對K+、Ca2+、Cl-、TB、GLU及HBsAg六項(xiàng)常用的生化檢驗(yàn)指標(biāo)進(jìn)行檢測。在采集標(biāo)本后，于37 ℃環(huán)境中培養(yǎng)1 h，之后進(jìn)行離心處理，并于2 h時(shí)對上述指標(biāo)進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示，兩組樣本在1、2 h時(shí)的部分檢測結(jié)果存在一定變化。其中，血漿標(biāo)本主要表現(xiàn)在存放2 h后，K+、TP水平明顯上升，Cl-、GLU水平明顯下降。在2 h時(shí)，血漿樣本中的K+、Ca2+水平明顯低于血清標(biāo)本，TP、GLU水平明顯高于對照組（P＜0.05），其原因主要為在凝血過程中，血小板受到破壞，血小板內(nèi)大量K+被釋放至血清中，從而造成血清中K+水平高于血漿；GLU則是成熟紅細(xì)胞的主要能源，受到線粒體缺乏的影響，成熟紅細(xì)胞的能量主要來自糖酵解所生成的高能磷酸化合物，并不斷對GLU進(jìn)行消耗，同血凝塊中相比，抗凝血液中的紅細(xì)胞沉降速度更快，紅細(xì)胞在血漿中僅作較短停留，對于血漿中的GLU消耗相對較少，從而造成血漿中的GLU水平高于血清。同時(shí)，袁紅霞等研究指出，肝素作為一種陰離子多聚電解質(zhì)，通過結(jié)合陽離子使得肝素抗凝血漿中的Ca2+水平降低。因此，為保證檢測結(jié)果的真實(shí)性和可靠性，實(shí)驗(yàn)室在所得到的檢測報(bào)告單中不僅標(biāo)注標(biāo)本的不同性狀，同時(shí)應(yīng)建立匹配參考值。閃全中等報(bào)道指出，隨著標(biāo)本放置時(shí)間的延長，血液中的成分也在發(fā)生著變化，對檢測項(xiàng)目造成不利影響。本次研究中兩組標(biāo)本在采集后1、2 h時(shí)相關(guān)指標(biāo)水平的變化情況同臨床研究中的結(jié)論基本一致。因此，實(shí)驗(yàn)室在采集標(biāo)本后，應(yīng)盡快對其進(jìn)行檢測，或盡快安排對變化較為明顯的指標(biāo)進(jìn)行檢測，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床診斷提供可靠的證據(jù)。

乙肝目前已發(fā)展為一種嚴(yán)重影響我國居民生活健康的流行疾病，其中門診血液樣本檢測是一種十分常用的乙肝檢測方法。本次研究中，對兩組標(biāo)本進(jìn)行乙肝敏感物檢測，其結(jié)果顯示，血清和肝素抗凝血漿標(biāo)本在采集后30 min進(jìn)行檢測時(shí)，均存在假陽性的可能，其原因主要為高凝血清極難將纖維蛋白原一次性徹底清除掉，導(dǎo)致在血清中常存在纖維蛋白絲，給予假陽性肝素的抗凝原理，從而造成在檢測結(jié)果中出現(xiàn)假陽性。王紅等研究指出，枸緣酸鈉對于ELISA具有正向干擾作用。因此部分資料中建議采用EDTA-K2抗凝劑對高凝患者或急查HBsAg標(biāo)本進(jìn)行處理，本次研究由于條件所限未進(jìn)行相關(guān)分析，建議在今后的研究中進(jìn)一步探討。

綜上所述，標(biāo)本的存放時(shí)間和類型對于檢測項(xiàng)目有著不同的影響，根據(jù)檢測目的及項(xiàng)目對標(biāo)本和報(bào)告單進(jìn)行不同處理，以更好的反應(yīng)血液中各種成分的水平。

［1］ 徐震，吳繼華，鈕麗萍，等.肝素抗凝血漿用于生化檢驗(yàn)的可行性分析［J］.安徽醫(yī)藥，2014，18（11）:2154-2156.

［2］ 蘇東，桂滿元，王永娜，等.EDTA-K2抗凝血對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響及校正方法分析［J］.中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2015，12（7）:74-76.

［3］ 黃浩，戴芳，黃玲莎，等.肝素鋰抗凝血漿與血清54項(xiàng)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目結(jié)果的對比分析［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35（15）:2040-2041.

［4］ 郭燕.肝素鈉和肝素鋰抗凝血漿代替血清在臨床生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析［J］.中國基層醫(yī)藥，2015，22（12）:1856-1858.

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1671-8194（2016）25-0111-02