賈萬鈞，鄧飛

南方醫(yī)科大學(xué)深圳醫(yī)院，廣東 深圳 518101

乳腺癌中醫(yī)證型與BRCA1基因突變的相關(guān)性

賈萬鈞，鄧飛

南方醫(yī)科大學(xué)深圳醫(yī)院，廣東 深圳 518101

目的：研究乳腺癌患者的中醫(yī)證型與BRCA1基因突變的相關(guān)性。方法：對95例原發(fā)性乳腺癌患者分別進(jìn)行中醫(yī)證型分類和BRCA1基因突變檢測，探討兩者之間的相關(guān)性。結(jié)果：95例乳腺癌患者中肝郁痰凝證51例（53.68%），沖任失調(diào)證29例（30.53%），正虛毒熾證15例（15.79%）。BRCA1基因突變總陽性率為13.68%（13/95），3種中醫(yī)證型的BRCA1基因突變陽性率相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），正虛毒熾證陽性率高于肝郁痰凝證和沖任失調(diào)證（P＜0.001）。結(jié)論：乳腺癌患者的中醫(yī)證型以肝郁痰凝證多見，而正虛毒熾證患者BRCA1基因突變率最高，乳腺癌的中醫(yī)證型與BRCA1基因突變具有一定的相關(guān)性，開展兩者之間的相關(guān)性研究具有重要的臨床意義。

乳腺癌；中醫(yī)證型；BRCA1基因；突變；相關(guān)性

DOI：10.13457/j.cnki.jncm.2016.10.068

乳腺癌是威脅我國女性健康的常見惡性腫瘤之一，據(jù)統(tǒng)計，我國女性中乳腺癌年發(fā)病人數(shù)約24.9萬人、發(fā)病率37.86/10萬，年死亡約 6.0萬人，死亡率 9.21/10萬［1］。BRCA1基因（breast and orarian cancer susceptibility gene）突變與乳腺癌的發(fā)生密切相關(guān)，其是乳腺癌檢測的主要分子生物學(xué)標(biāo)志物［2］。乳腺癌的中醫(yī)證型與基因表達(dá)之間具有一定的相關(guān)性，進(jìn)行兩者之間的相關(guān)性研究有助于制定治療方案，能有效提高患者的生存質(zhì)量，降低復(fù)發(fā)率，具有重要的臨床意義［3］。本院對95例原發(fā)性乳腺癌患者分別進(jìn)行中醫(yī)證型分類和BRCA1基因突變檢測，探討兩者之間的相關(guān)性，報道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料選取本院2010年1月—2015年12月收治的95例原發(fā)性乳腺癌患者，年齡27～75歲，平均（46.3± 8.7）歲，統(tǒng)計患者的一般情況、臨床癥狀和體征。

1.2中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)參照《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》中乳巖肝郁痰凝證、沖任失調(diào)證、正虛毒熾證的辨證標(biāo)準(zhǔn)。肝郁痰凝證：癥見乳腺腫塊質(zhì)地較硬，膚色不變，情志抑郁；患者胸悶腹脹，伴經(jīng)前乳房腫脹，苔薄，脈弦。沖任失調(diào)證：癥見乳腺腫塊質(zhì)地較硬，膚色青紫，腋下有核；患者面色萎黃，神疲乏力，舌質(zhì)微淡，苔白微膩，脈滑而細(xì)。正虛毒熾證：癥見乳腺腫塊質(zhì)地堅硬，灼熱疼痛，膚色紫暗，界限不清，腋下有核，觸之活動度?。换颊哳^暈?zāi)垦?，心悸氣短，腰酸，盜汗，舌質(zhì)淡，苔白，脈沉細(xì)。

2　研究方法

2.1BRCA1基因突變檢測以酚-氯仿抽提法提取外周血DNA，以核酸蛋白定量儀進(jìn)行純度和濃度檢測。將提取的DNA以酶鏈聚合反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴(kuò)增BRCA1基因的2、11、20等3個外顯子，引物分別為外顯子2上游引物5’-GAAGTTGTCATTTTATAAACCTTT-3’，下游引物5’-TGTCTTTTCTTCCCTAGTATG-3’；外顯子11上游引物5’-AAAGCCAGGGAGTTGGTCTGAG-3’，下游引物5’-GTGCTCCCAAAAGCATAAA-3’；外顯子20上游引物5’-ATATGACGTGTCTGCTCCAC-3’，下游引物5’-GGGAATCC AAATTACACAGC-3’。瓊脂糖凝膠電泳回收并純化PCR產(chǎn)物，進(jìn)行DNA測序，與基因庫序列比對，分析BRCA1基因突變情況［4］。

2.2統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以百分比進(jìn)行描述，采用χ2檢驗。

3　研究結(jié)果

3.1乳腺癌患者中醫(yī)證型分布情況95例乳腺癌患者中肝郁痰凝證51例（53.68%），沖任失調(diào)證29例（30.53%），正虛毒熾證15例（15.79%）。3種中醫(yī)證型所占比例相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中肝郁痰凝證所占比例高于沖任失調(diào)證（χ2=10.450，P=0.001）和正虛毒熾證（χ2=30.088，P＜0.001），沖任失調(diào)證所占比例高于正虛毒熾證（χ2=5.797，P=0.016）。

3.23種中醫(yī)證型的BRCA1基因突變情況見表1。95例乳腺癌患者，BRCA1基因突變總陽性率為13.68%（13/95）。3種中醫(yī)證型的BRCA1基因突變陽性率相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中正虛毒熾證陽性率高于肝郁痰凝證（χ2=44.629，P＜0.001）和沖任失調(diào)證（χ2=31.900，P＜0.001）。

表1　3種中醫(yī)證型的BRCA1基因突變情況　　例

4　討論

BRCA1基因是遺傳性乳腺癌的易感基因，其在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用，BRCA1基因突變檢測可以作為乳腺癌高危人群篩查中的金標(biāo)準(zhǔn)［5］。楊曉晨等［6］對我國漢族人群中BRCA1基因突變攜帶者患乳腺癌的風(fēng)險進(jìn)行了研究，結(jié)果表明BRCA1基因突變攜帶者70歲時單側(cè)乳腺癌的累積發(fā)病風(fēng)險高達(dá)67.2%，BRCA1基因突變攜帶者10年和20年的累積發(fā)病率分別為19.4%和50.3%，說明BRCA1基因突變攜帶者患乳腺癌風(fēng)險顯著高于未突變者，開展我國乳腺癌高風(fēng)險人群進(jìn)行BRCA1基因突變檢測具有重要臨床意義。栗辰等［7］研究指出，BRCA1基因分子量大，其突變位點較多，BRCA1基因突變檢測可為其攜帶者的遺傳咨詢、臨床預(yù)防和治療策略提供重要參考。在本研究中，95例乳腺癌患者BRCA1基因突變總陽性率為13.68%，說明BRCA1基因突變與乳腺癌的發(fā)生具有重要的相關(guān)性。

乳腺癌中醫(yī)辨證分型與分子生物學(xué)標(biāo)志物之間具有明顯的相關(guān)性，如呂生輝［8］研究了乳腺癌中醫(yī)分型對術(shù)后療效的影響，結(jié)果提示肝郁脾虛證患者腫瘤組織的人表皮生長因子受體2（Her-2/neu）陽性率及血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）陽性率最低，痰瘀毒熱證患者腫瘤組織的Her-2/neu陽性率及VEGF陽性率最高；肝郁脾虛證患者術(shù)后無病生存率最高，痰瘀毒熱證患者總生存率最低。周莉等［9］對乳腺癌中醫(yī)辨證分型與分子分型之間的關(guān)系進(jìn)行了研究，結(jié)果指出Luminal A型患者以肝郁氣滯型為主，Her-2過表達(dá)型患者以氣血兩虛型為主，基底細(xì)胞樣型患者以熱毒內(nèi)蘊型為主。目前的研究中，較少有乳腺癌中醫(yī)證型與BRCA1基因突變的相關(guān)性分析。本研究結(jié)果顯示，肝郁痰凝證患者中有1例（1.96%）BRCA1基因突變，沖任失調(diào)證患者未出現(xiàn)BRCA1基因突變，正虛毒熾證患者中有12例（80.00%）BRCA1基因突變。正虛毒熾證的患者BRCA1基因突變率最高，明顯高于肝郁痰凝證和沖任失調(diào)證，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。說明乳腺癌患者的中醫(yī)證型與BRCA1基因突變率之間具有一定的相關(guān)性，在乳腺癌高危人群中有必要開展兩者的結(jié)合性研究，從而制定有效的治療方案。

綜上所述，乳腺癌患者的中醫(yī)證型以肝郁痰凝證多見，正虛毒熾證患者的BRCA1基因突變率最高。乳腺癌的中醫(yī)證型與BRCA1基因突變具有一定的相關(guān)性，開展兩者之間的相關(guān)性研究具有重要的臨床意義。

［1］陳萬青，鄭榮壽.中國女性乳腺癌發(fā)病死亡和生存狀況［J］.中國腫瘤臨床，2015，42（13）：668-674.

［2］劉笑然，李惠平.BRCA1、BRCA2基因突變與乳腺癌風(fēng)險預(yù)測及治療［J］.癌癥進(jìn)展，2015，13（2）：114-119.

［3］金雨婷，徐力.乳腺癌中醫(yī)證型與基因表達(dá)關(guān)系的研究進(jìn)展［J］.中醫(yī)藥導(dǎo)報，2015，21（4）：41-43.

［4］張亞芬，王江芬，高潤芳.散發(fā)性乳腺癌患者BRCA1基因突變的分析［J］.中國藥物與臨床，2013，13（8）：1010-1012.

［5］栗辰，靳彥文，劉曉靜，等.家族性乳腺癌和健康遺傳高危人群BRCA1/2基因突變研究［J］.生物技術(shù)通訊，2015，11（4）：531-534.

［6］楊曉晨，胡震，吳炅，等.中國漢族人群中BRCA1和BRCA2基因突變攜帶者患乳腺癌風(fēng)險的研究［J］.中國癌癥雜志，2015，25（4）：247-252.

［7］栗辰，黃焰.乳腺癌BRCA1、BRCA2基因突變及其臨床應(yīng)用［J］.國際腫瘤學(xué)雜志，2015，42（2）：138-140.

［8］呂生輝.乳腺疾病術(shù)后療效與中醫(yī)證型的相關(guān)性分析［J］.中醫(yī)學(xué)報，2015，30（7）：939-941.

［9］周莉，高紅芳，張紅衛(wèi)，等.乳腺癌中醫(yī)辨證分型與分子分型關(guān)系的臨床研究［J］.江蘇中醫(yī)藥，2015，47（1）：32-34.

（責(zé)任編輯：吳凌）

Correlation of Breast Cancer Chinese Medicine Syndrome and BRCA1 Gene Mutation Rate

JIA Wanjun，DENG Fei

Objective：To study the correlation of breast cancer Chinese Medicine（CM）syndrome and BRCA1 gene mutation rate.Methods：Detected CM syndrome classification and BRCA1 gene mutation of 95 cases of patients with primary breast cancer respectively，and discussed correlation between them.Results：In 95 cases，there was 51 cases with liver-qi stagnation and phlegm stagnation syndrome（53.68%），and was 29 cases with imbablance of Chongren channels syndrome（30.53%），15 cases with vital-qi deficiency and toxicity ablazing syndrome（15.79%）.Total positive rate of BRCA1 gene mutation was 13.68%（13/95）.Comparing BRCA1 gene mutation positive rate of 3 types of CM syndrome，there were significant differences（P＜0.05），positive rate of vital-qi deficiency and toxicity ablazing syndrome was higher than that of liver-qi stagnation and phlegm stagnation syndrome and imbablance of Chong ren channels syndrome（P＜0.01）.Conclusion：Liver-qi stagnation and phlegm stagnation syndrome is the most common syndrome in patients with breast cancer，while BRCA1 gene mutation of patients with vital-qi deficiency and toxicity ablazing syndrome was the highest.There was certain correlation between breast cancer CM syndrome and BRCA1 gene mutation rate.It has important clinical significance to study the correlation between them.

Breast cancer；Chinese Medicine（CM）syndrome；BRCA1 gene；Mutation；Correlation

R737.9

A

0256-7415（2016）10-0161-03

2016-06-04

賈萬鈞（1970-），男，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤病理診斷及基礎(chǔ)研究。