宋清榮

河南安陽市腫瘤醫(yī)院胸外科 安陽 455000

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Topo Ⅱ、MRP和GST-π在食管胃交界部腺癌中的表達及與新輔助化療療效的關(guān)系

宋清榮

河南安陽市腫瘤醫(yī)院胸外科 安陽 455000

目的 探討Topo Ⅱ、MRP和GST-π5在進展期食管胃交界部腺癌新輔助化療療效中的預(yù)測價值。方法 對72例食管胃交界部腺癌患者行SOX方案新輔助化療，以RECIST 1.0評價標(biāo)準評價療效。用免疫組化方法檢測化療前3種蛋白的表達情況，并分析其與化療療效的關(guān)系。結(jié)果 年齡和病理類型與化療敏感性無關(guān)(P>0.05)。本組72例患者中新輔助化療有效率為48.6%，其中5例達病理完全緩解,6例進展。患者腫瘤標(biāo)本中3種蛋白的表達情況：Topo Ⅱ、MRP和GSTπ的陽性率分別為73.6%、34.7%和40.3%。Topo Ⅱ、MRP和GST-π的表達與化療敏感性無關(guān)(P>0.05)。結(jié)論 Topo Ⅱ、MRP和GST-π的表達與食管胃交界部腺癌新輔助化療的療效無關(guān)，尚不能作為預(yù)測SOX方案療效的指標(biāo)。

食管胃交界部腫瘤；Siewert Ⅱ 型；新輔助化療；多藥耐藥相關(guān)蛋白；化療敏感性

食管胃交界部腺癌(adenocarcinoma of esophagogastric junction)(AEGJ)發(fā)病率呈增長趨勢[1]。新輔助化療對進展期胃癌可提高手術(shù)切除率、減少術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、延長生存期[2]。但對于Siewert II型AEGJ，新輔助化療療效的報道較少。我們回顧性檢測了3種多藥耐藥基因相關(guān)蛋白：Topo Ⅱ、P-gp和GST-π在AEGJ活檢標(biāo)本中的表達，探討其與化療療效的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010-06—2013-12，我院對72例進展期Siewert II型AEGJ患者給予新輔助化療。男63例，女9例；年齡40～76歲(中位年齡67歲)。治療前臨床分期為cT3～4N1～3。術(shù)前病理類型：中、低分化腺癌66例(其中4例伴印戒細胞癌，7例伴黏液腺癌)，高分化腺癌2例，黏液腺癌3例，印戒細胞癌1例。入選標(biāo)準：(1)病理檢查確診為腺癌。(2)無遠處轉(zhuǎn)移。(3)腹部增強64排CT顯示局部腫塊侵犯胃壁全層(T3或T4)或有區(qū)域淋巴結(jié)腫大。(4)體力狀況(ECOG)評分為0～2分，且無嚴重心、肺、肝、腎等臟器功能異常。(5) 無其他惡性腫瘤病史及放療化療史。(6)簽署知情同意書，愿意接受新輔助化療及手術(shù)者。

1.2 治療方案 術(shù)前行SOX方案新輔助化療：第1天奧沙利鉑注射液130 mg/m2靜脈滴注2～3 h ，第1～14天替吉奧膠囊40～60 mg口服 ，2次/d。 3周后重復(fù)，共2次?；熗瑫r予以地塞米松、西米替丁、格拉司瓊、苯海拉明等輔助用藥防治不良反應(yīng)?；熃Y(jié)束后4周進行療效評價，若無腫瘤進展則行標(biāo)準AEGJ根治術(shù)(D2)。術(shù)后常規(guī)輔助化療。

1.3 檢測方法

1.3.1 臨床檢測 在新輔助化療前對活檢腫瘤組織作3種蛋白檢測。在新輔助化療前后分別行胃鏡、64排增強CT檢查評價療效。術(shù)后行常規(guī)病理組織學(xué)檢查，進一步評價療效。

1.3.2 免疫組化檢測 標(biāo)本用10%甲醛固定,石蠟包埋,連續(xù)切片厚4 μm。玻片用多聚-L-賴氨酸涂覆,常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色,確定病理類型。采用檸檬酸緩沖液微波抗原修復(fù)法。實驗試劑：鼠抗人Topo Ⅱ(Ki-S1)、鼠抗人MRP(PA28(6))、鼠抗人GST-π(353-10)、即用型單克隆抗體、檢測試劑盒(KIT-9701)、陽性對照片均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司，操作按說明書進行。Topo Ⅱ蛋白定位于細胞核，MRP蛋白定位于細胞膜及(或)細胞質(zhì)，而GST-π則定位于細胞質(zhì)。以細胞結(jié)構(gòu)中存在粗細一致的棕黃色顆粒判斷為陽性。若陽性細胞數(shù)<50%表示蛋白低表達，計為(-)，而陽性細胞數(shù)≥50%則表示蛋白高表達，計為(+)。以上結(jié)果由2名病理學(xué)專家閱片判斷。

1.4 療效判斷 以新輔助化療前后胃鏡、64排增強CT及術(shù)后病理切片作為療效判斷的證據(jù)。新輔助化療后原發(fā)病灶的療效判定根據(jù)RECIST 1.0[3]標(biāo)準評估。分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、疾病穩(wěn)定(SD)、疾病進展(PD)。以CR加PR計算有效率(RR)。毒性反應(yīng)采用NCI-CTC 3.0不良反應(yīng)分級標(biāo)準判定[4]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 使用SASW 18.0統(tǒng)計軟件，對計量資料采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗,相關(guān)分析采用Logistic多因素回歸分析處理相關(guān)數(shù)據(jù)。檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 病理特征 分化良好型[5](包括乳頭狀腺癌、高中分化管狀腺癌)38例，分化不良型(低分化管狀腺癌、黏液腺癌、印戒細胞癌、未分化癌和單純癌)34例。PD患者共6例，未行手術(shù)治療，余66例均行R0切除。年齡<65歲者45例，≥65歲者27例?；颊吣挲g、腫瘤分化程度與化療效果關(guān)系，見表1。

表1 新輔助化療后療效與年齡分化程度的關(guān)系[n(%)]

2.2 治療情況 本組72例患者全部完成新輔助化療SOX三周方案2周期。不良反應(yīng)主要為外周神經(jīng)毒性、惡心嘔吐、粒細胞減少、血小板減少，均經(jīng)對癥治療后緩解，未出現(xiàn)III度及以上不良反應(yīng)。新輔助化療后4周行標(biāo)準AEGJ根治術(shù)(D2)。術(shù)后嚴重并發(fā)癥：吻合口出血3例，吻合口瘺2例，均保守治療治愈。

2.3 新輔助化療結(jié)果及術(shù)后病理結(jié)果 本組66例手術(shù)治療患者新輔助化療綜合療效判斷：5例CR(6.9%)，30例PR(41.7%)，31例SD(43.1%)。新輔助化療總有效率RR(CR+PR)為48.6%。結(jié)果顯示AEGJ對SOX三周方案化療中度敏感。術(shù)后病理結(jié)果顯示：5例未見殘留癌細胞，活檢病理均為低-中分化腺癌或低分化腺癌，而且不合并粘液腺癌或印戒細胞癌等其他成分。有4例僅見灶狀散在癌細胞簇，分別為中低分化腺癌、中分化腺癌合并乳頭狀腺癌、低分化腺癌、中分化腺癌。病理結(jié)果顯示單純中低分化腺癌化療效果較好。術(shù)后病理分期(AJCC 2010年TNM分期標(biāo)準)[6]： 9例無法分期(5例未發(fā)現(xiàn)殘留癌細胞，4例癌細胞零散分布，無法判定T分期)，Ⅱ期23例、Ⅲ期34例。

2.4 預(yù)測因子檢測的結(jié)果 各預(yù)測因子的表達與年齡、分化程度無明顯相關(guān)性(P>0.05)。在72例AEGJ標(biāo)本中，3種蛋白的表達情況及與化療療效的關(guān)系見表2。Topo Ⅱ、MRP和GST-π陽性表達分別為53例(73.6%)、25例(34.7%)、和29例(40.3%)，回歸結(jié)果顯示在CR+PR組和SD+PD組之間均無顯著性差異(P>0.05)。

表2 各預(yù)測因子表達情況及與療效的關(guān)系[n(%)]

3 討論

研究表明[7]AEGJ與中遠段胃癌在臨床病理指標(biāo)及分子標(biāo)記物上存在明顯差異，提示兩者在發(fā)生發(fā)展機制上可能存在不同。新輔助化療在進展期胃癌中受到關(guān)注，Li等[8]的研究顯示：新輔助化療能顯著改善中國人群進展期胃癌的治療效果，提高5 a無瘤生存率。但將AEGJ單獨進行新輔助化療研究的報道仍較少。腫瘤細胞耐藥是消化道惡性腫瘤療效差、復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率高、5 a生存率低的主要原因。如何預(yù)測AEGJ對化療的敏感性，找到較為準確的預(yù)測新輔助化療敏感性的因子，將有助于制定出針對性個體化化療方案，減少原發(fā)性耐藥發(fā)生和不獲益的治療，提高5 a無瘤生存率及患者生活質(zhì)量。

我們應(yīng)用SOX三周方案對AEGJ進行新輔助化療，有效率為48.6%，與有關(guān)報道基本相似[9]。達到了降期、提高R0切除率的目的，而且不良反應(yīng)均經(jīng)治療后緩解。術(shù)后僅發(fā)生3例吻合口出血、2例吻合口瘺。表明新輔助化療并未明顯增加手術(shù)并發(fā)癥及手術(shù)風(fēng)險?；熜Чc年齡、腫瘤分化程度無明顯相關(guān)性。

多藥耐藥基因產(chǎn)物主要為Topo Ⅱ、MRP和GST-π。我們回顧性分析了Topo Ⅱ、MRP和GST-π在AEGJ新輔助化療前的表達，探討其與化療敏感性的關(guān)系。

在其他惡性腫瘤的研究結(jié)果顯示[10]，Topo Ⅱ在腫瘤細胞中的表達增強可以提高以DNA拓撲異構(gòu)酶為靶點的抗腫瘤藥物的效果。而Topo Ⅱ的含量下降及酶活性的降低均會引起易解離復(fù)合物形成減少,導(dǎo)致DNA損傷減少而致腫瘤細胞對化療藥物耐受。MRP是通過減少還原型谷胱甘肽的協(xié)同轉(zhuǎn)運機制來降低細胞內(nèi)的藥物濃度[11]，從而導(dǎo)致腫瘤細胞耐藥。研究表明[12]細胞表達MRP增高將明顯增加腫瘤細胞對烷化類抗癌藥的耐藥性藥物抵抗性。而GST-π主要是通過將谷胱甘肽耦聯(lián)到化療藥物上，從而增加了化療藥物外流，降低了抗腫瘤藥物的細胞毒性作用[13]。本組中Topo Ⅱ、MRP和GST-π的表達與化療效果之間均無明顯相關(guān)，與有關(guān)研究[14]相一致，說明其表達狀況尚不能預(yù)測SOX方案在AEGJ新輔助化療的作用。

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(收稿 2016-02-22)

Expression of Topo Ⅱ,MRP and GST-π in adenocarcinoma of esophagogastric junction and its relation to neoadjuvant chemotherapy

SongQingrong.

DepartmentofSurgery,AnyangTumorHospital,Anyang, 455000,China

Objective To investigate the predictive values of Topo Ⅱ, MRP and GST-π to neoadjuvant chemotherapy in patients with adenocarcinoma of esophagogastric junction (AEGJ). Methods Clinical data of 72 patients of locally advanced AEGJ between June 2010 and Dec 2013 were analyzed retrospectively, who underwent neoadjuvant chemotherapy were reviewed．All patients were given SOX neoadjuvant chemotherapy and the responses to treatment were evaluated according to RECIST 1.0．Expressions were detected by immunohistochemistry in 72 cases of AEGJ tissues before neoadjuvant chemotherapy．Relationship between various proteins and chemotherapy efficacy was analyzed by univariate and logistic multivariate regression analyses.Results The chemotherapy sensitivity had no correlation with age and pathological types(P>0.05)．The overall response rates was 48.6% including complete response in 5 cases and progressive(advanced) disease in 6 cases. Expressions of the 3 proteins in 72 cases of AEGJ tissues were as follows：Topo Ⅱwas 73.6%, MRP was 34.7%, GST-πwas 40.3%. Topo Ⅱ, MRP and GST-π were not correlated with chemotherapy sensitivity(P>0.05).Conclusion Expression of Topo Ⅱ, MRP and GST-π has not great value in the prediction of SOX neoadjuvant chemotherapy efficacy，they may not be used to predict the efficacy before chemotherapy for AEGJ patients．

Esophagogastric junction neoplasms; Siewert Ⅱ; Neoadjuvant chemotherapy； Multidrug resistance-associated protein； Chemosensitivity

R446.6

A

1077-8991(2016)04-0005-03